华中科技大学02-17生化与分子考研真题及答案

华中科技大学

2002年硕士研究生入学考试试题

一、选择题

1.膜蛋白的功能不包括（D）

A.作为信号受体 B.作为离子通道 C.作为酶 D.储藏能量 2.蛋白聚糖中的糖包括（C）

A.肽聚糖 B.几丁质 C.透明质酸 D.葡聚糖

3.蛋白质中提供糖基化位点的侧链来自下列哪一种氨基酸残基（C） \"

A.甘氨酸 B.天冬氨酸 C.丝氨酸 D.色氨酸 4.鞘氨醇不是下列什么物质的组成成分（B） A.神经酰胺 B.磷脂酰乙醇胺 C.神经节苷脂

5.在pH7 条件下电泳， 下列什么物质会向阴极移动（B） A.糖胺聚糖 B.磷脂酰胆碱 C.多聚谷氨酸 D.多聚腺苷酸 6.动植物来源的脂肪酸多是（D）

A.奇数脂肪酸 之间 C.反式脂肪酸 D.偶数脂肪酸 7.下列哪一种试剂可以用于标记蛋白质的N端（B） ~

A.甲醛 B.丹磺酰氯 C.二异苯基磷酸P385 P368

8.属于同一蛋白质家族成员， 其氨基酸序列中的哪些氨基酸出现差异可能性最小（A） A.形成功能部位（活性部位）的氨基酸 B.和底物专一性或配基专一性有关的氨基酸 C.与种属来源有关的氨基酸

9.认为肽键是平面结构的重要依据是（D） A.肽键的键长，等于碳碳双键之长 B.肽键的键长，等于碳氮双键之长 {

C.肽键的键长，介于碳碳双键和碳碳单键之间 D.肽键的键长，介于碳氮双键和碳氮单键之间 10.不属于还原糖的糖有（A）

A.蔗糖 B.麦芽糖 C.葡萄糖 D.乳糖

11.提取细菌膜蛋白时使用去污剂（表面活性剂）的作用是（B） A.破坏二硫键 B.破坏疏水作用，使非极性基团暴露于水中 C.破坏离子键 D.去掉细胞壁

12.以下结合蛋白质多肽链与非肽链部分不以共价键相连的是（A） ~

A.脂蛋白 B.胶原蛋白，一种糖蛋白 C.琥珀酸脱氢酶，一种含有FAD的黄素蛋白 13.蛋白质不具有下述哪种功能（F）

A.提供能量 B.运输 C.防御 D.加速化学反应 E.调节 F.储存遗传信息 14.下列哪种肽段易于形成α -螺旋（C）

A.多聚甘氨酸 B.多聚脯氨酸 C.多聚（丙氨酸-缬氨酸）

15.如果胰蛋白酶不能消化某种蛋白质，说明该蛋白质在组成上不含（C）

A.甘氨酸 B.缬氨酸 C.精氨酸 D.苯丙氨酸 16.β转角中肽链主链出现（C）度回折 -

17.判断 2,3-二磷酸甘油酸是血红蛋白别构调节物的证据可能是该物质（A） A.使血红蛋白的氧合曲线更加 S 型 B.使血红蛋白的氧合曲线变成双曲线型 C.自身与血红蛋白结合曲线为 S 型 ++

/NADH+H辅酶在反应中转移的电子应表示成（C）

19.阳光维生素的意思是阳光的能量使动物的某种维生素原变为维生素，这种维生素原是（B） ]

A.β -胡萝卜素 脱氢胆固醇 C.视紫红质 D.色氨酸 抑制胰凝乳蛋白酶的根本原因是（C） 类似酶的底物

与酶的丝氨酸残基反应，使该丝氨酸不能作为广义酸碱催化剂 与酶的组氨酸残基反应，使该组氨酸不能作为广义酸碱催化剂 改变了酶的一级结构

21.作为典型催化剂的酶具有下列哪一种能量效应（B）

A.增加活化能 B.降低活化能 C.提高产物能量水平 D.降低反应物能量水平 《

22.修饰碱基主要存在于下列哪种核酸中（C） D.核DNA E.线粒体DNA

23.在溴化乙锭-氯化铯密度梯度离心时，相同分子量的 DNA，沉降最快的是（A） A.闭环DNA B.开环DNA C.双链线形DNA 的Tm不与什么有关（A）

的分子量 的GC含量 的纯度 D.缓冲液组成 作用肾上腺时，导致的细胞响应包括（D） A.受体获得酪氨酸激酶活性 ？

B.受体激活引起细胞膜钾离子通道改变 蛋白激活，抑制腺苷酸环化酶 与钙离子浓度升高

26.生物膜中最丰富的脂类是（A）

A.磷脂 B.胆固醇 C.糖脂 D.三酰甘油 是（B）

A.蛋白质 B.核酸 C.糖 D.脂

28.胰岛素与受体结合后，受体细胞质区域（D） ,

A.具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性 B.结合G蛋白 C.激活磷脂酶 D.具有酪氨酸激酶活性 29.被丝氨酸蛋白激酶作用的蛋白质将（B） A.去掉磷酸丝氨酸上的磷酸基团

B.从 ATP 获得一个磷酸基团，使丝氨酸磷酸化 C.从 GTP 获得一个磷酸基团，使丝氨酸磷酸化

D.水解ATP而获得磷酸基团

30.性内切酶EcoRⅠ作用对象是（D） A.蛋白质 C.单链DNA D.双链DNA

|

二、分析题

1、某同学在提取酶的过程中发现酶已经失活，一个原因是由于操作不当引起酶的变性，请问有哪些因素会引起变性还有什么因素可能引起失活如果认为酶的失活不是由于变性引起的，请提出一种推测，并设计一个实验路线予以证明。 答：

①引起变性的因素有：强酸、强碱、重金属盐、尿素、胍、去污剂、高温射线、超声波等。 ②抑制剂也可能引起失活。

③蛋白质变性是蛋白质在某些物理或化学因素的作用下其特定空间构象被改变，从而导致其理化性质和生物学活性丧失甚至完全丧失。

实验方法：先除可逆抑制（透析、超滤、凝胶过滤等方法），如果酶仍失活，可用以下方法：变性的蛋白更容易受蛋白水解酶的作用，可以将正常的酶和失活的酶被同一种蛋白酶水解，将水解的片段分别经过凝胶电泳，看谁的片段多，谁就是变性。如果两者差不多,那就是酶受到抑制作用。 -

2、根据所学的知识分析有机磷农药、溴化乙锭、麻黄碱和白喉毒素对人体有毒性的原因。 答：

有机磷农药是强有力的丝氨酸蛋白酶抑制剂。

溴化乙锭可以插入DNA中，改变DNA的结构，是强有力的模板抑制剂。 麻黄碱可使中枢神经系统兴奋，神经系统过敏。

白喉素可导致生物神经脱髓鞘，具有抑制蛋白质合成的作用，还可引起心肌脂肪变性。

三、综合题

）

1、通过代谢网络说明处在给定的情况下的酶的改变及其产物在细胞能量代谢中最可能的变化途径。

（1）肝己糖激酶，当血糖升高时；

（2）大豆谷氨酸脱氢酶，当种子吸胀发芽时。 答：

A：当血糖升高时。己糖激酶受6-磷酸葡萄糖的别构抑制，所以其含量减少。 B：种子吸胀发芽过程中需要能量，大豆谷氨酸脱氢酶作用于氨基酸脱氨基作用，释放能量，所以谷氨酸脱氢酶含量增加。

2、大肠杆菌各有什么分子机制应付氨基酸缺乏或紫外线照射 答： #

可通过SOS反应和直接修复作用。

SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施，包括诱导DNA损伤修复，诱变效应，细胞的抑制以及融源性细菌释放噬菌体等。在氨基酸缺乏时，细菌通过严紧反应来抵御不良条件，保存自己，严紧反应导致两种被称为魔斑的特殊核苷酸：鸟苷四磷酸和五磷酸的积累，鸟苷磷酸的作用是影响RNA聚合酶

与启动子结合的专一性，从而为细胞内严紧控制的关键。可在大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成等应急反应，活化蛋白水解酶等，以调节或开发能源，渡过难关。

紫外线照射可形成环丁烷胸腺嘧啶二体及6-4光化合物，直接修复能够将形成的这两种物质还原为单体。

2003年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

double helix

DNA双螺旋结构：一种核酸的构象。在该构象中，两条反向平行的多核苷酸链相互缠绕形成一个右手的双螺旋结构。 messenger ;

第二信使：受细胞外信号的作用，在胞质溶胶内形成或想胞质溶胶释放的细胞内小分子。通过作用于靶酶或胞内受体，将信号传递到级联反应下游，如环腺苷酸、环鸟甘酸、钙离子、肌醇三磷酸和肌醇磷脂等。 site

