・１２０・ 现代药物与临床Ｄｒｕｇｓ＆Ｃｌｉｎｉｃ 第３Ｏ卷第２期 ２０１５年２月 当归芍药散对抗结核药物致大鼠肝损伤的保护作用及其机制研究 丈高艳，曾谊 ，冯 枭，何花，宋梅梅，朱珠 南京市胸科医院，江苏南京２１００００ 摘要：目的探讨当归芍药散水提取物对抗结核药物肝损伤的保护作用及其机制。方法将６０只ＳＤ大鼠随机分为６组， 即对照组、模型组、硫普罗宁组（６０ ｍｇ／ｋｇ）和当归芍药散水提取物低、中、高剂量（８、１６、３２ ｇ／ｋｇ）组，给药８周。分 别测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、天冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）水平及血清和肝脏超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二 醛（ＭＤＡ）水平；采用ＲＴ－ＰＣＲ方法测定大鼠肝脏肿瘤坏死因子 ｃ【（ＴＮＦ一Ⅱ）ｍＲＮＡ表达水平；利用Ｗｅｓｔｅｎ Ｂｌｒｏｔｔｉｎｇ法测 定大鼠肝脏ＴＮＦ—ｆｉ，蛋白表达水平。结果 与模型组比较，当归芍药散水提取物中、高剂量组均显著降低血清Ａｕ’、ＡＳＴ水 平，上调血清和肝脏ＳＯＤ活性，下调血清和肝脏ＭＤＡ水平，并降低肝脏ＴＮＦ．０【ｍＲＮＡ和蛋白表达水平。结论 当归芍药 散水提取物对抗结核药物肝损伤的保护作用机制可能与抑制ＴＮＦ．ａ表达和脂质过氧化有关。 关键词：当归芍药散；水提取物；肝损伤；ＴＮＦ：ａ；脂质过氧化；保护作用 中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７４．５５１５（２０１５）０２．０１２０．０６ ＤｏＩ：１０．７５０１／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—５５１５．２０１５．０２．００２ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊ ｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ＷＥＮ Ｇａｏ－ｙａｎ，ＺＥＮＧ Ｙｉ，ＦＥＮＧ Ｘｉａｏ，ＨＥ Ｈｕａ，ＳＯＮＧ Ｍｅｉ－ｍｅｉ，ＺＨＵ Ｚｈｕ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｃｈｅｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｎａｎｊｉｎｇ，２１００００，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｓｉｘｔｙ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｉｎｔｏ ｓｉｘ ｇｒｏｕｐｓ：Ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｉｏｐｒｏｎｉｎ ｇｒｏｕｐ（６０ ｍｇ／ｋｇ），ａｎｄ Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ（８，１ ６，ａｎｄ ３２ ｇ＆ｇ）ｇｒｏｕｐｓ．Ａｌｌ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｆｏｒ ８ ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ａｌａｎｉｎｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＬＴ）ａｎｄ ａｓｐａｒｔａｔｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＳＴ）ｉｎ ｓｅｒｕｍ，ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｔｈｅ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ） ａｎｄ ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）ｉｎ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ—ａ（ＴＮＦ—ａ）ｍＲＮＡ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ＲＴ－ＰＣＲ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｒｏｔｅｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ａｓｓａｙｅｄ ｂｙ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ， Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｔ ｍｅｄｉｕｍ ａｎｄ ｈｉｇｈ ｄｏｓｅｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｅｒｕｍ ＡＬＴ ａｎｄ ＡＳＴ ｌｅｖｅｌｓ，ｅｌｅｖａｔｅｄ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ＭＤＡ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ＴＮＦ—ｃ【ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｌｅｖｅｌｓ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａｓ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｉｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＴＮＦ—ａ ａｎｄ ｌｉｐｉｄ ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ；ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ；ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ；ＴＮＦ—ｃ【：ｌｉｐｉｄ ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ；ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ 近年来，结核病在全世界发病率呈上升趋势， 现的 ］。因此，寻找一种有效的护肝方法是患者坚 持抗结核治疗、减少结核耐药和复发的关键。抗结 核药物导致肝损伤，患者常表现为食欲下降、恶心 欲吐、皮肤巩膜黄染等症状，症状、体征与中医学 的“胁痛”、“黄疸”、“药物毒”等症状相似，病位 已经对全球公众健康造成了巨大威胁。目前临床常 用的抗结核病药都具有一定的副作用，其中最显著 的就是对肝脏的损害［１－２１。在所有的一线抗结核病药 中，异烟肼是引起肝毒性的主要药物＿３］，其他己报 道的抗结核药物的肝毒性大多是与异烟肼合用时发 收稿日期： ２Ｏｌ４一ｌ１—１８ 在肝，但与脾胃相关。孙琪等【５Ｊ认为本病治疗应以 基金项目： 南京市医学科技发展专项资金资助一般性课题（ＹＫＫ１２１３１） 作者简介： 文高艳（１９８３一），女，中西医结合呼吸方向硕士，住院医师。Ｔｅｌ：（０２５）５８６１９８０６ Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｅｎｇａｏｙａｎ＠１２６．ｃｏｒｎ ｛通信作者 曾谊（１９７２一），女，硕士学历，主任医师。Ｅ－ｍａｉｌ：９６０５５９０５１＠ｑｑ．ｔｏｍ 现代药物与临床Ｄｒｕｇｓ＆Ｃｌｉｎｉｃ 第３Ｏ卷第２期 ２０１５年２月 疏肝健脾、化湿泄热法治疗为主。马国玲等ｌ６］认为 本病主要存在湿邪困脾、肝气郁滞、脾胃虚弱、瘀 毒内结、气阴两虚，涉及脏器主要在肝胆和脾胃， 虚实夹杂。当归芍药散为《金匮要略》妇人良方， 具有养肝和血、健脾祛湿等功效 Ｊ。已有研究证 实当归芍药散水煎剂可治疗脂肪肝、肝硬化腹水 ２方：法 ２．１提取液的制备 当归芍药散每剂８７ ｇ，含当归９ ｇ、白芍３０ ｇ、 茯苓１２ ｇ、白术１２ ｇ、泽泻１５ ｇ和川Ｉ芎９ ｇ。确定 全方成人每日用药量，根据人体一大鼠体表面积换 算系数¨ ，换算大鼠的用药量，最终确定为低、中、 高剂量［８、１６、３２ ｇ生药／（ｋｇ・ｄ）］。按比例将上述各 等【８ ］。本实验研究当归芍药散对抗结核药物所致 大鼠肝损伤模型的作用，并对其作用机制进行探讨， 以期为临床治疗提供实验和理论依据。 １材料 １．１仪器与试剂 ＸＨＦ．１高速分散器（宁波新芝生物科技股份有 限公司）；３Ｋ１５台式高速冷冻离心机（Ｓｉｇｍａ公司）； ７５６ＭＬ型紫外一可见光光度计（上海菁华科技仪器 有限公司）；Ｂｉｏ—ｒａｄ垂直电泳槽、ＰＣＲ仪器；水平 电泳槽。 