紫外-可见分光光度法习题(答案与解析)

● 习题精选

一、选择题（其中1~14题为单选，15~24题为多选）

1．符合朗伯特-比耳定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置（ ）

A. 向短波方向移动 B. 向长波方向移动 C. 不移动，且吸光度值降低 D. 不移动，且吸光度值升高

2．双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别在于（ ）

A. 光源的种类及个数 B. 单色器的个数 C. 吸收池的个数 D. 检测器的个数

3．在符合朗伯特-比尔定律的范围内，溶液的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是（ ） A. 增加、增加、增加 B. 减小、不变、减小 C. 减小、增加、减小 D. 增加、不变、减小

4．在紫外可见分光光度法测定中，使用参比溶液的作用是（ ）

A. 调节仪器透光率的零点 B. 吸收入射光中测定所需要的光波 C. 调节入射光的光强度

D. 消除试剂等非测定物质对入射光吸收的影响

5．某分析工作者，在光度法测定前用参比溶液调节仪器时，只调至透光率为95.0%，测得某有色溶液的透光率为35.2%，此时溶液的真正透光率为（ ）

A. 40.2% B. 37.1% C. 35.1% D. 30.2%

6．用分光光度法测定KCl中的微量I—时，可在酸性条件下，加入过量的KMnO4将I—氧化为I2，然后加入淀粉，生成I2-淀粉蓝色物质。测定时参比溶液应选择（ ）

A. 蒸馏水

B. 试剂空白

C. 含KMnO4的试样溶液 D. 不含KMnO4的试样溶液 7．常用作光度计中获得单色光的组件是（ ）

A. 光栅(或棱镜)+反射镜 B. 光栅(或棱镜)+狭缝 C. 光栅(或棱镜)+稳压器 D. 光栅(或棱镜)+准直镜 8．某物质的吸光系数与下列哪个因素有关（ ）

A. 溶液浓度 B. 测定波长 C. 仪器型号 D. 吸收池厚度

1

9．今有A和B两种药物的复方制剂溶液，其吸收曲线相互不重叠，下列有关叙述正确的是（ ）

A. 可不经分离，在A吸收最大的波长和B吸收最大的波长处分别测定A和B B. 可用同一波长的光分别测定A和B

C. A吸收最大的波长处测得的吸光度值包括了B的吸收 D. B吸收最大的波长处测得的吸光度值不包括A的吸收

10．用标准曲线法测定某药物含量时，用参比溶液调节A=0或T=100%，其目的是( )

A. 使测量中c-T成线性关系 B. 使标准曲线通过坐标原点

C. 使测量符合比耳定律，不发生偏离

D. 使所测吸光度A值真正反应的是待测物的A值

11．为提高分光光度法测定的灵敏度可采用（ ）；为提高分光光度法的准确度可采用（为提高分光光度法测定的精密度可采用（ ）；为提高分光光度法测定的选择性可采用（ ）A. 显色反应产物 大的显色剂 B. max作测定波长 C. 选择适当的参比液

D. 控制比色皿厚度及有色溶液浓度

12．分光光度法中，选用max进行比色测定原因是（ ）

A. 与被测溶液的pH有关

B. 可随意选用参比溶液

C. 浓度的微小变化能引起吸光度的较大变化，提高了测定的灵敏度 D. 仪器读数的微小变化不会引起吸光度的较大变化，提高了测定的精密度 13．酸度对显色反应影响很大，这是因为酸度的改变可能影响（ ）

A. 反应产物的稳定性 B. 被显色物的存在状态 C. 反应产物的组成 D. 显色剂的浓度和颜色

2

； ）

14．在比色法中，显色反应应选择的条件有( )

A. 显色时间 B. 入射光波长 C. 显色的温度 D. 显色剂的用量 二、填空题

1．不同浓度的同一物质，其吸光度随浓度增大而__________，但最大吸收波长__________。 2．符合光吸收定律的有色溶液，当溶液浓度增大时，它的最大吸收峰位置__________，摩尔吸光系数__________。

3．为了使分光光度法测定准确，吸光度应控制在0.2~0.8范围内，可采取措施有__________和__________。

4．摩尔吸光系数是吸光物质__________的度量，其值愈__________，表明该显色反应愈__________。

5．一有色溶液，在比色皿厚度为2cm时，测得吸光度为0.340。如果浓度增大1倍时，其吸光度A=___________。

6．各种物质都有特征的吸收曲线和最大吸收波长，这种特性可作为物质 的依据；同种物质的不同浓度溶液，任一波长处的吸光度随物质的浓度的增加而增大，这是物质__________的依据。