活性中心：一般情况下，多相催化剂只有局部位置才产生活性，称作活性中心，现多称为活性部位。活性中心可以是原子、原子团、离子、表面缺陷等，形式多种多样。

ATP合酶：结合于线粒体内膜、叶绿体类囊体膜和细菌质膜上由多亚基组成的复合物。在氧化磷酸化和光合磷酸化过程可催化ATP的合成。

糖原合成：体内由葡萄糖合成糖原的过程称为糖原合成过程。主要合成场所为肝和肌肉。包括UDPG途径和三碳途径。 -

启动子：基因转录起始所必须的一段DNA序列。是基因表达的上游顺式作用元件之一。 code

遗传密码：核苷酸序列所携带的遗传信息。编码20种氨基酸和多肽链起始及终止的一套个三联核苷酸密码子。

二、选择题

1.透明质酸的酸性源自分子中的哪一种基团（A）

是哪一种糖的英文缩写符号（B） 《

A.果糖 B.岩藻糖 C.甘露糖 D.木糖 3.乳糜微粒中不含有（A）

A.神经节苷脂 B.胆固醇 C.三酰甘油 D.蛋白质 4.欲提取红细胞膜脂类，可选用下列何种试剂（D） A.磷酸盐缓冲溶液 B.乙醇 C.乙醚 D.氯仿-甲醇

5.在蛋白质酸水解物中分离到一种与茚三酮反应生成黄色产物的物质，该物质是（C） A.组氨酸 B.赖氨酸 C.脯氨酸 D.天冬氨酸 6.蛋白质中与CNBr作用的基团是（B） ~

7.什么蛋白质富含脯氨酸（C）

A.丝心蛋白 B.胰岛素 C.胶原蛋白 D.酪蛋白

8.血红蛋白氧解离曲线向右移是由于（D）

A.降低氧气的压力 B.增加氧气的压力 C.增加pH值 D.增加CO2的压力 Avery. Colin MacLcod, and Maclyn McCarty 做出的重大发现是（B） A.发现核酸 引起致病性转移 C.发现DNA双螺旋结构 D.碱基配对 对称属于（B） &

A.点群对称 B.二面体对称 C.螺旋对称

11.以下关于蛋白质分子内氢键的描述何者是错误的（C）

A.是一种局部电荷间的相互作用 B.稳定蛋白质的二级结构 C.只发生在蛋白质与水发生相互作用时 D.形成过程具有协同性 12.拉氏构像图（Ramachandran Plot）中揭示的事实不包括（D）

A.使肽键稳定的ψ和φ只占很少百分比 B.右手螺旋和左手螺旋都有稳定的 C.β -折叠是稳定的 D.胶原三股螺旋处在不稳定区 13.使酶分子带上亲和标记的过程是（D） 、

A.化学反应 B.表面吸附 C.可逆过程 D.非竞争性的 14.核酶（Ribozymes）是一种（D） A.蛋白质 D.核蛋白体

15.细胞乙酰CoA的来源不包括（D）

A.丙酮酸氧化 B.脂肪酸β氧化 C.氨基酸氧化 D.葡萄糖酵解 16.所有生物中能集合并清除氨基的氨基酸不包括（B） A.谷氨酸 B.甘氨酸 C.天冬氨酸 D.谷氨酰胺 17.直接判断细菌DNA正在复制的根据是（B） 】

A.看到复制原点 B.看到复制叉 C.看到多核糖体 D.看到DNA聚合酶 18.大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅰ的功能不包括（D） ´→3´外切酶活性 ´→5´外切酶活性 ´→3´DNA聚合酶活性 ´→5´DNA聚合酶活性 光解酶（DNA Photolyase）作用于（B）

A.甲基胞嘧啶 B.胸腺嘧啶二聚体 氧鸟嘌呤 D.一段损伤区 20.下列哪个反应需要鸟苷三磷酸（GTP）（C）

A.核糖体上肽键的合成 B.核糖体上肽的释放 【

C.氨基酸被氨基酰-tRNA合成酶的激活 D.多核糖体的形成 21.下列哪个位点最可能含有高度重复序列（A） A.着丝粒 B.蛋白质基因 C.启动子 D.增强子 的帽子结构在翻译中的功能是（D）

A.供tRNA识别 B.延长mRNA使用寿命 C.帮助mRNA在核糖体上定位 D.供起始因子识别 23.细菌饥饿时培养基中积累（A）

’,5’-tetraphosphate(ppGpp) C.磷酸 ；

24.一分子丙醋酸彻底氧化为CO2和H2O净产生的ATP分子数为（C）

25.细胞催化苹果酸转变为草酰乙酸的酶是（C） A.苹果酸酶 B.水化酶 C.苹果酸脱氢酶

磷酸葡萄糖脱氢酶催化反应的产物不含有（C）

27.能够从外周血中摄取胆固醇并送回肝脏中因而能降低血清胆固醇的脂蛋白是（B） A.乳糜微粒 *

28.参与血液凝固的维生素是（C）

A.维生素B B.维生素C C.维生素K D.维生素A

（代谢活化剂蛋白）与cAMP结合后的效应不包括（C）

A.与乳糖操纵子亲和力增加 B.自身构象改变 C.与σ亚基结合 D.促进转录 30.下面哪种氨基酸参与了嘌呤核苷酸的从头合成（D） A.丙氨酸 B.苏氨酸 C.精氨酸 D.天冬氨酸

三、判断正误

'

（对）1.结构域（domain）是三级结构中局部折叠的比较紧密的部分。 （错）2.球蛋白是指具有球型形状的蛋白质。

（对）3.别构活化中酶的构象应从T-R平衡转向R态。 （对）4.理论上二面角φ和ψ在正负180度范围。

（对）5.胰凝乳蛋白酶催化肽键断裂过程中该肽键C端部分与酶共价连接形成酰化酶中间体。

（错）6.能障或自由能障指底物的始态与终态之间的自由能差。

（对）7.肝中的糖原磷酸化酶可以催化肝糖原产生G-1-P，进入糖酵解。 （对）8.一基因与其等位基因（allete）的序列相同。 |

（对）9.定点诱变（Site-DirectedMutagenesis）是一种生物体突变发生机制。 （错）10.下游指RNA的3´方向。

（对）11.环己亚胺是一种很好的翻译抑制剂。

（对）12.人工染色体应含有复制原点、端粒和着丝粒三个基本结构组分。 （错）13.真核RNA聚合酶Ⅱ和原核RNA聚合酶都可以启动基因转录。 （对）14.无义突变是指终止密码的突变。 （错）15.信号肽是N端有碱性氨基酸的肽。

?

四、问答题

1、在分子生物学中有哪些可转移的遗传因子被使用，它们的应用范围如何择一例说明其如何转移外源基因，并使其复制和转录。 答：

①有转座子、质粒、噬菌体、COS质粒。 ②

质粒：一般只能携带10kb以下的DNA片段，构建原核生物基因库，cDNA文库。 噬菌体DNA：适用于构建真核生物的基因组合cDNA文库。

COS质粒：容量大，可携带45kb外源DNA片段，常用构建高等生物基因组文库。 |

③质粒DNA能够将外源基因与自身基因组连接，然后转化宿主细胞的基因组并随宿主的复制而复制。

2、比较真核基因组的三类结构基因（rRNA基因、tRNA基因和蛋白质基因）的基因组织特点，并分析该特点在功能上和进化上的意义。

答：细胞的整个基因组中只有很少一部分（2%-3%）的DNA序列用以编码蛋白质。具有大量串联重复序列。

2004年硕士研究生入学考试试题

一、选择题

是（D）的英文缩写符号

A.果糖 B.棕榈酸 C.唾液酸 D.盐藻糖 2.以下（C）不属于葡聚糖 】

A.淀粉 B.几丁质 C.木质素 D.纤维素 3.神经节苷脂中不含有（C）

A.糖 B.脂肪酸 C.甘油 D.氨基醇

4.以下氨基酸或氨基酸衍生物中（D）不含有S元素 B.牛磺酸 C.辅酶A D.肌酸

5.下列酶中（D）对于N端具有芳香烃侧链的肽键具有最强的专一性 A.胰凝乳蛋白酶 B.羧肽酶 C.胰蛋白酶 D.胃蛋白酶

6.下列名词中（C）可以描述在肽链或多核苷酸链中出现一种随机的弯曲。 ,

7.下列维生素中的（A）的辅酶形式能在代谢反应中转移H A.烟酸 B.泛酸 C.抗坏血酸 D.叶酸 8.共价闭环式超螺旋的构象改变需要（A）

A.至少有一个磷酸二酯键断裂 B.磷酸二酯键的两侧都断开 C.组蛋白结合到DNA上 D.盐物质质量浓度超过L 9.细胞从头合成嘌呤核苷酸的原料不包括（C） A.甘氨酸 B.天冬氨酸 C.谷氨酸 }