异烟肼［货号１３３７７，质量分数≥９９％（ＴＬＣ）］、 利福平［货号Ｒ３５０１，质量分数≥９７％（ＨＰＬＣ）］购 自Ｓｉｇｍａ公司；硫普罗宁（原料药，质量分数＞９９％） 购白海口奇力制药；当归（生品，产地甘肃）、白芍 （炒品，产地安徽）、茯苓（生品，产地安徽）、白术 （炒品，产地浙江）、泽泻（生品，产地福建）、川Ｉ芎 （生品，产地四川Ｉ）均由安徽省毫州市皖中饮片厂生 产；丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、天冬氨酸氨基转移 酶（ＡＳＴ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和丙二醛（ＭＤＡ） 试剂盒购自南京建成生物工程研究所；ＴＲＩＺＯＬ购 自美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司，ｃＤＮＡ合成用逆转录酶 Ｍ．ＭＬＶ购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司，Ｔａｑ酶和ＰＣＲ用缓冲 混合液购自南京生兴生物工程技术服务有限公司； ＧＡＰＤＨ（上海康成生物工程有限公司，ＨＲＰ标记 抗ＧＡＰＤＨ单抗，货号ＫＣ一５Ｇ５）、ＴＮＦ—Ｃ【（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司，兔抗ＴＮＦ－０【抗体，货号 ３７０７）和抗兔二抗（上海晶美生物技术有限公司， ＨＲＰ标记羊抗兔ＩｇＧ抗体，货号ＳＢ一２００）均购白 商业公司；所有引物均由南京生兴生物工程技术服 务有限公司设计和合成，采用文献中已有序列【Ｊ ＵＪ； 其他试剂均为国产分析纯。 １．２动物 ＳＰＦ级ＳＤ大鼠，雄性，体质量（２００±２０）ｇ， 均购于南京市江宁区青龙山动物养殖中心，生产许 可证号ＳＣＸＫ（苏）２００７—０００８。实验前适应环境 １周，自由饮水、进食，每日１２ ｈ照明，室温（２５± ２）℃。 药材（当归２７０ ｇ、白芍９００ ｇ、茯苓３６０ ｇ、白术 ３６０ ｇ、泽泻４５０ ｇ和川芎２７０ ｇ）置于煎煮容器内， ＤＨ，ｔ＜Ｈ当于药材量１０倍的蒸馏水，浸泡３０ ｍｉｎ后加 热煮沸，开始用强火，沸腾后改用文火，保持微沸 ３０ ｍｉｎ，搅拌，趁热滤过。药渣再加５倍蒸馏水同 法煎煮，沸后３０ ｍｉｎ，滤过。合并两次滤液，将煎 煮液混合浓缩至１ ７４０ ｍＬ，含生药量１．５ ｇ／ｍＬ，冷 藏备用。当归芍药散给药剂量按生药量计算。 ２．２动物分组、给药和处理 ＳＤ雄性大鼠６０只，随机分为６组，即对照组、 模型组、硫普罗宁组（６０ ｍｇ／ｋｇ）和当归芍药散水 提取物低、中、高剂量（８、１６、３２ ｇ／ｋｇ）组，每 组均为ｌ０只。当归芍药散水提取物、硫普罗宁组分 别ｉｇ给药，给药容积为１０ ｍＬ／ｋｇ，对照组、模型组 ｉｇ给予等量生理盐水。每天上午给药１次，连续给 药８周。每天在给药前１ ｈ，除对照组给予等量生理 盐水外，其余各组ｉｐ异烟肼７０ ｍｇ／ｋｇ和ｉｇ给予利 福平７０ ｍｇ／ｋｇ 引，给药容积为１０ ｍＬ／ｋｇ。 在末次给药后１ ｈ，用１０％水合氯醛３００ ｍｇ／ｋｇ ｉｐ麻醉大鼠，腹主动脉取血（取血前１２ ｈ禁食，不 禁水），离心取血清，置于４℃保存。处死动物后， 于冰台快速分取肝脏组织，液氮冷冻后置于一７０℃ 条件下保存。 ２．３生化指标测定 按照试剂盒说明书测定大鼠血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、 ＳＯＤ和ＭＤＡ水平。 ２．４肝脏中ＳＯＤ和ＭＤＡ水平测定 肝脏组织在１０倍体积的生理盐水中充分匀浆， 匀浆液１０ ０００×ｇ，４℃离心１５ ｍｉｎ取上清液进行 测定。 ２．５肝脏组织ＨＥ染色 大鼠肝脏摘除后迅速置Ｃａｍｏｙ氏固定剂乙醇一 氯仿一醋酸（６：３：１）中室温固定１ ｄ，并保存在 ７０％乙醇中。肝组织在梯度酒精中脱水，石蜡包埋 后，制片（７ Ｉｘｍ厚）。切片在二甲苯中脱蜡后，ＨＥ 染色，脱水，中性树脂封片，光学显微镜下观察。 ・１２２・ 现代药物与临床Ｄｒｕｇｓ＆Ｃｌｉｎｉｃ 第３０卷第２期 ２０１５年２月 ２．６ ＲＴ－ＰＣＲ法测定肝脏中肿瘤坏死因子．伐 （ＴＮＦ． ）ｍＲＮＡ表达 的影响 与对照组比较，模型组血清ＡＬＴ、ＡＳＴ和ＭＤＡ 水平均显著升高（Ｐ＜０．０１、０．００１），血清ＳＯＤ水 平显著降低（Ｐ＜０．００１）。与模型组比较，当归芍药 散水提取物中、高剂量组和硫普罗宁组均显著降低 血清ＡＬＴ、ＡＳＴ和ＭＤＡ水平（ＪＰ＜０．０５、０．０１、 按照文献报道方法ｕｌｊＪ测定肝脏中ＴＮＦ．０【ｍＲＮＡ 表达，并采用Ｑｕａｎｔｉｔｙ Ｏｎｅ １．Ｄ软件（Ｂｉｏ．Ｒａｄ）对条 带进行吸光度分析，计算目的基因与内参ＧＡＰＤＨ的 比值，从而得到待测基因的相对表达值。 ２．７ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ法测定肝脏中ＴＮＦ．