壳聚糖对实验大鼠降血脂作用的初步研究

２６　现代检验医学杂志２００５年１１月第２Ｏ卷第６期Ｊ　Ｍｏｄ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００５，Ｖｏ１．２０，Ｎｏ．６　壳聚糖对实验大鼠降血脂作用的初步研究　郑铁生　，王亚娜　，宗爱萍　（１．江苏大学医学技术学院，江苏镇江摘要：目的２１２００１；２．镇江科力生物技术有限公司，江苏镇江２１２００１）　探讨壳聚糖的降脂作用及其机理。方法　用ＳＤ雄性大鼠，随机分为高脂对照组和低、中、高三个壳聚糖剂　量实验组，观察实验组与对照组给养高脂饲料２８　ｄ前后大鼠血清总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的变化。结果　中、高剂量实验组大鼠血清总胆固醇与高脂对照组相比有非常显著性差异（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）；低、中剂量实验组大鼠血清甘油　三酯与高脂对照组相比有非常显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０１），高剂量实验组的差异极为显著（Ｐ＜Ｏ．００１）；低剂量实验组大鼠血清　低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇与高脂对照组相比有非常显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０１），中、高剂量实验组的差异极　为显著（Ｐ＜Ｏ．００１）。结论　壳聚糖具有显著降低高血脂大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇的作用和提　高血清高密度脂蛋白胆固醇的作用。　关键词：壳聚糖；大鼠；血脂；脂蛋白　中图分类号：Ｑ５９１．５　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７１～７４１４（２００５）０６—０２６—０２　Ｐｒｉｍａｒｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　Ｃｈｉｔｏｓａｎ　ｔｏ　ｔｈｅ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　Ｂｉｇ　Ｒａｔ　０ｆ　Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ—ｌｏｗｅｒｉｎｇ　Ａｃｔｉｏｎ　ＺＨＥＮＧ　Ｔｉｅ—ｓｈｅｎｇ　，ＷＡＮＧ　Ｙａ—ｎａ　，Ｚ０ＮＧ　Ａｉ～ｐｉｎｇ　（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ　２１２００１，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｚｈｅｎｊ。ｉａｎｇ　Ｋｏｌｙ　Ｂｉｏｌｏｇｙ－ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｃｏ．ＬＴＤ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ　２１２００１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｃｈｉｔｏｓａｎ　ｄｅｃｌｉｎｅｓ　ｔｈｅ　ｆａｔ　ａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｕｓｅｄ　ｔｈｅ　ｂｉｇ　ｒａｔ　ｏｆ　ｍａｌｅ　ｏｆ　ＳＤ，ｒａｎｄｏｍ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｏｗ，ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ａｍｏｕｎｔ　ｃｈｉ—　ｔｏｓａｎｓ．ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｂｉｇ　ｒａｔ’Ｓ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ＴＣ，ＴＧ　ａｎｄ　ＨＤＬ－Ｃ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ｂａｃｋ　ｆｅｅｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｆｏｄｄｅｒ　ｉｎ　２８　ｄａｙｓ　ｂｅ—　ｔｗｅｅｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｇｒｏｕｐ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ＴＣ　ｏｆ　ｂｉｇ　ｒａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ，ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｖｅｒｙ　ｈｕｇｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ＴＧ　ｏｆ　ｂｉｇ　ｒａｔ　ｆｏ　ｔｈｅ　ｌｏｗ，ｍｅｄｉｕｍ　ｄｏｓｅ　ｅｘ－　ｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），Ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ　ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．００１）．Ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ＬＤＬ—Ｃ　ａｎｄ　ＨＤＬ—Ｃ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｖｅｒｙ　ｈｕｇｅ　ｄｉｆ—　ｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．０１）．Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ，ｈｉｇｈ　ａｍｏｕｎｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｄ　ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ　ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．００１）．Ｃｏｎｃｌｕ—　ｓｉｏｎ　Ｃｈｉｔｏｓａｎ　ｈａｓ　ｔｈｅ　ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｂｉｇ　ｒａｔ’Ｓ　ｓｅｒｕｍ　ＴＣ，ＴＧ，ＬＤＬ—Ｃ　ａｎｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ＨＤＬ—Ｃ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｈｉｔｏｓａｎ；ｂｉｇ　ｒａｔ；ｌｉｐｉｄ；ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　　目前认为高脂血症是心脑血管病的最重要的　究，报道如下。危险因素之一。心血管疾病是发达国家人口中死亡　１材料和方法　的重要原因，虽然发病机理尚未完全阐明，但与血　（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、低密度脂蛋白胆固醇　１．１　实验动物ＳＤ雄性大鼠（体重１５０～２００　ｇ）：　脂升高是密切相关的。高血脂表现为总胆固醇　江苏大学医学部实验动物中心提供。　１．２　壳聚糖及剂量选择　壳聚糖（脱乙酰度＞　（ＬＤＬ—Ｃ）升高，高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ—Ｃ）降　９０　９，６）：由镇江科力生物技术有限公司提供。壳聚糖　低。降低ＴＣ水平可明显降低心血管疾病的死亡　实验剂量：低剂量：８３．３　ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ；中剂量：１６６．７　率［１　］。随着我国经济的发展，食物结构不断改变，　ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ；高剂量：３３３．３　ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ。　国内高脂血症患者日益增多，因此寻找疗效确切、　１．３仪器和试剂　毒副作用小的降血脂药已成为各国医药界关注的　甲壳类动物外壳，具有调血脂活性，能阻止实验性　１．３．１仪器：７１７０型全自动生化分析仪（日本岛　１．３．２试剂：胆固醇、脱氧胆酸钠（ＢＲ，北京海淀　重要课题。壳聚糖（ｃｈｉｔｏｓａｎ，ＣＴＳ）来源于虾、蟹等　津）。　大鼠血清胆固醇升高，体外实验表明，胆酸能与　微生物培养基制品厂产品）。ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ和　ＣＴＳ骨架上所带正电荷结合　］。因此，ＣＴＳ作为降　ＨＤＬ—Ｃ测定试剂盒（ｆｉｇ京中生公司产品）。　脂药物有着广泛的前景。近年来，随着高分子科学　和生物医学工程的发展，ＣＴＳ在医学方面的研究　日益增多，国内外已经把ＣＴＳ应用于生物医学领　１。３．３基础饲料：江苏大学医学部实验动物中心　提供。　１．４　实验方法　域　］。本文主要对ＣＴＳ的降血脂作用进行初步研　１．４．１　实验分组：将大鼠随机分为高脂对照组和　作者简介：郯铁生（１９４８一），男，江苏丹徒人，大学本科，副教授，主要从事临床生化和生化制品的研究。　维普资讯 http://www.cqvip.com

现代检验医学杂志２００５年ｌ１月第２Ｏ卷第６期Ｊ　Ｍｏｄ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００５，Ｖｏ１．２０，Ｎｏ．６　２７　低、中、高三个剂量实验组，每组１Ｏ只，各组之间在　分析仪上分别测定各鼠空腹１２　ｈ尾静脉血清ＴＣ、　体重、血清ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ和ＨＤＬ—Ｃ含量上的指　ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ和ＨＤＩ　一Ｃ含量等指标，并同时设质　标均无显著性差异。　控。　１．４．２动物给养：每天分别给予１ｇ胆固醇和０．２　１．５统计采用配对ｔ检验。　ｇ脱氧胆酸钠的合成高脂饲料，同时实验组给予　２　实验结果　低、中、高三个剂量的壳聚糖，给养２８　ｄ。　２．１　壳聚糖对大鼠血清ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ、ＨＤＬ—Ｃ　１．４．３血脂测定：依照试剂盒说明书方法在生化　含量的影响见表１。　表１　ＣＴＳ对大鼠血清各项指标含量的影响（　士５，ｍｍｏｌ／Ｌ）　’与高脂对照组相比有非常显著性差异（Ｐ＜Ｏ，０１）；　与高脂对照组相比有极显著性差异（Ｐ＜Ｏ．