维普资讯 http://www.cqvip.com 时珍国医国药２００８年第１９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００８ ＶＯＬ．１９ ＮＯ．４ 气相色谱法测定苍术中茅术醇含量的方法学研究 付梅红，方婧，王祝举，唐力英 １００７００） （中国中医科学院中药研究所，北京摘要：目的建立苍术药材中特征性成分茅术醇的含量测定方法。方法采用气相色谱法，以十八烷为内标，毛细管柱ＨＰ 一５（交联５％苯基甲基聚硅氧烷为固定相），３０ ｍｍ×０．３２ ｍｍ，２５ ｂＬｍ，柱温１６４ｏＣ，气化和检测温度２１０℃，空气：氢气＝ ２：１，载气氮气，流速１．０ ｍｌ／ｍｉｎ。结果茅术醇在１．００～４．９７ ｇ之间呈良好的线性关系，ｒ＝０．９９９ ８。平均回收率为 １０２．１１％，ＲＳＤ＝２，１８％（ｎ＝６）。结论该法灵敏、准确、重现性好、专属性强，可作为苍术的质量控制方法。 关键词：苍术；茅术醇； 气相色谱 中图分类号：Ｒ２８４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０９９４－０１ Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｉｎｅｓｏｌ ｉｎ ＡｔｒａｃＯ，ｌｏｄｅｓ ｌａｎ— ｃｅａ（Ｔｈｕｎｂ． ＤＣ ｂｙ ＧＣ ＦＵ Ｍｅｉ－ｈｏｎｇ，ＦＡＮＧ Ｊｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｚｈｕ－ｊｕ，ＴＡＮＧ Ｌｉ－ｙｉｎｇ （Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｅｓｅ ｎＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅ ｎｇ １００７００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｑｕａｎｔｉｌａｔｉｖｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｉｎｅｓｏｌ ｉｎ Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ ｌａｎｃｅａ（Ｔｈｕｎｂ．）ＤＣ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＧＣ，ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓａｍｐｌｅ：Ｃ１８Ｈ３８，ｃｏｌｕｍｎ：ＨＰ一５（３０ ｍｍ×０．３２ ｍｍ，２５ ｍ），ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：１４￣６Ｃ，ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｃｈａｍ— ｂｅｒ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｏｒ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：２１０℃，ａｉｒ：Ｈ２＝２：１，ｃａｒｒｉｅｒ ｇａｓ：Ｎ２，ｖｅｌｏｃｉｔｙ ｏｆ ｌｆｏｗ：１．０ ｍｌ／ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｒ ｈｉｎｅｓｏｌ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｏｖｅｒ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １．００～４．９７ ｇ，ｒ＝０．９９９ ８．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ １０２．１１％，ＲＳＤ＝２．１８％（ｎ ６）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｒｅ ｓａｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ ａｎｄ ｅｘｃｌｕｓｉｖｅ．Ｉｔ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ ｌａｎｃｅａ（Ｔｈｕｎｂ．）ＤＣ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ ｌａｎｃｅａ（Ｔｈｕｎｂ．）