7．朗伯特比耳定律表达式中的吸光系数在一定条件下是一个常数，它与__________、__________及__________无关。

8．符合朗伯特比耳定律的Fe2+邻菲罗啉显色体系，当Fe2+浓度c变为3c时，A将__________；T将__________；将__________。

9．光度分析中，偏离朗伯特比耳定律的重要原因是入射光的__________差和吸光物质的__________引起的。

10．在分光光度法中，入射光波一般以选择__________波长为宜，这是因为__________。 11．如果显色剂或其他试剂对测量波长也有一些吸收，应选__________为参比溶液；如试样中其他组分有吸收，但不与显色剂反应，则当显色剂无吸收时，可用__________作参比溶液。

12．在紫外-可见分光光度法中，工作曲线是__________和__________之间的关系曲线。当溶液符合比耳定律时，此关系曲线应为__________。

13．在光度分析中，常因波长范围不同而选用不同材料制作的吸收池。可见分光光度法中选用__________吸收池；紫外分光光度法中选用__________吸收池。

三、计算题

1．安络血的相对摩尔质量为236，将其配成100 mL含安络血 0.4300 mg的溶液，盛于1 cm吸收池中，在λ

max＝55 nm

处测得A值为0.483，试求安络血的ε值。

3

2．称取维生素C 0.0500 g溶于100 mL的5 mol/L硫酸溶液中，准确量取此溶液2.00 mL稀释至100 mL，取此溶液于1 cm吸收池中，在λ素C 的百分质量分数。（k=56L/gcm）

3．精密称取试样0.0500 g，用0.02 mol/L HCl 稀释，配制成250 mL。准确吸取2.00 mL，稀释至100 mL，以0.02 mol/L HCl为空白，在253 nm处用1 cm吸收池测得T＝41.7％，其ε＝12000 L/molcm)，被测组分的分子质量＝100.0，试计算试样中被测组分的百分质量分数（其中，-lg0.417=0.380）。

4．测定血清中的磷酸盐含量时，取血清试样5.00mL于100mL量瓶中，加显色剂显色后，稀释至刻度。吸取该试液25.00mL，测得吸光度为0.582；另取该试液25.00mL，加1.00mL0.0500mg磷酸盐，测得吸光度为0.693。计算每毫升血清中含磷酸盐的质量。

5．称取某药物一定量，用0.1 mol/L的HCl溶解后，转移至100 ml容量瓶中用同样HCl稀释至刻度。吸取该溶液5.00 mL，再稀释至100 mL。取稀释液用2 cm吸收池，在310 nm处进行吸光度测定，欲使吸光度为0.350。问需称样多少克？（已知：该药物在310 nm处摩尔吸收系数=6130 L/molcm，摩尔质量M=327.8）

6．精密称取VB12对照品20.0 mg，加水准确稀释至1000 mL，将此溶液置厚度为1 cm的吸收池中，在λ＝361 nm处测得A＝0.414。另取两个试样，一为VB12的原料药，精密称取20.0 mg，加水准确稀释至1000 mL，同样条件下测得A＝0.390，另一为VB12注射液，精密吸取1.00 mL，稀释至10.00 mL，同样条件下测得A＝0.510。试分别计算VB12原料药的百分质量分数和注射液的浓度。

7．测定废水中的酚，利用加入过量的有色的显色剂形成有色络合物，并在575nm处测量吸光度。若溶液中有色络合物的浓度为1.0×10-5mol/l，游离试剂的浓度为1.0×10-4mol/l测得吸光度为0.657：在同一波长下，仅含1.0×10-4mol/l游离试剂的溶液，其吸光度只有0.018，所有测量都在2.0cm吸收池和以水作空白下进行，计算在575nm时，（1）游离试剂的摩尔吸光系数；（2）有色络合物的摩尔吸光系数。

8．今有A、B两种药物组成的复方制剂溶液。在1 cm吸收池中，分别以295 nm和370 nm的波长进行吸光度测定，测得吸光度分别为0.320和0.430。浓度为0.01 mol/L的A对照品溶液，在1 cm的吸收池中，波长为295 nm和370 nm处，测得吸收度分别为0.08和0.90；同样条件，浓度为0.01 mol/L的B对照品溶液测得吸收度分别为0.67和0.12。计算复方制剂中A和B的浓度（假设复方制剂其他试剂不干扰测定）。