10.胆固醇生物合成不经历（A）反应

A.乙酰CoA→丙二酸单酰CoA B.甲瓦龙酸→活性异戊二烯单位

C.鲨烯→羊毛固醇 D.乙酰 CoA→3-羟-3-甲-戊二酰 CoA（HMG） 11.乳糖操纵子的体内功能性诱导物是（D） A.乳糖 B.半乳糖 C.葡萄糖 D.异构乳糖

12.利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到一个地方的遗传元件叫（B）

A.启动子 B.转座子 D.顺反子 13.（B）的密码子可作为起始密码子 &

A.酪氨酸 B.甲硫氨酸 C.色氨酸 D.苏氨酸 14.下列（A）不是顺式作用元件

转录因子 B.增强子 框 D.启动子核心序列 杂交用于分析（C） C.蛋白质 都是

16.由于DNA是由4种碱基组成的，所以任何性核酸内切酶的切割频率的理论值应该是（C）

17.以DNA为模板，RNA聚合酶作用时，不需要（B） '

/Mn

18.原核DNA合成酶中（C）的主要功能是合成先导链及冈崎片段。 聚合酶Ⅰ 聚合酶Ⅱ 聚合酶Ⅲ D.引物酶 19.（B）决定tRNA上所携带的氨基酸种类。

A.副密码子 B.反密码子 C.密码子 D.同义密码子

20.细胞蛋白激酶根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基种类可分为3类，不包括（D）。 A.组氨酸型 B.酪氨酸型 C.丝氨酸/苏氨酸型 D.天冬氨酸

~

+2+

二、判断正误

（错）1.糖胺聚糖由于含有氨基而呈碱性。

（对）2.短肽的旋光性等于其组成氨基酸的旋光性之和。

（错）3.蛋白质的序列信息对于使用X-衍射技术与NMR技术测定蛋白质构象而言是不需要的。

（错）4.可以被有机汞失活的酶其活性部位含有Ser残基。

（错）5.其嘧啶碱基含量较高的DNA的Tm高于嘌呤碱基含量较高的DNA。 （错）6.质膜的两层的蛋白质和糖是不对称的，但是脂类是对称的。 （对）7.肾上腺素的第二信使是cAMP。 -

（错）,4-二硝基酚可以引起线粒体P/O比减少。

（错）9.百米赛跑的运动员的肌肉能量来自葡萄糖的完全氧化。 （错）10.肉碱分子可以携带脂肪酸进出线粒体。

（错）11.在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看做是一个复性（退火）反应。

（错）型双螺旋DNA是左手螺旋，而Z型是局部的右手螺旋。

（对）13.原核生物基因表达的主要发生在转录水平，真核生物基因表达可以发生在各个水平，但主要也是在转录水平。 （错）体系是果蝇中的转座子。

（错）15.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。 、

（错）的神经毒作用主要是破坏DNA。

（错）17.烟草花叶病毒是单链多组分RNA病毒。 （错）18.所有高等真核生物的启动子中都有GC区。

（错）19.叶绿体的rRNA核糖体是由16S、5S、23S、组成的。

（ ）20.抗体的基本结构是两条重链与两条轻链通过3个二硫键相互连接成的Y型结构。

三、名词解释

1.别构效应 & 别构效应剂 —

某种不直接涉及蛋白质活性的物质，结合于蛋白质活性部位的其他部位（别构部位），引起蛋白质分子构象的变化，而导致蛋白质活性改变的现象。可分为同促效应和异促效应两类。能影响蛋白质活性的物质称为别构效应剂。 2.丝氨酸蛋白酶类

一个蛋白酶家族，它们的作用是断裂大分子蛋白质中的肽键，使之成为小分子蛋白质。其激

活是通过活性中心一组氨基酸残基变化实现的，它们之中一定有一个是丝氨酸。 3.亲和层析

将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中，这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。 4.修饰碱基

tRNA中的一些不常见的碱基，如腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶的修饰形式。 5.必需氨基酸 /

指存在食物中，动物无法合成只能从食物中摄取的氨基酸，这些氨基酸被称为必须氨基酸。动物需摄取必须氨基酸以制造蛋白质。由于不同物种的化合能力不同，对于某一物种是必须氨基酸的，对另一物种则不一定是必须氨基酸。 6.启动子

一段能使基因进行转录的DNA序列。启动子可以被RNA聚合酶辨认，并开始转录。在RNA合成中，启动子可以和决定转录开始的转录因子产成相互作用，继而控制细胞开始生产哪一种蛋白质。 7.冈崎片段

DNA复制过程中，一段属于不连续合成的延长链，且长度相对较短的DNA片段。冈崎片段之所以存在，是因为DNA聚合酶无法以3´往5´的方向合成DNA，因此产生了许多以5´到3´方向合成的冈崎片段，再由DNA连接酶将其粘合。 8.分子伴侣

一类协助细胞内分子组装和协助蛋白质折叠的蛋白质。如HSP。 9.无义突变 ；

编码某一氨基酸的三联体密码经碱基替换后，变成不编码任何氨基酸的终止密码子UAA、UAG或UGA。虽然无义突变并不引起氨基酸编码的错误，但由于终止密码出现在一条mRNA的中间部位，使翻译的多肽链就此终止，形成一条不完整的多肽链。 10.增强子

指增加与其连锁的基因转录频率的DNA序列。增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基因的5´端，也可以位于基因的3´端，有的还可位于基因的内含子中。增强子的效应很明显，增强子的作用同增强子的取向无关，甚至远离靶基因达几千kb也仍然有增强作用。

四、计算题

1、已知天冬氨酸的α-COOH、α-NH3和R基团的pKa分别为，和。如何用pH为，L的天冬氨酸溶液和NaOH配置，L的天冬氨酸-NaOH缓冲液

-4

2、假设浓度为2×10mol/L的某抑制剂抑制了一个酶催化反应的75%，计算这个非竞争性抑制剂的Ki。

把数据代入非竞争性抑制剂的速度计算公式进行计算，看是否正确即可。 '

3、大肠杆菌染色体的分子量大约是×10Da，核苷酸的平均分子量是330Da。邻近核苷酸对之间的距离是，双螺旋每一转的高度（即螺距）是， （1）该分子有多长； （2）该DNA有多少转。

9+

答：

⑴碱基对数=×109Da/（330Da×2），分子长度=碱基对数× ⑵转数=分子长度/

4、现分离了一DNA片段，可能含有编码多肽的基因的前几个密码子。该片段的序列组成如下：

5´CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG3´ &

3´GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC5´

（1）哪一条链作为转录的模板链（2）写出mRNA序列。 答：模板链：3´→5´链

五、问答题

1、运用所学的生物化学知识简要解释下列生物学现象。 （1）阴雨连绵不但延迟果实成熟且结的果实不甜；

（2）植物细胞浸入蔗糖溶液中一段时间后，发现蔗糖溶液pH升高（胞外碱化）。 ，

答：

（1）果实的甜与否主要与其积累的糖分有关，连着阴天时，由于光照不足，导致光合作用减弱，合成的糖类减少，积累也减少，故味不甜；此外，糖积累少了，糖代谢不顺畅，色素转变存在问题，乙烯合成受阻，促成熟减慢。

（2）从葡萄糖的运输和质子泵的关系入手，转运等

2、解释弱相互作用（次级键）并举例论述其在稳定大分子构象中的作用。 3、PCR和细胞内DNA复制两者有哪些主要的相同点和不同点各举出3个。 答： 同：

两者都符合半保留复制模型，即两条链都可作为模板，子代链中一条链来自于亲代链，另一条链是新合成的；两者都需要引物；两者都依赖DNA的DNA聚合酶；两者的底物都是dNTP；DNA合成时都是在DNA聚合酶作用下按碱基配对原则往3´-OH上加dNTP，形成3´，5´磷酸二酯键；两者新合成链延伸方向都是5´→3´；两者DNA合成的保真度（精确性）都较高。 ~

异：

复制为半不连续复制，而PCR两条链的合成都是连续的；复制时引物是由引发酶或引发体合成的，而PCR引物是在反应前加到反应体系中；复制需要在特定的复制原点开始，并且有终止点，而PCR在有特异引物存在时在任何序列都可起始，并且没有终止点；复制时两条模板链是在解旋酶的作用下局部打开双链，而PCR两条模板链通过变性完全打开双链；复制时两条链的合成时同步进行的，而PCR两条链的合成可能不同步；PCR的DNA聚合酶是耐热的DNA聚合酶，而复制的聚合酶一般不耐热；复制一般为双向复制，而PCR反应中DNA合成时单向的；复制时由多种蛋白因子参与，而PCR只有DNA聚合酶参与。 4、简述原核生物与真核生物在基因结构及其基因表达上的异同点。

2005年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

1.多顺反子mRNA

一个mRNA包含多个蛋白质的编码信息，即包含多个开放可读框（ORF），这种mRNA称为多顺反子mRNA。这些蛋白质通常具有同一种相关的功能，并且成组的被一个操纵子所，原核生物mRNA通常是这种情况。 2. attenuator ?