ＤＣ；Ｈｉｎｅｓｏｌ； ＧＣ 苍术为菊科植物茅苍术Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ ｌａｎｃｅａ（Ｔｈｕｎｂ．）ＤＣ或 ０．２００ ４ｇ，置１００ ｍｌ量瓶中，以甲醇稀释至刻度，制成每毫升含 北苍术Ａｔｒａｃｔｙｌｏｆｆｅｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（ＤＣ．）Ｋｏｄｉｚ．的干燥根茎。其功能 ２．００４ｍｇ的溶液，作为内标溶液。另取茅术醇对照品适量，加入 主治为燥湿健脾，祛风湿，明目。用于治疗脘腹胀满，泄泻，水肿， 内标溶液，分别制成０．９９５，１．９９０，２．９８５，３．９８０，４．９７５ ｍｇ／ｎ￣溶 风湿痹痛，风寒感冒，夜盲。药理研究表明，苍术对胃肠运动有调 液，吸取１ １注入气相色谱仪，以对照品／内标物峰面积为纵坐 节作用，其茅术醇和Ｂ一桉叶醇为该作用的主要成分…。我们首 标（ｙ），对照品进样量（ ｇ）为横坐标，绘制标准曲线，结果表明茅 次采用气相色谱对苍术中特征性成分茅术醇含量测定方法进行 术醇在１．００～４．９７ ｇ之间呈良好的线性关系。回归方程为Ｙ＝ 了研究，结果表明本法灵敏准确、重现性好、专属性强，可有效地 ２３９７８ ７．９３９ ７Ｘ一６２ ０１８．８，ｒ＝０．９９９ ８。控制该药材的质量。 ２．４精密度实验精密吸取同一份对照品溶液，在拟定的色谱条 １仪器与试药 件下，重复进样５次。求得茅术醇与内标峰面积比值相对标准偏 气相色谱仪ＴＲＡＣＥ—ＧＣ，超声波震荡器（功率１５０ Ｗ，频率 差ＲＳＤ＝１．５６％，相对标准偏差＜２％，表明精密度良好。 ２０ ｋＨｚ），茅术醇对照品（自制，纯度为９９．３％），内标物为十八烷 ２．５稳定性实验精密吸取同一份供试品溶液，在拟定的色谱条 （ＭＥＲＣＫ），试剂均为分析纯。 件下，每隔一定时问进样１次，求得茅术醇与内标峰面积比值平 ２方法与结果 均值为２．３７８，ＲＳＤ：１．９４％（ｎ＝５），相对标准偏差＜２％，表明样 ２．１色谱条件毛细管柱ＨＰ一５（３０ ｍｍ×０．３２ ｍｍ，２５ Ｉｘｍ），柱 品在６ ｈ内基本稳定。温１４￣６Ｃ，气化和检测温度２１０￣Ｃ，空气：氢气为２：１，载气为氮 ２．６ 重复性实验取同批样品制备６份供试品溶液，按上述方法 气，流速１．０ ｍ／／ｍｉｎ。 测定，测得茅术醇的含量分别为２．３１０％，２．４１５％，２．４００％， ２．２供试品溶液的制备 ２．２７０％，２．２９０％，２．３５５％，平均值为２．３４０％，ＲＳＤ＝２．５５％，相 ２．２．１校正因子测定取十八烷适量，精密称定，加甲醇制成每 对标准偏差＜５％，表明重复性良好。 毫升含２ ｍｇ的溶液，作为内标溶液。另取茅术醇对照品适量，精 ２．７加样回收率实验取已知含量的样品０．２ ｇ，精密称定６份， 密称定，加含有内标的溶液制成每毫升含３ ｍｇ的溶液，摇匀，吸 分别加入茅术醇及内标物十八烷，余下操作同供试品溶液的制 取１ 注入气相色谱仪，连续进样３次，按公式（《中国药典》 备，经测定结果见表１，平均回收率为１０２．１１％，相对标准偏差为 ＲＳＤ＝２．１８％。 ２００５年版Ｉ部）以平均峰面积计算校正因子。 ２．２．２供试品溶液的制备取样品粉末（过４０目筛）０．４ ｇ，精密 ２．８样品测定取英山陶河乡苍术样品粉末（过４０目筛），同供试 称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇２５ ｍ】，超声处理１０ ｍｉｎ，放 品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件测定，计算。结果见表２。 冷，过滤，滤液浓缩至干。加入内标溶液使溶解，转移至２ ｍｌ量 表１回收率实验结果 瓶中，溶解至刻度，摇匀，吸取１ １注入气相色谱仪，测定，即得。 编 原有量 添加量 测得量 回收率平均回收率 ＲＳＤ ２．３线性关系考察和校正因子测定精密称取内标物十八烷 号 ｍ／ｒａｇ ｍ／ｍｇ ｍ／ｒａｇ （％） （％） （％） ～ １ ２ 收稿日期：２００７－０５—１５；修订日期：２００７－０９－２０ 作者简介：付梅红（１９６３．），女（汉族），北京人，现任中国中医科学院中药 ３ ４ ５ ６ 研究所副研究员，学士学位，主要从事中药化学研究工作． ・９９４・ 维普资讯 http://www.cqvip.com ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００８ ＶＯＬ．１９ ＮＯ．４ 表２样品测定结果 ％ 时珍国医国药２００８年第１９卷第４期 取，考察了加热、冷浸、超声以及超声不同时间对苍术样品中茅术 醇的提取，结果表明甲醇超声提取１０ ｍｉｎ提取完全，故选用此法 为苍术中茅术醇的提取方法。 