
pcr复制长链短链计算方法如下:
1、复制长链,对于复制长链的PCR,一般需要设计一对外显子特异性引物,这对引物位于目标DNA序列的两端,并且方向相反。在PCR反应中,引物将结合到目标DNA序列的两端,聚合酶将从一个引物开始向另一个引物复制整个目标DNA序列。此时,PCR产物的长度为目标DNA序列的长度加上两个引物的长度,再减去2个碱基的重复长度(因为聚合酶复制出的PCR产物的两端各有两个碱基的重复序列),即PCR产物长度=目标DNA序列长度+2×引物长度-2。
2、复制短链,对于复制短链的PCR,需要设计一对引物,其中一只引物位于目标DNA序列的正向链上,另一只引物则与之互补,并位于目标DNA序列的反向链上。在PCR反应中,引物将结合到目标DNA序列的两端,在聚合酶的作用下,正向链和反向链被同时复制,从而得到PCR产物。此时,PCR产物的长度为目标DNA序列的长度,即PCR产物长度=目标DNA序列长度。