弱化子：是在研究大肠杆菌的色氨酸操纵子表达弱化现象中发现的。在Trp mRNA 5´端trp正基因的起始密码前与一个长162bp的DNA序列称为前导区，其中第123~150位核苷酸如果缺失，trp基因的表达可提高6倍。或者，在色氨酸操纵子中的一个区域，此区域以形成不同二级结构的方式，利用原核生物转录与翻译的偶联对转录进行调节。此区域只存在于 原核生物合成代谢的操纵子中。 文库

以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 4. wobble hypothesis

摆动假说：解释遗传密码简并性的假说，克里克于1966年提出。对氨基酸专一的密码子的头两个碱基与相应tRNA上反密码子的第二个和第三个碱基互补配对，而密码子的第三个碱基（3´端）与反密码子5´端碱基的配对专一性相对较差，被称为摆动配对。（wobble pairing） 5. semiconservative replication

半保留复制：一种双链脱氧核糖核酸的复制模型，其中亲代双链分离后，每条单链均作为新链合成的模板。因此，复制完成时将有两个子代DNA分子，每个分子的核苷酸序列均与亲代分子相同，这是1953年沃森和克里克在DNA双螺旋结构基础上提出的假说，1958年得到证实。

(

二、填空题

1.糖蛋白的糖基大多结合在蛋白质的Asn残基、Thr残基与Ser残基上。

2.甾醇类化合物的核心结构是环戊烷多氢菲，鞘脂类的核心结构是神经酰胺。 3.蛋白质的超二级结构或motifs的基本组合形式为αα、ββ和βαβ等。

4.温度对酶活力影响分别为温度升高，反应速率加快和温度过高，酶蛋白变性失活。 分子结合氨基酸和识别mRNA的两个结构区分别称为3´端受体臂和反密码子环。

6.膜酯PIP2被磷脂酶C水解产生的两种起第二信使作用的有机小分子分别是IP3和DAG。 ）

的回文序列的特征是反向重复。

8.“基因”的分子生物学定义是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。 后随链合成的起始要一段短的RNA引物，它是由DNA引物酶以核糖核苷酸为底物合成的。 10.大肠杆菌中DNA聚合酶Ⅱ的生理功能主要是起修复DNA的作用。

11.写出两种合成后不被切割或拼接的RNA：真核生物5SrRNA和原核中的mRNA。 12.许多氨基酸都有多个密码子，除了Met、Ser只有一个密码子外。 反应主要有变性、退火、延伸三个步骤。

14.癌基因可分为两类：原癌基因和病毒癌基因。

$

三、判断正误

（错）1.碱性的组蛋白和碱都能降低双链DNA的Tm值。

（对）2.如果DNA样品A的Tm低于DNA样品B的Tm，那么样品A含有的A-T碱基对高于样品B。

（错）3.血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。

（错）4.酶活性中心一般由在以及结构中相邻的若干氨基酸残基组成。 （对）5.胰岛素的作用不需要G蛋白。

（对）是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。 ~

（对）族维生素都可以作为辅酶的组分参与代谢。

（错）8.维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。

（对）9.某细菌生长的最适温度是25℃，若把此细菌从25℃移到37℃的环境中，细菌细胞膜的流动性将增加。

（错）10.自然界DNA超螺旋都是负超螺旋。

（错）型双螺旋是DNA的普遍构型，而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。 （错）12.在先导链上DNA沿5´→3´方向合成，在后随链上则沿3´→5´方向合成。 （对）基因组是由两条单链正链RNA组成。

（错）14.我们把与mRNA序列互补的那条DNA链称为编码链或称有义链。 【

（对）的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。

（错）16.所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构。 （错）17.核酸分子在电场中向正极移动，蛋白质向负极移动。

（错）18.原核生物转录负时，调节基因的蛋白质产物是基因活性的一种激活物，而在正时，调节基因的产物是一种阻遏物。

（对）19.所有免疫球蛋白中，C区的氨基酸序列差别较小，V区的氨基酸序列差别较大。 （对）20.操纵子和启动子的是反式隐性、顺式显性的，而编码阻遏蛋白基因的既是反式显性又是顺式显性。

四、选择题

(

1.一未知三糖，可被β-半乳糖苷酶水解，产物中检测到有麦芽糖和半乳糖，推测其分子结构中含有（D）

分子β-D-半乳糖和2分子α-D-葡萄糖 分子α-D-葡萄糖和2分子β-D-半乳糖

分子β-D-半乳糖、1分子β-D-葡萄糖和1分子α-D-葡萄糖 分子β-D-半乳糖、1分子α-D-葡萄糖和1分子D-葡萄糖 2.缩醛磷脂与其他磷酸甘油脂结构上显著不同的是（B）

A.所有缩醛磷脂都有相同的头基团 B.其甘油的C-1被长链脂肪醇醚化 C.与其甘油的C-1相连的脂肪酸是不饱和脂肪酸 D.烃链中出现环状结构 &

3.欲构成双分子层组成，其内外均为水相的封闭囊泡，最好选择（A）

A.卵磷脂 B.硬脂酸钠 C.胆固醇 D.脑苷脂

4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰蛋白质的（C）残基

5.将抗体固定在层析柱的载体，使抗原从流经此柱的蛋白质样品中分离出来，这技术属于（D）

A.吸附层析 B.离子交换层析 C.分配层析 D.亲和层析 6.下列有关β-折叠的叙述错误的是（A） A.β-折叠是纤维状蛋白质的特有结构 }

B.β-折叠靠肽链的C=O与N-H间形成的两条链之间的氢键而稳定 C.α-螺旋可以通过加热处理而转变成β-折叠 D.β-折叠有平行的β-折叠和反平行的β-折叠

7.下列聚合物在中性pH下可能形成α螺旋的是（C）

A.多聚甘氨酸 B.多聚谷氨酸 C.多聚亮氨酸 D.多聚脯氨酸 8.多食糖类需补充（A）

A.维生素B1 B.维生素B2 C.维生素B5 D.维生素6 9.代表了随机顺序机制的双底物双产物反应是（B） 《 A.

B.C.

10.四肽Ser-Val-Trp-His与FDNB反应后，用6mol/LHCL水解得到（C） ，Val-Trp-His ，Val，Trp，His ，Val，His ，Ser，Val，Trp

11.一种茶碱的类似物Aminophyline经常被用来与肾上腺素一起治疗急性哮喘，它的作用可能是（D）

A.促肾上腺素与受体结合 B.帮助G蛋白结合激活腺苷酸环化酶 ;

C.有cAMP样作用 D.抑制磷酸二酯酶，防止cAMP水解

12.某双链DNA样品，含20摩尔百分比的腺嘌呤，其鸟嘌呤的摩尔百分比应为（A）

13.对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当［S］=Km时，若v=35μmol/min。Vmax是（B） μmol/min μmol/min μmol/min

共价闭环式超螺旋的构象改变只能发生在（A）

A.至少有一个磷酸二酯键断裂 B.磷酸二酯键的两侧都断开 C.组蛋白结合到DNA上 D.盐物质质量浓度超过L ^

15.寡聚dT-纤维素柱层析用于从真核生物总RNA中纯化mRNA，原理是（D） A.真核mRNA含有dA B.真核mRNA内部含有多聚A C.真核mRNA的5＇有一多聚A D.真核mRNA的3＇有一多聚A

16.乳糖操纵子的安慰诱导物是（D）

A.乳糖 B.半乳糖 C.异构乳糖 D.异丙基巯基半乳糖苷 17.复制子（C）

A.细胞期同复制产物被分离之后的DNA片段 B.复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白 !

