沉降菌测试标准操作规程

本方法适用于洁净度为300 000级的控制区和洁净区域的沉降菌检查。 1 检查顺序 1.1 仪器和设备

1.1.1 压力蒸汽灭菌器 YXQ—SG46—280B 1.1.2 电热恒温培养箱 HHBII(300—600)A—OSM 1.1.3 培养皿：90mm×15mm

1.2 培养基的配制：见“常用培养基配制标准操作规程”。 1.3 浇注平板

取盛装培养基的锥形瓶，加热使琼脂溶化，放冷约40℃左右，在超净工作台无菌操作，将融化的琼脂培养基约20ml注入90mm培养皿，盖上平皿盖子，稍冷后，放培养箱培养48h

合格后使用，经培养后的培养皿放在密闭的不锈钢无菌箱内送至取样地点。 1.4 取样（布碟）方法 1.4.1 取样位置：

a 避开风口，在工艺控制点附近。

b 工作区采样点位置离地0.8m-1.5m左右（略高于工作面）。 取样点布置

取样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，某局部区域过于稀疏。

1.4.2 布碟数量：每个房间均作一个对照品碟。 100级间，层流罩：至少放13个平皿。

1000级间，中等大小房间（约15m2）：至少放4个平皿。 万级间或特大房间（20-40m2）：至少放5个平皿。 万级、十万级的缓冲间、更衣室：至少放2个平皿。 1.4.3 计时：从放平皿开始记时，半小时后收碟。

1.5 培养：将取样后的培养皿置恒温培养箱在30～35℃培养48h。

1.6 记录：取出培养皿进行菌落计数，并将检查结果填写在沉降菌监测记录上。

1.6.1 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检查有否遗漏。 1.6.2 若培养皿上有2个或2个以上的菌落，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 1.7 结果计算

1.7.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。 1.7.2 平均菌落数的计算

平均菌落数M= 式中： M — 平均菌落数； M1 —1号培养皿菌落数； M2 —2号培养皿菌落数； Mn —n号培养皿菌落数； n — 培养皿总数。 1.8 结果评定

用平均菌落数判断洁净室（区）室气中的微生物。

1.8.1 洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。

1.8.2 若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均应合格。 洁净度级别10010000100000 标准，个/（Φ90mm0.5h）≤1≤3≤10 2 注意事项

2.1 测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 2.2 采取一切措施防止人为对样本的污染。

2.3 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别。必要时

用显微镜鉴别。

2.4 取样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 2.5 测试状态

2.5.1 沉降菌测试前，被测洁净室的温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。

2.5.2 沉降菌测试前，被测试洁净室已经过消毒。

2.5.3 测试状态分静态和动态两种，测试状态选择必须符合生产的要求并在报告中注明测试状态。 2.6 测试人员

2.6.1 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。 2.6.2 静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 2.7 测试时间

2.7.1 对单流向，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。 2.7.2 对非单流向，如10000级、100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。 记录

1 洁净室沉降菌监控记录 2沉降菌测试检验报告单 记录空白样张附后