磷酸缓冲液及(PH

磷酸缓冲液的（PH6.8）配制

A：磷酸二氢钾： +500ml蒸馏水

B：磷酸氢二钠： +500 ml蒸馏水

C：Giemsa原液

磷酸缓冲液的（PH7.2）配制

A：磷酸二氢钾： +1000ml蒸馏水

B：磷酸氢二钠： +1000 ml蒸馏水

C带制作法

1. 用的NaOH溶液处理半分钟后再处理1分钟，取出放在75﹪、75﹪、95﹪、95﹪的各级酒精中漂洗1-2分钟（脱水），将玻片干燥后置于已经预热650C的6SSC溶液中，放在水浴箱中12-17小时，再用370C预热的蒸馏水漂洗干净，染色。

试剂的配制方法

1. NaOH +蒸馏水1000ml

2. 12SSC溶液

微核率操作步骤

培养72小时标本----收集离心1500/分钟（10分钟）----去上清----加预热的0.1MKCL（37度）----混匀，培养箱5分钟----预固定（1ML） 室温5分钟----离心----去上清，固定（5ML）20分钟----离心，去上清，加适量的固定液、混均----制片。

3ml的蒸馏水+3ml的Giemsa.

McI1vaine’s储藏液、染色液、冲洗液的配置

一． 目的：

McI1vaine’s储藏液是为玻片染色准备。

McI1vaine’s冲洗液是为产前染色体检查准备。

二．料和试剂

1 磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O），分子量是328

2 柠檬酸（C6H8O7

3 去离子超纯水

4 甲醇（CH3OH）

三．操作步骤

McI1vaine’s储藏液：

1．A液：的磷酸氢二钠溶液(+1000ml水)

B液：的柠檬酸溶液(+1000ml水)

2．375ml的A液+125ml的B液

3．用1N的盐酸或1M

4．贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）

McI1vaine’s染色缓冲液

1． 2730ml水+180ml McI1vaine’s储藏液+30ml甲醇

2． 贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）

McI1vaine’s冲洗缓冲液

1． 2820ml水+180mlMcI1vaine’s储藏液

2． 1N的盐酸或1M

3． 贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）

染色液配制：24ml麦氏染色缓冲液+16ml水+14ml磊氏染色储存液（1.6mg/mL）

磊氏染色储存液：0.8g(磊氏染色液Sigma)+500ml(甲醇)，磁力搅拌器搅拌2小时，置于37度的恒温箱72小时。

pH值；Na2HPO4溶液（mL）； NaH2PO4溶液（mL）