ＯＯ１）。　由表１可见，经口给予ＣＴＳ　２８　ｄ后，与高脂对　的作用。ＣＴＳ调血脂的机理尚无定论，但目前普遍　照组相比，ＣＴＳ具有显著降低高血脂大鼠的血清　接受的观点是ＣＴＳ作为一种胆酸络合剂与胆固醇　ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ的作用和提高血清ＨＤＬ—Ｃ的作　结合以后增加胆酸排出，而达到降低胆固醇的目　用。　的。另外ＣＴＳ的分子量大小、黏度和脱乙酰度等许　３讨论　流行病学的资料表明，ＬＤＬ—Ｃ浓度的升　多因素影响ＣＴＳ调血脂效果。胆固醇的代谢是相　高、ＨＤＬ—Ｃ浓度的降低与心脑血管疾病的发病率　当复杂的，它涉及许多的酶如ＨＭＧ—ＣｏＡ还原酶、　呈正相关　］。ＨＤＬ介导胆固醇的逆向转运，即　肝脂酶、卵磷脂胆固醇酰基转移酶等。总之，壳聚糖　ＨＤＬ通过清道夫受体ＳＲ—ＢＩ帮助胆固醇从外周组　是否通过其它方式调血脂还有待进一步研究。　织流出，转运到肝脏进行代谢，在肝中胆固醇不断　参考文献：　转化为胆酸，随胆汁排出肠腔，从而达到降低血浆　［１］Ｅｘｅｃｕｔｉｖｅ　ｓｕｍｍａｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｈｉｒｄ　ｒｅｐｏｒｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎ—　中胆固醇水平，起到预防动脉粥样硬化性心脑血管　ａｌ　Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）ｅｘｐｅｒｔ　疾病的目的［６］。食物中脂类的消化除需胰脂肪酶　ｐａｎｅｌ　ｏｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｉｇｈ　ｂｌｏｏｄ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　ｉｎ　ａｄｕｌｔｓ（ａｄｕｌｔ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｐａｎｅｌ　外，还要胆汁酸盐作乳化剂。ＣＴＳ能够降血脂的原　Ⅲ）［Ｊ］．ＪＡＭＡ，２００１，２８５：２４８６－－２４９７．　因可能与其正电性有关。正电性的ＣＴＳ和负电性　［２］鄢盛恺．关于临床血脂测定的建议［Ｊ］．中华检验医　的胆汁酸相结合而排出体外［３］，脂肪不被乳化，就　学杂志，２００３，２６（３）：１８２—１８４．　会影响到脂肪的消化吸收，从而降低血清ＴＧ含　［３］　Ｊｕｎｇ　ＫＬ，Ｓｏｏ　ＵＫ．Ｊｕｎｇ　ＨＫ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉｔｏｓａｎ　ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｉｔｓ　ｈｙｐｏｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉｃ　ｃａｐａｃｉｔｙ　量。胆固醇主要在肝脏中转化成胆汁酸，在胆囊中　［Ｊ］．Ｂｉｏｓｃｉ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９９９，６３（５）：８３３—　有一定储量，胆汁酸通常在完成脂肪的消化吸收　８３９．　后，约９５　胆汁酸由小肠再吸收回到肝脏即胆汁　［４］旭丘光志（日）著，司佩君（台）译．甲壳质、壳糖胺的　酸的“肠肝循环－［７３，胆酸进入肝脏后会促进肝胆汁　惊人临床疗效［Ｍ］．世茂出版社（台），１９９５：５—８．　的分泌。ＣＴＳ与胆汁酸结合排出体外，重吸收入肝　［５］Ａｃｔｏｎ　ＳＬ，Ｋｏｚａｒｓｋｙ　ＫＦ，Ｒｉｇｏｔｔｉ　Ａ．Ｔｈｅ　ＨＤＬ　ｒｅｃｅｐ—　ｔｏｒ　ＳＲ－ＢＩ：ａｎｅｗ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｔａｒｇｅｔ　ｆｏｒ　ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅ—　脏中的胆汁减少，使胆囊排空。而胆囊中必须有一　ｒｏｓｉｓ［Ｊ］．　ｚ　Ｔｏｄａｙ，１９９９，５（１２）：５１８—５２４．　定量的胆汁酸储备，这就促进肝脏将胆固醇转化成　［６］Ｙｌｉｔａｌｏ　Ｒ，Ｌｅｈｔｌｎｅｎ　Ｓ，Ｗｕｏｌｉｊｏｋｉ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ—　胆汁酸，使血胆固醇降低。高密度脂蛋白将外周组　ｌｏｗｅｒｉｎｇ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｓａｆｅｔｙ　ｏｆ　ｃｈｉｔｏｓａｎ［Ｊ］．　Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌ　ｆｏｒｓｃｈｕｎｇ，２００２，５２（１）：１—７．　织的胆固醇运向肝脏，进而排出体外，故ＨＤＬ有　［７］郑铁生．临床生物化学检验［Ｍ］．北京：中国医药科　“胆固醇的清道夫”之称。故ＨＤＬ含量升高，有利　技出版社，２００４：１９６—１９７．　于胆固醇清除，降低血胆固醇含量。另外，ＣＴＳ为　［８］季君晖，李红梅．壳聚糖吸附胆固醇的研究［Ｊ］．天　动物性食物纤维，能吸附胆固醇［８］，减少它的吸收。　然产物研究与开发，１９９９，１１（６）：５４—５６．　收稿日期：２００５—０６—２０　由上可见，ＣＴＳ具有显著降低高血脂大鼠的　血清ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ的作用和提高血清ＨＤＩ　一Ｃ