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北京索莱宝科技有限公司加入试剂（μL）空白管测定管标准管蒸馏水400--0.125μmol/mL标准--400液样本-400-试剂一200200200试剂二400400400混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却；加入200μL氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液800μL，加入1mL玻璃比色皿，于520nm立即测定吸光度，分别记为A空白管，A测定管，A标准管，计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A空白管。3、组织铁含量计算：（1）按组织鲜重计算:组织铁含量（μg/g鲜重）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷W=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W（2）按组织蛋白浓度计算组织铁含量（μg/mgprot）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷（Cpr×V提取）=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。C标准液：0.125μmol/mLFe标准液；55.845：Fe的相对分子质量，55.845μg/μmol；Cpr：样品蛋白浓度，mg/mL；W：样品质量，g；V提取：提取液体积，1mL。注意事项：1、当ΔA大于1时，建议将样品用提取液稀释后进行测定；ΔA过小时，可增加酶促反应时间（1h或2h）或增加加入的样品体积来测定。2、试剂一溶解变黑后则不能使用；试剂二有毒性，做好防护措施。3+
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