Ⅱ蛋白表达 ０．００１），并且显著升高血清ＳＯＤ水平（尸＜０．０ｌ、 ０．００１）。而当归芍药散水提取物低剂量组对ＡＬＴ、 ＡＳＴ、ＳＯＤ和ＭＤＡ水平均无显著影响。结果见表１。 ３．２对大鼠肝脏ＳｏＤ和ＭＤＡ水平的影响 与对照组比较，模型组肝脏ＭＤＡ水平显著升 高（Ｐ＜０．０１），而肝脏ＳＯＤ水平显著降低（Ｐ＜ ０．００１）。与模型组比较，当归芍药散水提取物中、 高剂量组和硫普罗宁组均显著降低肝脏ＭＤＡ水平 按照文献报道方法 ｊｊ测定肝脏中ＴＮＦ—Ｃｃ蛋白 表达，采用分析软件（Ｂｉｏ—Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）进行灰度值分析，计算目的蛋白与 ＧＡＰＤＨ的灰度比值。 ２．８数据处理及统计 所有实验数据均用数据处理结果用Ｘ－４－Ｓ表 示。采用ＳＰＳＳ １３．０进行单因素方差分析，ＬＳＤ法 进行组问统计学差异分析。 ３结果 （尸＜０．０ｌ、０．００１），增强肝脏ＳＯＤ水平（Ｐ＜０．０１、 ０．００１）。而当归芍药散水提取物低剂量组对ＳＯＤ和 ＭＤＡ水平均无显著影响。结果见表２。 ３．１对大鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＳＯＤ和ＭＤＡ水平 表１ 当归芍药散水提取物对抗结核药物所致肝损伤大鼠血清ＡＩ 、ＡＳＴ、ＳＯＤ和ＭＤＡ水平的影响（ｘ一．４－ｓ，ｎ＝８） Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ ｓｅｒｕｍ ＡＬＴ，ＡＳＴ，ＳＯＤ，ａｎｄ ＭＤＡ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇ．ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｒａｔｓ（ｘ ４－ ，，ｌ＝８） 与对照组比较：”Ｐ＜０．０１…Ｐ＜Ｏ．００１：与模型组比较： ＜Ｏ．０５ ¨Ｐ＜ＯＯ１ ¨ ＜Ｏ００１ ｗ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ； ．．＜Ｏ．叭 ＜０．００１ ＜０．０５ ＜Ｏ．０１ ＜Ｏ．００１ ｖｓｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ 表２ 当归芍药散水提取物对抗结核药物所致肝损伤大鼠肝脏ＳＯＤ和ＭＤＡ水平的影响（一ｘ４－Ｓ，，ｌ＝８） Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｄａｎｇｇｕｉ Ｓｈａｏｙａｏ Ｐｏｗｄｅｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ＳＯＤ ａｎｄ ＭＤＡ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ａｎｔｉ・—ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇ・－ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙ ｒａｔｓ（ｘ４－ ，，ｌ＝８） 与对照组比较：”Ｐ＜Ｏ．０１” ＜０．００１；与模型组比较： Ｐ＜Ｏ．Ｏ１ 料Ｐ＜０ ００１ Ｐ＜Ｏ．０１ …Ｐ＜０００１ ｖｓ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ； ．＜Ｏ．０１ Ｐ＜Ｏ．００１ ｖｓｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ・１２４・ 现代药物与临床Ｄｒｕｇｓ＆Ｃｌｉｎｉｃ 第３０卷第２期 ２０１５年２月 ４讨论 抗结核药物所致肝损伤所表现出的症状应归属 中医“肝郁血虚，肝脾失调”所致，肺结核在中医 上归属“肺痨”范畴，痨病以正虚为主，在治疗肝 损的过程中应以补虚为主，肝属木，脾属土，故在 治疗肝损伤的同时应注意培土生金、滋水涵木，肝 损伤病位在肝，涉及肺、脾、肾，中医认为人是一 个整体，常以整体观治疗疾病为思路，故在治疗肝 损伤过程中，应注意养血、柔肝、补肺、健脾。 当归芍药散由当归、白芍、茯苓、白术、泽泻、 川芎组成，方中白芍养血敛阴、缓急止痛，为君药， 白术甘苦而燥，健脾燥湿，为臣药，君臣相配，养 肝扶脾，川芎条达肝气，并活血行滞，当归养血活 血，茯苓渗湿健脾宁心，泽泻利湿消肿，本方的特 点为肝脾同调，养血疏肝与健脾祛湿同行，养血而 不腻脾胃，渗利而无伤阴血。 已有研究表明，抗结核药物所致肝损伤临床症 状和体征与各型病毒性肝炎相比无特异性，易于病 毒性肝炎混淆【Ｊ引。