C.任何自发复制的DNA序列（它与复制起始点相连） D.复制起点和复制叉之间的DNA片段 18.基因组是（D）

A.一个生物体内所有基因的分子总量 B.一个二倍体细胞中的染色体数目

C.遗传单体 D.生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量 在10nm纤丝中长度比缩了（A）倍 倍 倍 倍 倍

20.原核生物中起始氨基酰-tRNA是（A） …

21.蛋白质生物合成的终止信号由（B）识别 （或elF）

22.核糖体E位点是（B）

A.真核mRNA加工位点 离开原核生物核糖体的位点 C.核糖体中受EcoR I的位点 D.真核mRNA起始结合位点

五、问答题

(

1、不同pH时测定两种多聚氨基酸的旋光度，结果如图（图为生化书209页的图5-15）所示。⑴解释旋光度急剧变化的原因。⑵旋光度和二级结构有什么关系 答：

（1）多聚赖氨酸在pH小于pI时，R基具有正电荷，静电排斥，不能形成链内氢键，呈无规则卷曲，而在pH大于pI时，自发的形成氢键，同样对多聚谷氨酸有变化。 （2）α-螺旋的比旋不等于构成自身氨基酸的简单加和，而是无规则卷曲的比旋才和自身氨基酸的比旋加和相等，α-螺旋的旋光度实际上是α碳原子不同构型的不对称和α-螺旋的构象不对称的总反应。

2、欲配置，L甘氨酸-HCl缓冲液，需多少质量的甘氨酸和多少体积的1mol/L HCl（甘氨酸的相对分子质量，pKa1=，pKa2=） 答：

+0-0++++

因为Gly→Gly→Gly。pR=pKa+lg(Gly/Gly)，又因为HCl提供H，所以2［Gly］=［H］，

+0+

［Gly］+［Gly］=L，［H］=×=L。VHCl=L×1mol/L=。MGly=×=

3、某DNA重组体的插入片段为线状双链，长度为，被性核酸内切酶A和B降解的产物经凝胶电泳分级分离后结果如下： ：

⑴酶A单独消化时，得到和的2个片段

⑵酶B单独消化时，得到、和的三个片段 ⑶酶A和酶B一起消化时，得到、、和的4个片段 根据上述信息画出该插入片段的性内切酶图谱。

答：画一条线段，在线段上按顺序画上B,A,B三个点。

4、DNA连接酶对于DNA的复制是很重要的，但RNA的合成一般却不需要连接酶。试解释该现象。

答：DNA聚合酶只能延长已有的DNA链，而不能从头合成DNA链，但RNA聚合酶能从头合成RNA链。这是与DNA合成区别之一。在DNA复制时，首先由RNA聚合酶合成一小段RNA引物，然后在DNA聚合酶催化下使链得到延伸，在DNA复制完成后，需要把原先的RNA引物切除，因此合成的DNA片段之间通过DNA连接酶进行连接。

5、大肠杆菌DNA中，邻近核苷酸对之间的距离是，双螺旋每一转的高度（即螺距）是，若复制叉以每秒500个碱基对的速度向前移动，复制叉前的DNA以多大的速度旋转 \"

答：=10,500/10=50r/s

6、为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定，怎样区分某段mRNA是真核mRNA还是原核mRNA 答：mRNA直接负责蛋白质的产生，翻译后即可降解，由于功能的差异，稳定性也不同，在不同的组织中半衰期也会有差别。rRNA参与核糖体的组装，而核糖体是一个相对稳定的结构，因此，rRNA比较稳定，tRNA参与翻译过程，主要功能是携带氨基酸到达核糖体，在完成一次携带功能后不可能降解而需要继续下一轮的氨基酸转运工作。mRNA游离存在于细胞之中，并且被特异的单链RNA核酸酶所降解。tRNA和rRNA是部分双链的所以能够免遭核酸酶的攻击。另外，rRNA不是游离存在的，通常同蛋白质结合形成核糖体5＇端帽子结构和3＇端PloyA尾。

7、结合乳糖操纵子和色氨酸操纵子的机制说明原核生物基因原理。 答：

①σ因子决定RNA聚合酶识别特异性 ②原核生物中操纵子模型普遍性 ③阻遏蛋白和阻遏机制的普遍性。 $

大肠杆菌乳糖操纵子包括3个结构基因，Z，Y，A和启动子，控制子，阻遏子等。转录时，RNA聚合酶首先与启动区结合，通过操纵区向右转录，从O区中间开始，按Z→Y→A方向进行，每次转录出来的一条mRNA链上都带有着3个基因，转录的在启动区和操纵区进行。色氨酸操纵子是一种阻遏型操纵子，当无色氨酸时，辅阻遏蛋白不能结合O序列，操纵基因开放，开始转录。当细胞内有大量的色氨酸时，辅阻遏蛋白与色氨酸结合后，可结合O序列阻遏基因转录。Trp操纵子的另一个方式是衰减机制，在色氨酸操纵子第一个结构基因和启动基因之间存在有一弱化区域，当细胞内色氨酸浓度很高时，通过与转录想偶联的翻译过程，形成一个弱化子结构，使RNA聚合酶从DNA上脱离，转录终止。原核生物的基因还有其他形式，但是操纵子是它的基本模式。方式有正控制和负控制，且往往正负控制同时作用于一个操纵子。这种多重控制比单一控制更有效、精确。在大肠杆菌中已知的操纵子已超过100.但是相对于真核生物的基因方式来看，真核生物的基因比原核生物复杂得多，这是因为这两类生物在三个不同水平上存在着重大的差别。

8、在生物大分子的结构研究中使用了多种天然的或人工的化学物质。请举出三种作用类型不同的人工合成的化学物质。按作用类型，说明它们是如何被用于研究大分子结构的。 答：人工合成蛋白质：结晶牛胰岛素，通过X射线晶体衍射技术进行胰岛素结构的研究，如果是溶液，则用NMR技术研究。人工合成核酸：酵母丙氨酸转移核糖核酸，用二维核磁共振，X射线晶体学。质谱法也可以用于研究蛋白质和核酸结构，用气相色谱法研究脂肪酸，人工反式脂肪酸（人造奶油）。

2006年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

1. Shuttle plasmid vector

穿梭质粒载体：指能在两种不同的生物中复制的载体。例如既能在原核生物中复制，又能在真核生物中复制的载体。这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因，还有真核生物的自主复制序列（ARS）以及选择性标记性状，具有多克隆位点。通常穿梭载体在细菌中用于克隆，扩增目的基因，在酵母菌中用于基因表达分析。 2. oncogene，proto-oncogene，anti-onco-gene \\

癌基因是一类会引起细胞癌变的基因。癌基因有其正常的生物学功能，主要是刺激细胞的正常生长，以满足细胞更新的需求。只是当癌基因发生突变后，才会在没有接收到生长信号的情况下仍然不断地促使细胞生长或使细胞免于死亡，最后导致细胞癌变；癌基因可分为两类：一类是病毒癌基因，指反转录病毒的基因组里带有可使受病毒感染的宿主细胞发生癌变的基因，简写成V-Onc；另一类是细胞癌基因，简写成c-onc，又称原癌基因（proto-onco gene），这是指正常细胞基因组中，一旦发生突变或被异常激活后可使细胞发生恶性转化的记忆，抑癌基因或肿瘤抑制基因（tumor suppressor gene）又称抗癌基因（anti-onco-gene），是指能够抑制细胞癌基因活性的一类基因，其功能是抑制细胞周期，组织细胞数目增多以及促使细胞死亡。 序列

在原核生物mRNA起始密码AUG上游7-12碱基处，有一段富含嘌呤的序列，以AG-GA为核心。这段序列可与核糖体30S亚基中16SrRNA3＇端富含嘧啶序列相结合，与翻译的起始阶段作用过程相关。

sequencing by hybridization即DNA杂交测序法。如果一段较短的DNA探针能与较长的DNA片段杂交，并形成完全的双链结构，就能推测目标DNA上存在着相应的互补序列，这就是基本原理。

open reading frame开放阅读框是DNA上的一段碱基序列，由于拥有特殊的起始密码子和直到可以从该段碱基序列产生合适大小蛋白才出现的终止密码子，该段碱基序列编码一个蛋白。

6. transcription factor :

转录因子：基因转录有正和负之分。转录因子是起正作用的反式作用因子。转录因子是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态，RNA聚合酶自身无法启动基因转录，只有当转录因子结合在其识别的DNA序列上后，基因才开始表达。 7. allelic exclusion 等位基因排斥：形容在特殊淋巴细胞中只有一个等位基因来表达编码的免疫球蛋白质。参考分子书346 8. bZIP

亮氨酸拉链：出现在DNA结合蛋白质和其它蛋白质中的一种结构基元（motif）。当来自同一个或不同多肽链的两个两用性的α-螺旋的疏水面（常常含有亮氨酸残基）相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链。

9. attenuator 衰减子：是位于细菌操纵子上游的一段核苷酸序列。原核生物中通过翻译前导肽而实现控制DNA的转录的方式称衰减作用。（转录衰减是原核生物特有的机制） 10. molecular hybridization 。

分子杂交：使单链DNA或RNA分子与具有互补碱基的另一DNA或RNA片段结合成双链的技术。即核酸分子间的杂交。相互杂交的两种核酸分子间有时并非完全一致，但必有一定的相关性。

