2011-4-25 10:57
原代培养，不分裂，或者生长缓慢的细胞，一般用慢病毒 生长迅速的细胞系可用腺病毒（表达比较快) 追问
我的细胞是小鼠心肌细胞株，非原代，3天左右传一次带，应该怎么选择呢？ 回答 慢病毒比较好 追问
可是有些资料说基因的过表达优选腺病毒，而慢病毒则优选于RNAi和过表达microRNA，怎么理解啊？ 回答
我2个都用过。腺病毒制作比较方便，安全性高。目标基因报道快（数小时）。但是生长慢的细胞效果不理想。
慢病毒主要的优点就是可以稳定整合到基因组，可以长时间表达（所以RNAi都用），但是要好几天才行。 追问
恩，非常感谢您的帮助！那我还想知道，因为我要做过表达的话肯定要表达丰度高的好啊，那个如果用慢病毒的话怎么能够保证它的表达丰度呢，而且慢病毒不能扩增，如果在传代过程中目的基因的表达衰减了怎么办呢？另外我想知道的就是有没有什么办法可以缩短细胞的传代周期呢？谢谢！QQQ~~~ 回答
你正好弄反了，慢病毒整合到基因组后。可以随细胞分裂而扩增。腺病毒由于人工去掉了扩增区，所以无法扩增。随细胞分裂而被稀释。 表达丰度取决于promoter。
建议不要尝试缩短细胞的传代周期，这样得出的结果就不适用于原来的细胞系了
真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体，在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。
腺病毒载体携带外源基因较大，可瞬时高表达。
慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。
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