DPPH抗氧化能力测定

2.1 待测液的制备

将绿原酸(纯度56%)、维生素C和没食子酸分别配制成体积分数为0.1mg/mL的无水乙醇溶液。 2.1.1 绿原酸母液的配制 称取 9.0 mg绿原酸，定容到50ml，即可得到绿原酸的母液0.1mg/mL。然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。

分别为 mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml;

mg/ml。

2.1.2 Vc母液的配制 称取 mg VC，定容到100ml，即可得到VC的母液。然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。

分别为 mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml;

mg/ml。

2.1.3 没食子酸母液的配制 称取 mg 没食子酸，定容到100ml，即可得到没食子酸的母液。然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。

分别为 mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。 2.1.4 DPPH母液的配制 称取 mg DPPH，用无水乙醇定容到100ml，即可得到DPPH的母液。然后，再将所配制的母液按照要求稀释成至一定浓度的溶液。CDPPH= mg/ml。（建议用0.025mg/mL）

2.2 DPPH.溶液的可见光谱

以无水乙醇为对照，在分光光度计上对DPPH.溶液进行在440～600nm下扫描。Amax= nm 2.3 抗氧化活性测定

DPPH.是一种稳定的自由基，它的乙醇溶液呈紫色，在可见光区最大吸收峰为 nm。当DPPH.溶液中加入自由基清除剂时，溶液颜色变浅，517nm处的吸光度变小，而吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈线性关系。因此，可用来检测自由基的清除情况，从而评价某物质的抗氧化能力，其能力用清除率(Scavenging Rate,SR)来表示，清除率越大，抗氧化能力越强

具体实验步骤及方法：

精确吸取的DPPH.溶液2mL与2ml无水乙醇混合均匀后，以相对应的溶剂(4mL无水乙醇)为对照，用分光光度计测定上述溶液在 nm处的吸光度值(A0)。 A0=

2.3.1 绿原酸样品溶液的抗氧化能力测定

精确吸取上述不同浓度的绿原酸溶液2mL，分别与浓度 mg/ml的DPPH.溶液2mL混合，摇匀后放置30min。以相对应的溶剂(无水乙醇)为对照调零，用分光光度计分别测定上述溶液在 nm处的吸光度值(Ai)，分别测得Ai值。

A1 ；A2 ；A3 ；A4 ；A5 ；A6 ；A7 。

精确吸取上述不同浓度的绿原酸溶液2mL，分别与2mL无水乙醇混合均匀后，以无水乙醇为对照，用分光光度计分别测定各混合液在波长 nm处的吸光度值(Aj)，分别测得Aj值。

A1 ；A2 ；A3 ；A4 ；A5 ；A6 ；A7 。 将以上数据代入下列公式计算其清除率。 清除率SR(％)=1[4.5]

。

AiAj100% A0其中，

Ai：为2mL绿原酸、维生素C和没食子酸与 2mL 的DPPH.溶液混合后在波长 nm处的吸光度值； Aj：为2mL绿原酸、维生素C和没食子酸分别与2mL无水乙醇溶剂混合后在波长 nm处的光值； A0：2mLDPPH.溶液与2mL无水乙醇溶剂混合后在波长 nm处的吸光度值。