二、选择题

1.不属于β-聚糖的是（A）

A.淀粉 B.几丁质 C.糖胺聚糖 D.纤维素 是（C）的英文缩写符号

A.甘氨酸 B.棕榈酸 C.赖氨酸 D.岩藻糖 3.肽聚糖中不含有（D） ？

氨基酸 氨基酸 C.氨基糖 D.长链醇 4.以下生物分子中（B）不含有羧基

A.精氨酸 B.腺苷酸 C.透明质酸 D.精氨琥珀酸

5.右手α-螺旋是一种很稳定的构象，其主要原因是（B） A.螺旋内有芳香氨基酸残基

B.螺旋内所有肽键的-NH与>C=O都参与了氢键形成 C.侧链基团从螺旋中向外伸出，可以不彼此作用 D.每个碳碳连键的旋转度都相同 ）

6.下列名词中（C）可以描述在肽链或多核苷酸链中出现一种随机的弯曲

7.作为典型催化剂的酶具有下列（B）能量效应

A.增加活化能 B.降低活化能 C.提高产物能量水平 D.降低反应物能量水平 8.酶的亲和标记试剂是（B）

A.竞争性抑制剂 B.不可逆抑制剂 C.底物 D.非竞争性抑制剂 9.可以在木瓜蛋白酶作用了的免疫球蛋白IgG的产物中分离出（D） A.完整的重链和完整的轻链 |

B.完整的重链可变区部分（VH）和完整的轻链可变区部分（VL） C.一种仅由重链可变区部分和轻链可变区部分构成的片段 D.一种由全部轻链和部分重链（含重链可变区）构成的片段

10.若双链DNA一条链中的（A+G）/（T+C）=.则该DNA另一条链的（A+G）/（T+C）等于（A） 真核细胞的染色质主要是由以下成分构成的（B） 、RNA和组蛋白 、组蛋白和非组蛋白 、RNA和非组蛋白 、组蛋白和非组蛋白

12.基因剔除（knock cut）的方法主要被用来研究（B） !

A.基因的结构 B.基因的功能 C.基因的表达 D.基因的

分子的反密码子（A）

A.位于与氨基酸受体臂相对的环上 B.与DNA有义链互补 C.其序列是TψC D.与核糖体rRNA结合 14.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是（D）

A.碱基替换 B.磷酸酯键断裂 C.碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体 15.下列哪种抗生素可以阻止mRNA与核糖体结合，从而阻止蛋白质的合成（A） A.氯霉素 B.链霉素 C.青霉素 D.卡那霉素 %

16.蛋白质生物合成时，活化的氨基酸形式是（D）

A.氨基与tRNA的5＇端形成酯 B.羧基与tRNA的5＇端形成酯 C.氨基于tRNA的3＇端形成酯 D.羧基与tRNA的3＇端形成酯

17.核酸与蛋白质的合成具有方向性，DNA合成、RNA合成和蛋白质合成方向依次是（C） ＇→3＇、3＇→5＇、N端→C端 ＇→3＇、3＇→5＇、C端→N端 ＇→3＇、5＇→3＇、N端→C端 ＇→3＇、5＇→3＇、C端→N端 18.端粒酶属于（B）

A.性内切酶 聚合酶 连接酶 聚合酶 》

19.有一DNA双螺旋测得长度为微米，其大约分子量（道尔顿）为（D） 下列中易于形成α-螺旋的有（B）

A.多聚甘氨酸 B.多聚丙氨酸-缬氨酸 C.多聚脯氨酸-甘氨酸 D.带正电荷状态的多聚赖氨酸

三、判断正误

（错）构型糖都是右旋糖。

2+

（对）2.羧肽酶A中国Zn既是活性部位的结合基团，也是催化基团。 （错）3.溶液的pH可以影响氨基酸等电点。 】

（错）4.核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。

（对）5.多数寡聚蛋白质分子其亚基的排列是对称的。 （错）降解的方法可以直接测定所有寡肽的序列。

（错）7.在DNA中连续插入三个核苷酸比只插入一个核苷酸对DNA的功能影响大。 （错）8.缠绕数T相同而连环数L不同的DNA互为拓扑异构体，它们可以通过拓扑异构酶的催化来相互转变。

（对）9.磷酸二酯酶抑制剂可以与刺激cAMP合成的激素协同作用。 （对）10.乒乓机制和随机机制都采用了中间产物学说。

》

四、对下列错误论断给出错误分析和反证。

示例：

（1）自然界的多糖都是由D型单糖构成的。

错误分析：自然界有少数几种单糖是L-构型的，它们也见于某些多糖中。 反证：构成果胶质的阿拉伯聚糖就是由L-阿拉伯糖聚合而成的。 （2）球状蛋白质能溶于水的原因是其表面有大量电荷。 错误分析：物质溶解度与其分子与水形成氢键有关，因此球状蛋白质能溶于水的原因是其表面有大量极性基团。

反证：向蛋白质溶液加入中性盐或有机溶剂可以使蛋白质析出。 '

1、血红蛋白有4个类似肌红蛋白的亚基，因此血红蛋白与氧的亲和力是肌红蛋白的4倍。 答：没有任何条件

2、所谓生物抗氧化剂就是不容易被氧化的生物分子。 答：是极易氧化Ve

3、所有酶原的激活都是异体激活（非自身激活）。 答：胰蛋白酶原

4、自然界DNA形成超螺旋时倾向采取负超螺旋，因为只有负超螺旋DA能保持其原来的双螺旋。

答：易于解链 >

5、熔点高的不饱和脂肪酸的顺式/反式双键比值高。 答：越低

6、酶的别构效应是一种由产物执行的负反馈机制。 答：举例说明

五、计算题

1、计算pH7时八肽Gly-Pro-Asp-His-Leu-Glu-Lys-Ala的净电荷。

.

答：初步根据pK值粗略判断所带电荷。参考生化书166

-2、计算pH5的天冬氨酸（Asp）溶液中Asp的比例 3、已知DNA的260/280值为，RNA的260/280值为。今有一个不含蛋白等杂质的核酸纯品，其260/280值为，试问180微克该样品中RNA和DNA各有多少微克（注：1OD260的DNA为50微克，1OD260的RNA为40微克） 答：不含蛋白质等杂质，即260/280的比值表明只含有DNA和RNA，最终的260/280比值为，小明DNA和RNA的摩尔质量数是相等的。设DNA为xg，则x/50=(180-x)/40，即x=100g

-5-4-4、某酶的Km为×10mol/L，Vmax为22μmol/L/min。酶促速度为2×10mol/L时，加入5×10

4-4

mol/L抑制剂后，反应速度只有原来的76%。已知抑制剂的Ki为3×10mol/L。问该抑制剂是什么类型的抑制剂 非竞争性抑制公式：

竞争性抑制公式：

答：直接代入树脂，看复合那个公式即可

:

六、简答题

1、DNA保存在纯水中和保存在盐溶液中有什么不同

2、假设从一种细菌中获得核酸混合物，请出一个流程按可能的核酸种类分离纯化该核酸组成。

答：确定碱基比率。如果有胸腺嘧啶，为DNA，如果有尿嘧啶，则为RNA。如果为双链分子，那么A与T（或U）的量以及G与C的量应相等。 3、简述核糖体必须包括的几个活性中心及作用。 答：参考细胞生物学书309或分子书相关内容。 4、简述DNA的四种修复方式。 ，

5、简述转座子的概念和遗传学效应。

七、论述题

1、比较原核生物和真核生物的mRNA特征和特性。

答：原核生物mRNA的特征：半衰期短；多以多顺反子的形式存在；5＇端无帽子结构而有SD序列，3＇端没有或只有较短的polyA结构。真核生物mRNA的特征：半衰期较长；单顺反子形式存在；断裂基因；5＇端帽子结构，3＇端较长的polyA结构（组蛋白除外）。 2、论述弱相互作用（次级键）及其在稳定蛋白质构象中的作用。（答题要求：解释弱相互作用并按种类分别论述）

2007年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

@

1. GAG

糖胺聚糖（glycosaminoglycan）：是由重复的二糖单位构成的长链多糖，其二糖单位之一是氨基己糖（氨基葡萄糖或氨基半乳糖）。故称糖胺聚糖；另一个是糖醛酸。包括：透明质酸、硫酸软骨素、肝素和硫酸角质素等。 2. affinity labeling reagent

亲和标记试剂：具有底物类似物的结构，可以和相应的酶结合，同时还带有一个活泼的化学基因，能与酶分子中的必需基团进行共价修饰，从而抑制酶的活性。因抑制剂是通过对酶的亲和力来对酶进行修饰标记的，故称亲和标记试剂。 & motifs

结构域和基序：随着蛋白质结构与功能研究的深入，发现不少蛋白质分子中的一些二级结构单元，如形成相对稳定的αα、ββ、βαβ等超二级结构，又称模体（motif）或模序。且单个或多个超二级结构，尚可进一步集结起来，形成在蛋白质分子空间结构中明显可区分的区域，称结构域，它们分别又是蛋白质分子中的一个个功能单位，故不严格地又称之为功能域。 降解

