离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察

实验五离体⼩肠平滑肌的⽣理特性及药物作⽤的观察

【实验⽬的】学习⼀种离体组织器官试验⽅法；观察离⼦成分、酸碱度、温度、⼄酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔⼩肠平滑肌的作⽤；分析平滑肌活动的某些⽣理特性及理化环境改变对它的影响。

【实验原理】消化道平滑肌具有⾃动节律性、较⼤的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等⽣理特性。将离体的组织、器官⾄于模拟的内环境中，可在⼀定时间内保持其功能，从⽽为我们检测它们的⽣理学和药理学特性提供了便利的条件。功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。【实验步骤】1.恒温浴槽的准备⼯作2.标本制备3.仪器连接与设置4.启动计算机开始记录【观察项⽬】1.⾃动节律收缩

2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作⽤(1)⼄酰胆碱的作⽤(2)阿托品的作⽤

3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作⽤(1)肾上腺素的作⽤(2)去甲肾上腺素的作⽤4.观察钙离⼦对肠断收缩的影响5.观察温度对肠断收缩的影响6.观察酸碱度对肠断收缩的影响【结果分析】

1.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作⽤(1)⼄酰胆碱的作⽤

在浴槽中加⼊⼄酰胆碱后，可见离体肠管活动增强，幅度增加。出现上述现象的机理，⽬前认为⼄酰胆碱可与肌膜上的M受体结合，使得两类通道开放：⼀类为电位敏感性Ca2+专⽤通道，另⼀类为特异性受体活化Ca2+ 专⽤通道。前⼀类通道对Ach敏感，⼩剂量Ach即引起开放；后⼀类通道对Ach相对不敏感，只有⼤剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增⾼，进⽽激活肌纤蛋⽩—肌凝蛋⽩—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张⼒增加。(2)阿托品的作⽤

在浴槽标本管中加⼊阿品托溶液，2分钟后再加⼊⼄酰胆碱（Ach ），发现⼩肠管张⼒和收缩⼒没有明显的变化，原因是阿托品是⼄酰胆碱阻断剂，使⼄酰胆碱的作⽤消失。故加⼊⼄酰胆碱后没有作⽤。所以两者都加⼊观察到曲线⽆明显变化。2.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作⽤(1)肾上腺素的作⽤

在浴槽中加⼊肾上腺素后，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减⼩以及基线下移。出现上述现象的机理，⽬前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两中受体，α受体⼜分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺素作⽤于α抑制型受体，引起肠肌膜上⼀种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜发⽣超极化，肠肌兴奋性降低，肌张⼒下降。同时，肾上腺素还作⽤于β受体，①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多，cAMP 激活肠肌膜及肌浆⽹上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张⼒降低；②β 受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张⼒的减低。(2)去甲肾上腺素的作⽤

去甲肾上腺素与β2受体结合，造成肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张⼒降低；β 受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张⼒的减低。最终造成肌⾁收缩能⼒减弱。3.观察钙离⼦对肠断收缩的影响

细胞外Ca2+浓度升⾼，Ca2+内流增多，肌⾁收缩能⼒增强。4.观察温度对肠断收缩的影响

我们可以看到⼩肠从38℃转移到17℃(室温)的台⽒液中，⼩肠平滑肌的收缩幅度、基线上移和频率增加，产⽣上述的主要原因是：⼩肠肠管的台⽒液温度以38℃~40℃为宜，低于或⾼于这个温度，都会影响结果。由于⼩肠管平滑肌对温度改变极为敏感，当温度降到30℃以下时，故代谢⽔平的降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变⼩。5.观察酸碱度对肠断收缩的影响

在浴槽中加⼊盐酸溶液后，离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩幅度降低，频率变慢。出现这⼀现象，⽬前认为其原因在于：①细胞外H+升⾼时，Ca2+通道的活性受到抑制，使得Ca2+内流减少。②H+升⾼能⼲扰肌⾁的代谢和肌丝滑⾏的⽣化过程：H+能与Ca2+竞争钙调蛋⽩的结合位点⽽使肌球蛋⽩ATP酶活性降低（近期有理论认为是直接抑制作⽤⽽⾮竞争作⽤）；使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质⽹的释放量减少。在加盐酸使平滑肌收缩减弱的基础上，再加NaOH于浴槽中，则肠管活动出现相反的情况，即肠管活动增强。原因在于NaOH可以中和H+，改变了细胞外液的PH值，PH过⾼、过低，收缩幅度及张⼒都会降低，故⼩肠平滑肌的收缩⼜恢复正常。【实验⼩结】

1、消化道平滑肌具有⾃律性，但其收缩缓慢，节律性不规则。2、消化道平滑肌具有⼀定的紧张性。

3、消化道平滑肌的活动易受温度、PH值及其它化学因素、药物因素的影响。