参考文献： ［１］ 国家药典委员会．中国药典，Ｉ部［Ｓ］．北京：化学工业出版社 ３讨论 考察了石油醚、醋酸乙酯、甲醇不同溶剂对苍术样品进行提 ２００５：１１１． 石莲子的体外抑茵活性研究 周 英 ，段震 ， 李纯纯 ，黄赤夫 （１．贵州大学生命科学学院，贵州贵阳５５００２５； ２．美国肯塔基大学医学中心口腔学院，４０５０３） 摘要：目的通过初步筛选发现石莲子提取具有较好的抑茵活性，探讨石莲子不同溶剂提取物的抑茵作用。方法制备 石莲子不同溶剂提取物，采用打孔琼脂扩散法和稀释法对石莲子不同溶剂提取物进行抑茵实验研究。结果实验数据表 明石莲子的不同溶剂提取物对供试的细菌和部分真菌（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、藤黄微球菌、绿脓杆菌、粪链球菌以 及黄霉菌）均有一定程度的抑制效果，且不同溶剂提取物对各种供试茵的抑茵活性不同。结论石莲子的不同溶剂提取 物对部分细菌和真菌有一定程度的抑制效果，这将为进一步全面开发石莲子提供基础。 关键词：石莲子；押茵； 最小抑茵浓度；抑茵圈 中图分类号：２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８￣８０５（２００８）０４－（）９９５－（）２ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｎｅｌｕｍｂｏ ｎｕｃｉｆｅｒａ Ｇａｅｒｔｎ ＺＨＯＵ Ｙｉｎｇ ，ＤＵＡＮ Ｚｈｅｎ ，ＬＩ Ｃｈｕｎ—ｃｈｕｎ ，ＨＵＡＮＧ ｃｈｉ—ｆｕ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ， ５５００２５，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＤｅｎｔｉｓｔｒｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＫｅｎｔｕｃｋｙ，Ｌｅｘｉｄｇｔｏｎ，Ｋｅｎｔｃｕｋｙ ４０５０３， Ｓ．Ａ．） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊ＆ｔｉｖｅ Ｔｈｉｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎｔｅｎｄｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ￣ｌｕｍｂｏ ｎｕ￣ｉｆｅｒａ Ｇａｅｒｔｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｖａｒｉｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｆｒｏｍ Ｎｅｌｕｍｂｏ ｎｕ￣ｉｆｅｒａ Ｇａｅｒｔｎ，ａｎｄ ｔｈｅ ｔｈｅ ｍｉｎｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ （ＭＩＣ）ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｉｒｃｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｈｔｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉｌａ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘ－ ｔｒａｃｔｓ ｗａｓ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｏｗａｒｄ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｍｉｃｒｏｂｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｌａ ｄａｔｅ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈａｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｎｅｌｕｍｂｏ ｎｕｄｆｅｒａ Ｇａｅｒｔｎ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉｌａ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｔｈｉｓ ｒｅｓｅｒａｃｈ ｉｓ ｂｅｎｅｉｆｔ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ａｎｄ ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｎｅｌｕｍｂｏ ｎｕｄｆｅｒａ Ｇａｅｒｔｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｎｅｌｕｍｂｏ ｎｕ￣ ｒⅡＧａｅｒｔｎ； Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ； ＭＩＣ； Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｉｒｃｌｅ 石莲子又称为甜石莲、莲实、壳莲子、带皮莲子，来源于睡莲 ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ；大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ；粪链球菌Ｅｎｔｅｒｏ— 科植物莲Ｎｅｌｕｍｂｏ ｎｕｄｆｅｒａ Ｇａｅｔｒｎ的成熟果实，英文名为ＮＥＬＵＭ— ＣＯＣＣｌ／￣ｆａｅｃａｌｉｓ；黄霉菌ＡｓｐｅｒｇｉＵｕｓ ｆｌａｖｓｕ；绿脓杆菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ＢＩＮＩＳ ＬＢ ｌ Ｊ。本品为椭圆形，两端略尖，长１．８ ａｍ左右，直径约 ｒＨ 加ｓ０；藤黄微球菌Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓ ｏ １．２ ａｍ。外壳灰黑色，表面平滑，一端有小圆凹点，另一端有微小 １．１．４培养基ＭＲＳ固体培养基：酪蛋白胨１０ ｇ，牛肉提取物１０ 短柄，壳厚约１ ｍｍ内含莲子１枚。质坚硬，不易破裂 。石莲 ｇ，酵母提取物５ ｇ，葡萄糖５ ｇ，乙酸钠５ ｇ，柠檬酸二铵２．０ ｇ， 子具有补益脾胃、祛热毒、清心除烦的功效，可用于缓解和治疗冷 Ｔｗｅｅｎ８０ １．０ ｇ，磷酸氢二钾２．０ ｇ，ＭｎＳＯ４・Ｈ２Ｏ ０．２ ｇ，ＭｇＳＯ４・ 热呕吐、食物不下、淋浊等症状 Ｊ。据报道，从石莲子中提取的 ７Ｈ２Ｏ ０．０５ ｇ，ＣａＣＯ３ ２０．０ｇ，琼脂１５ ｇ，定容至１ ０００ ｍｌ，ｐＨ值调 莲心碱具有降压、抗心率失常等作用 ，而石莲子在抑菌方面的 至６．８；营养肉汤固体培养基：蛋白胨１０ ｇ，牛肉膏３ ｇ，氯化钠５ 研究却未见报道。本研究在初步筛选中发现石莲子具有较好的 ｇ，琼脂１５ ｇ，定容至１ ０００ ｍｌ，ｐＨ值调至７．０；查氏固体培养基： 抑菌活性，为充分发掘石莲子的市场潜力，开发其可利用性，本文 硝酸钠３ ｇ，磷酸氢二钾１．０ ｇ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ Ｏ ０．０５ ｇ，蔗糖３０ ｇ， 对石莲子不同溶剂浸提得到的各提取物对常见致病革兰氏阳性 琼脂１５ ｇ，液体培养基组成除了不加琼脂外，与相应的固体培养 菌、革兰氏阴性菌及黄霉菌的体外抑菌活性进行了研究，为阐明 基相同。 其抗菌特性以及进一步开发这一新资源提供参考。 １．１．５仪器高低温恒温培养箱（上海一恒科技有限公司），旋 １器材与方法 转蒸发仪（ＢＵＣＨＩ Ｒ一２００），ＳＨＺ—Ｄ（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义 １．１材料与仪器 市予华仪器有限公司），电子天平（ＯＨＡＵＳ）净化工作台（上海市 １．１．１材料石莲子购于贵州省药材公司，产地：广西，包装批 纯昱科学仪器有限公司），真空冷冻干燥机（ＬＡＢＣＯＮＣＯ），超低 号０６０７０２。 温冰箱（Ｆｏｒｍａ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ），双光束紫外可见分光光度计（北京普 １．１．２试剂石油醚，醋酸乙酯，甲醇，乙醇，９５％乙醇，二甲基甲 析通用仪器有限公司ＴＵ一１９０１）。 酰胺，均为分析纯，购于贵阳中兴化学试剂公司。 １．２ 方法 １．１．３菌种购自中国微生物菌种保藏中心，金黄色葡萄球菌 １．２．１ 石莲子不同溶剂提取物的制备将干燥的石莲子粉碎过 ４０目筛，称取等量的石莲子３份，每份１５０ ｇ，分别置于１ ０００ ｍｌ 收稿日期：２００７－０６－０５；修订日期：２ｏ０７－１０－２７ 的水、酒精、醋酸乙酯中。每种溶剂浸泡３次，每次置于恒温 作者简介：周英（１９７１－），女（汉族），贵州贵阳人，现任贵州大学副教授 （３７℃）摇床上（２００ ｒ／ｍｉｎ）振荡１２ ｈ，抽滤得到提取液。水的提 博士学位，主要从事天然药物化学的研究工作． 取液于一８０℃冷冻过夜后用真空冷冻干燥机干燥；酒精提取液 ・９９５・