从多肽链游离N末端测定氨基酸残基的序列的过程。N末端氨基酸残基被苯异硫氰酸脂（PITC）修饰，然后从多肽链上切下修饰的残基，再经层析鉴定，余下的多肽链（少了一个残基）被回收再进行下一轮降解循环。

-

通常把加热变性时DNA溶液A260升高达到最大值一半时的温度称为该DNA的熔解温度，Tm是研究该核酸变性很有用的参数。Tm值与DNA分子中GC含量成正比。 6. gene therapy 基因治疗：是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。 7. interrupted gene

断裂基因：真核生物的基因组十分复杂，DNA十分富余，其结构基因由许多外显子和内含子组成相间排列的建个基因，即splitting gene tRNA

起始tRNA：指能特异性地认别mRNA上的起始密码子，是使蛋白质合成开始的tRNA。 ；

9. nonsense mutation 无义突变：编码某一氨基酸的三联体密码经碱基替换后，变成不编码任何氨基酸的终止密码UAA、UAG或UGA。虽然无义突变并不引起氨基酸编码的错误，但由于终止密码出现一条mRNA的中间部位，就使翻译时多肽链的终止就此终止，形成一条不完整的多肽链。 chip

基因芯片，又称为DNA微阵列（DNA microarray），其测序原理是杂交测序法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。该技术主要包括四个基本要点：芯片方阵的构建、样品的制备、生物分子反应和信号的检测。

二、填空题

1.蛋白质的合成主要包括AA的活化、肽链起始、肽链延伸、肽链终止和折叠与加工5个阶段，蛋白质合成抑制剂链霉素通过干扰fMet-tRNA与核糖体的结合来阻止蛋白质的合成。 2.原核生物的转录系统根据机制的不同可分为正转录、负转录，乳糖操纵子是负控诱导系统，色氨酸操纵子是负控阻遏系统。 }

3.在DNA复制过程中，改变DNA螺旋程度的酶叫拓扑异构酶。 4.原核生物与真核生物的翻译相比较，原核生物翻译过程中的不同点有核糖体的大小、起始因子种类、核糖体结合位点、起始tRNA、释放因子。

基因组是由两条单链正链RNA组成。乙肝病毒基因组由部分单链的环状双链DNA组成。 6.密码子具有简并性、普遍性和特殊性、密码子与反密码子的相互作用3种性质。

三、计算题

1、向处于等电点的400ml L甘氨酸中加入100mL L醋酸。试计算 （1）混合物中的pH；（2）甘氨酸占优势的等电形式在混合物中的近似浓度。 |

答：根据H-H的公式计算

3

2、1μg纯酶（Mr：×10）在最适条件下，催化反应速率为μmol/L。试计算： （1）酶的比活力；（2）转换数。

145270

3、计算Arg和Glu的间距，假定该肽链全部为α-螺旋。不考虑内含子，其编码基因中相应DNA区域的长度为多少nm 答：（270-145）×=；125×3×=

四、简答题

1、真核生物基因表达在转录水平上是如何的 !

2、什么叫内含子有何生物学意义

答：内含子是基因内的间隔序列，不出现在成熟的RNA分子中，在转录后通过加工被切除，大多数真核生物的基因都有内含子。在转录后的加工中，从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。属于内含子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。内含子的存在对生物体的进化中有很重要的作用。A使同源重组两DNA分子间链的断裂和再连接可以发生在内含子处，促进重组；B增加了基因组的复杂性C内含子和外显子是相对的，有时也可以转化为外显子D它的存在使得选择性拼接发挥了很大作用。故不能认为内含子是无用序列。 3、DNA复制起始过程如何受DNA甲基化状态影响

答：亲本DNA通常发生种属特异的甲基化。在复制之后，两个模板-复制体双链体是半甲基化的。因为半甲基化DNA对膜结合受体比对DnaA有更高的亲和力，半甲基化DNA不能复制，从而防止了成熟前复制。

4、列举一个已知的DNA序列编码一种以上蛋白质的三种方法，并举一例说明。 答：给定一段DNA序列可以以下述方式编码两种或两种以上的蛋白质 ⑴可读框中在核糖体结合位点之后含有多重起始位点 ⑵以一两个碱基的移码方式出现重叠的可读框 *

⑶不同的剪接方式，例如选择不同的外显子组合成不同的mRNA。 5、说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分（3%~5%）

答：mRNA只占总RNA的3%-5%，这主要是有以下两个原因：

①由于需要大量的核糖体和稳定的tRNA群，因此mRNA合成量比其他RNA的量要少

②由于对内切酶与外切酶敏感，mRNA容易自发地降解，所以在原核细胞中MRNA的半衰期只有2-15分钟，真核细胞中也只有4-24小时。 6、试列表比较核酸与蛋白质的结构及作用力。

答：从初级结构到高级结构，构象维持的作用力（考察基础知识）

;

五、问答题

1、下图显示来自两种血红蛋白的氧合曲线。

（1）分析该实验结果。

（2）如何根据蛋白质分子结构解释该曲线

（3）如果同时知道这两种血红蛋白的其他信息，例如①它们分别来自胎血和成人血，或者②它们分别来自长期生活在青藏高原和华北平原的男性人体。请推测两种血红蛋白各对应两种假设中的哪一种，并说明理由。

2、已知某受体蛋白质与一种激素结合后引起细胞内蛋白激酶活化，问该受体蛋白质是外周蛋白还是内在蛋白并说明理由。

3、现分离到一种新蛋白，试设计实验对该蛋白的基因进行分子克隆。 &

4、真核生物基因组中有哪些类型的DNA重复序列简要说明基因组重复序列可能的生物学意义以及基因组重复序列在分子标记研究中的应用。

答：第一代多态性标记是RFLP（restriction fragment length polymorphism，性片段长度多态性）。

第二代多态性标记是短的串联重复序列包括小卫星DNA和微卫星DNA，其多态性主要来自重复序列拷贝数的变化，小卫星DNA-由15-65bp的基本单位串联重复而成，长度一般不超过20kb。重复次数（小卫星DNA区的长度）在人群中是高度变异的；按照孟德尔的规律遗微卫星DNA/简短串联重复（STR、STRP或SSLP），重复单元2-8bp，通常重复10-60次。

第三代多态性标记是单核苷酸的多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）分子标记是遗传标记的一类。遗传标记主要有3大类：⑴形态标记，如颜色、大小、高矮等⑵蛋白质标记，如同工酶等⑶DNA标记。在这里，分子标记是指DNA标记。DNA标记有许多种，如RFLP、RAPD、AFLP、SCAR、SSR、STS、SSCP和VNTR等。其中的一些标记已成功地应用于植物育种的各个方面。

5、以生物大分子的序列互补为题，写一篇400字左右的短文。

答：生物大分子包括：糖类、脂类、核酸、蛋白质序列互补：核酸故以核酸的序列互补配对进行发挥。

2008年硕士研究生入学考试试题

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一、名词解释

rapid-amplification of cDNA ends 通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。 2.酶的自杀底物

指一些底物类似物能为酶所催化，其形成的产物与酶活性中心共价结合，不可逆地抑制酶的活性的物质。 3.逆转座子

在基因组内存在着通过DNA转录为RNA后，再经逆转录成为cDNA并插入到基因组的新位点上的因子，被称为逆转座子。 4.卫星DNA &

一类高度重复序列串联的DNA，卫星DNA按其重复单元的核苷酸的多少，可以分为两类。一类是小卫星DNA，由几百个核苷酸对的单元重复组成。另一类是微卫星DNA，由2到20个左右的核苷酸对的单元重复成百上千次所组成。

二、填空题

1.核糖核酸经酸完全水解后，为碱基、核糖和核酸三部分。

的二级螺旋结构有A型、B型、和Z型三种，B型DNA在细胞内占优势，在碱基数相同时，A型DNA的长度最短。

3.起始tRNA能特异性地识别mRNA模板上起始密码子，原核生物的起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸，真核生物的起始tRNA携带甲硫氨酸。

4.性核酸内切酶和DNA连接酶的发现和应用被认为是现代基因工程史上最重要的事件，是重组DNA的核心。

5.免疫系统是动物的主要防御系统，包括细胞免疫和体液免疫两部分。 |

6.真核生物基因表达在DNA水平的包括基因删除/丢失、扩增、重排/移位和修饰等方式。

7.细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，几丁质的单糖成分为N-乙酰-β-D-葡糖胺。

8.谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的，它们之间的连接方式是谷氨酸γ-羧基-α-氨基-半胱氨酸α-羧基-α-氨基-甘氨酸。 9.构成生物膜的脂类包括磷脂、胆固醇和糖脂。