ＴＮＦ一仅表达失调是许多免疫介导 的炎症性疾病的重要病理因素［１５－１６１。在肝中，ＴＮＦ 直接或间接的诱导肝细胞死亡，在各型病毒性肝炎、 非酒精性脂肪肝等引起的肝脏损伤中发挥了重要作 用。因此推测，ＴＮＦ—Ｃｃ可能介导了抗结核病药引起 的大鼠肝脏损伤¨７１。 当归芍药散具有抗氧化、调节免疫等药理作用。 肝组织损伤与炎症、脂质过氧化等密切相关。实验 研究已证实，当归芍药散可明显改善肝硬化腹水大 鼠肝功能，减少腹水生成及延缓肝脏病理改变进程。 且当归芍药散可治疗慢性盆腔炎，这与其降低血清 ＴＮＦ一０【表达水平，调节机体免疫功能有关【１引。本研 究显示，当归芍药散水提取物中、高剂量组血清ＡＬＴ 和ＡＳＴ水平较肝损伤组明显降低，肝细胞水肿和坏 死均有不同程度的改善，且肝ＴＮＦ．ａ ｍＲＮＡ和蛋白 表达水平较肝损伤组也明显降低，而肝损伤组大鼠 肝ＴＮＦ．ａ ｍＲＮＡ和蛋白表达水平与对照组比较显 著上调。研究结果说明，抗结核药物所致大鼠肝损 伤的作用机制可能与肝中ＴＮＦ．０【异常表达有关， ＴＮＦ．ａ在抗结核药物所致大鼠肝损伤过程中起着关 键性作用，当归芍药散可能通过抑制肝中ＴＮＦ— 的 表达，从而改善抗结核药物所致大鼠的肝损伤。 脂质过氧化作用可引起细胞膜及线粒体膜的脂 质过氧化，进而导致肝脏毒性发生，异烟肼和利福 平合用引起的大鼠肝脏损伤，与脂质过氧化呈明显 相关性¨圳。实验研究显示，当归芍药散水提取物中、 高剂量组可显著降低肝损伤大鼠血清和肝脏ＭＤＡ 水平，增高肝损伤大鼠血清和肝脏ＳＯＤ水平，提 示抑制肝脏脂质过氧化可能是当归芍药散改善抗结 核药物所致大鼠肝损伤的途径之一。 本实验为深入研究抗结核药物所致大鼠肝损伤 的发病机制以及当归芍药散改善肝损伤的作用机制 提供了新的思路，进而为临床应用中药治疗抗结核 药物所导致肝损伤提供理论依据及治疗途径。 参考文献 ［１］Ｈｕａｎｇ Ｙ Ｓ．Ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆｄｒｕｇ・ｍｅｔａｂｏｌｉｚｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇ— ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ】．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ ＤｒｕｇＭｅｔａｂ Ｔｏｘｉｃｏｌ， ２００７，３（１）：１－８． ［２］Ｐｏｒｅ Ｓ Ｍ，Ｓｈｉｎｄｅ Ｋ．Ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｄｒｕｇ ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｗｉｔｈ ｆｉｒｓｔ—ｌｉｎｅ ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌｉｚｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｏｆ ｐｕｌｍｏｎａｙｒ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ［Ｊ】＿Ｊ Ｐｏｓｔｇｒａｄ Ｍｅｄ， ２０１４，６０（１）：９０・９２． ［３】 Ｆｏｕｎｔａｉｎ Ｆ Ｔｏｌｌｅｙ Ｅ，Ｃｈｒｉｓｍａｎ Ｃ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｉｓｏｎｉａｚｉｄ ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｙｔ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｈｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｌａｔｅｎｔ ｕｔｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ａ ７－ｙｅａｒ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ａ ｐｕｂｌｉｃ ｈｅａｌｔｈ ｕｔｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｃｌｉｎｉｃ［Ｊ］．Ｃｈｅｓｔ，２００５，１２８（１）：１ １６—１２３． ［４］Ｔｏｓｔｍａｎｎ Ａ，Ｂｏｅｒｅｅ 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