9．A与B两种物质的对照品溶液及样品溶液，用等厚度的吸收池测得吸光度如下表。（1）求被测混合物中A和B含量。（2）求被测混合物在300nm处的吸光度。

4

max＝245 nm

处测得A值为0.498。求样品中维生

波长 238nm 282 nm 300 nm

0.216 0.360 0.278

0.810 0.080 —

A对照 3.0μg/mL 0.112 B对照 5.0μg/mL 1.075 A+B样品

0.442

10．在光度分析中由于单色光不纯，在入射光2中混入杂散光1。1和2组成强度比为吸光化合物在1处的ελ1=5.0103 L/molcm，在2处的ελ2=1.0104 L/molcm。用2 cmI0λ1:I0λ2=1:5，

吸收池进行吸光度测定。（1）若吸光物质浓度为510-6 mol/L，计算其理论吸光度A；（2）若浓度为110-5 mol/L，A又为多少？该吸光物溶液是否服从朗伯特-比耳定律？

5

。

2．B。单波长分光光度计方框图：

双波长分光光度计方框图： 光 源

1%6． 解：由VB12对照品计算λ＝361 nm的百分吸收系数E1cm：

1%E1cm光 源 单 色 器 吸 收 池 检 测 器 显 示 器 单 色 器 1 吸 收 池 单 色 器 1 检 测 器 显 示 器 A0.414207(mL/gcm) cl20.0100110001000VB12原料药的百分质量分数：

0.390(2071)VB12% =El100%100%94.2%

20.0c原料(100010)A注射液VB12的浓度：

cA0.510102.46104(g/mL)=0.246(mg/mL) El20711007．解： （1）由Lambert-Beer定律：Aεcl，当仅含显色剂c游离=1.0×10-4mol/L时，A=0.018 ∴ 游离试剂的摩尔吸光系数：ε游离（2） ∵ A绲=A络合+A游离

A络合=A混-A游离=0.657-0.018=0.639

∴ 有色络合物的摩尔吸光系数：ε络合A8．解：A组分：1=295nm，ε1Ac游离l0.01890(L/molcm)

11042Ac络合l0.6394(L/molcm) 3.201051102A0.088.0(L/molcm) cAl0.0112=370nm, εA2BB组分：1=295nm，ε1A0.9090.0(L/molcm) cAl0.011A0.6767.0(L/molcm) cBl0.011A0.1212.0(L/molcm) cAl0.0116

2=370nm，εB2

ABA1ε1cAlε1cBl 0.3208.0cA67.0cB ABA2ε2cAlε2cBl 0.43090.0cA12.0cB

解方程组得：cA=3.910-3 mol/L，cB=4.310-3mol/L

9．解：（1）由表中数据计算得A与B两组分的吸收系数：

AA组分在238nm：E238A2380.1120.037(mL/gcm) c3.0A282 nm：E282A2820.2160.072(mL/gcm) c3.0A2381.0750.215(mL/gcm) c5.0BB组分在238nm：E238B 282 nm：E282A2820.3600.072(mL/gcm) c5.0根据表中数据列出方程组：

0.037cA+0.125 cB=0.442 (1) 0.072 cA+0.072 cB=0.278 (2)

解得：cA=2.18μg/ml；cB=1.68μg/ml

（2）在300nm处的吸光度：A300=2.18×(0.810/3.0)+1.68×(0.080/5.0)=0.615 10．解：（1）若吸光物质浓度为510-6 mol/L，则：

AlgIλ1Iλ2I0λ1I0λ2I0λ110ε1cl5I0λ110ε2cllgI0λ15I0λ1I0λ110ε1cl5I0λ110ε2cl10ε1cl510ε2cllg lgλ16I06lg1051051036

125101105106210510510110lg0.09262 （2）若吸光物质浓度为110-5 mol/L，则：

AlgIλ1Iλ2I0λ1I0λ2110ε1cl510ε2cllg61

10110510210lg0.1856由计算可知：当吸光物质浓度为510-6 mol/L时，理论吸光度A=0.092；当吸光物质浓度增加1倍，即为110-5 mol/L时，理论吸光度增加1倍，即为A=0.185。故服从朗伯特-比耳定律。

7