10.蛋白质中能通过侧链烃基发生O-糖基化的氨基酸残基是丝氨酸和苏氨酸。

11.认为肽键具有部分双键性质的主要依据是-CO-NH-中的C-N键长介于C=N与C-N之间。 的Tm定义为使DNA双螺旋结构失去一半时的温度。 13.广义的核酶包括具有催化能力的DNA和RNA。 %

14.辅酶NAD+/NADH和FADH2/FAD在反应中转移电子，它们转移电子的形式分别可以表示成H-和H。

15.阳光的能量能使动物体的某种维生素原变为维生素，这种维生素原是存在于皮肤中的7-脱氢胆固醇。

16.胰岛素作用胰岛素受体时，直接的效应是受体获得酪氨酸激酶活性。

17.丝氨酸蛋白酶催化三联体包括Ser-His-Asp。

18.推测一多聚谷氨酸，在pH=pI和pH>pI时的构象分别为α螺旋、伸展构象。

19.糖原与淀粉结构上的区别是糖原的α-1,6糖苷键/α-1,4糖苷键的比例高于淀粉。 20.溶菌酶是水解酶酶类，作用的对象是肽聚糖的糖链的NAM-NAG之间的β-1,4糖苷键。

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三、计算题

1、一个线性DNA分子经过连续5代复制后，原始DNA占总DNA的比例是多少 答：

每一代DNA的量都加倍。因此，连续5代后DNA量将是原始DNA的32倍（2的5次方）。因此，原始DNA占总DNA的%。

2、应该加多少毫升L KOH到450mL L丙氨酸盐酸盐中才能配成的缓冲液（丙氨酸的pKa1=，pKa2=） 答：

⑴加入KOH，丙氨酸盐酸盐（Ala+）的解离过程如下：Ala+→Ala0→Ala-根据pH=pKa1+lg［Ala0］/［Ala+］，的丙氨酸盐酸盐-KOH缓冲液中，［Ala0］/［Ala+］=① ⑵设加入的KOH的体积为xL，OH的摩尔数=； .

丙氨酸的总离子浓度=×（+x）(mol/L)， ［Ala0］=［OH］=（+x）②

忽略Ala-，则［Ala0］+［Ala+］=×（+x）（mol/lL）③ 解方程①②③得：+x)+×+x)=× +x) (1+=× x≈

答：应加1125mL LKOH到L丙氨酸盐酸盐中才能配成的缓冲液

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四、简答题

1、原核生物mRNA转录准确起始所必需的条件 答：-35（RNA聚合酶结合位点），-10（RNA聚合酶起始位点）启动子序列和终止子。 2、为什么DNA最适合作为遗传物质

答：DNA是由磷酸二酯键连接的简单核苷酸多具体，其双链结构（二级结构）保证了依赖于模板合成的准确性。DNA以遗传密码的形式编码多肽和蛋白质，其编码形式的多样性和复杂性是令人难以想象的。

3、有一段长为300个碱基的RNA序列，你怎样证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 答：根据序列组成进行判断：⑴此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA，应该含有许多特殊元件，如：假尿嘧啶和5-甲基胞嘧啶；同时应具有可以形成发卡环的反向重复序列。如果是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。 `

4、DNA连接酶催化什么反应，它在DNA复制中的作用是什么

答：DNA连接酶催化两个DNA片段的共价结合。双链DNA在相邻的5＇-磷酸基团和3＇羟基之间形成磷酸二酯键。即DNA连接酶能够缝合缺口。DNA连接酶在与DNA有关的几种反应中

均有重要作用。在复制过程中，它将后随链的新生DNA片段相连接，这个过程伴随着由DNA聚合酶Ⅰ作用的以DNA代替RNA引物的过程。

五、问答题

1、试述真核生物RNA的加工成熟过程及其生物学意义。

答：加帽子反应：mRNA从细胞核向细胞质运转，翻译起始加polyA反应：转录终止，翻译起始和mRNA降解RNA的剪接：从mRNA、tRNA和rRNA分子中切除内含子RNA的切割：从前体RNA中释放成熟tRNA和rRNA

2、如何通过动力学测定来完成下列任务

（1）已知某个蛋白质存在2个配基结合位点。证明这2个位点是相互的； %

（2）证明某个双底物酶的催化反应是由序反应；

（3）在一组化合物中，寻找某酶的最适底物和抑制剂，并确定抑制类型； （4）初步确定某化合物为某寡聚酶的别构调节物。 答：⑴与配基结合的动力学曲线是双曲线。

⑵比较每个底物与酶单独结合时的结合动力学曲线，只可能测到其中一个有。

⑶①比较针对每一种化合物的速度曲线，有反应的才是底物。比较底物的酶动力学曲线，求出常数Km（Ki）和Kcat（Vm），比较Kcat/Km，最适底物有最大的Kcat/Km。

②在最佳底物确定后，可以比较加有某化合物时酶催化底物的速度曲线，如果是抑制剂，则反应速率降低。

③比较加有该抑制剂时酶对底物的动力学曲线，计算出Km和Vm。竞争性抑制剂（可能性最大）：Km变大，Vm不变；反竞争性抑制剂：Km变小，Vm变小。非竞争性抑制剂：Km不变，Vm变小。 。

⑷有该调节物时，使酶的动力学曲线更加S型。 3、分离得到一种耐热的植物毒蛋白，在聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中，都得到一条区带；用二异丙基氟磷酸处理该天然毒素，发现毒素的毒性显著降低；用巯基乙醇和碘乙酸处理后，该蛋白质的耐热性和毒性也显著降低。该天然毒素和FDNB反应并用酸水解后，释放出游离的DNP-Gly。请分析这些结果并指出这些结果可以揭示该蛋白质什么样的结构信息 答：分析：

⑴SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳反应的是单肽链信息，因此两个电泳结果合并说明该蛋白质可能是单肽链蛋白质或者同寡聚蛋白质。

⑵二异丙基氟磷酸能与蛋白质表面的Ser的OH反应，形成蛋白质-有机磷酸的共价复合物。 ⑶巯基乙醇可以将二硫键还原为SH，SH进一步与碘乙酸反应，阻止了二硫键重新生成的可能，使得蛋白质空间结构被破坏。

⑷FDNB与氨基酸的α-氨基反应。结论：⑴该蛋白为单肽链或同源寡聚蛋白质。⑵其决定毒性的主要氨基酸残基为Ser，在三级结构中位于分子表面。⑶该蛋白质含有链内二硫键。⑷该毒素的N-末端残基为Gly。（分析占10分，结论占10分） 4、在获得一段EST序列后，如何分析其功能，请简述思路，并提出2种分析方法及其原理。 !

答： 思路

⑴查找序列同源性，分析功能；

⑵若⑴不行，就用RACE等获得该基因全长，推测基因功能； ⑶分析该基因的表达特性（拷贝数，是否为组织特异性）； ⑷利用转基因研究基因的定位和功能。 分析：

⑴构建融合蛋白，根据报告基因的定位该基因的表达位点，分析基因功能； *

⑵超表达，研究该基因可能的功能；

⑶RNAi，研究该基因沉默后的受体的变化研究其功能。

2009年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

1.半抗原

能与对应抗体结合出现抗原抗体反应，又不能单独技法人或动物产生抗体的抗原，只有反应原性，不具免疫原性 2.凝胶滞缓实验 EMSA，是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术，其基本原理是蛋白质可以与未编标记的核酸探针结合，电泳时这种复合物比没有蛋白质结合的探针在凝胶中泳动速度慢，表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白并可通过加入特异的抗体来检测特定的蛋白质。

—

绿色荧光蛋白，水中的一种蛋白质，能够发出绿色荧光，第65,67位氨基酸形成发光团，是主要发光位置，可作为报告分子，用于研究蛋白质和ceu器之间的相互作用 4.魔斑核苷酸

受严紧控制的细菌生长过程中一旦缺乏氨基酸供应，细菌会产生一个应急反应，使蛋白质和RNA的合成速率迅速下降，指的就是此过程中由大量GTP合成的鸟苷四磷酸（PPGPP）和鸟苷五磷酸（PPPGPP），它们的主要作用可能是影响RNA聚合酶与启动子结合的专一性，诱发应急反应，帮助细菌渡过难关。 蛋白

与鸟嘌呤核苷酸结合，具有GTP水解酶活性的一类信号转导蛋白 motif

锌指结构基序，同15年 ，

7.信号识别体 信号识别颗粒，真核细胞质中的一种小分子RNA和6种蛋白的复合体，能认别核糖体上的信号肽，并与之结合形成SRP-核糖体复合物

二、填空题

1.用热水溶解淀粉时，可以溶解的为支链淀粉，不溶解的为直链淀粉。

2.真核生物三种RNA聚合酶，RNA聚合酶Ⅰ合成rRNA，RNA聚合酶Ⅱ合成hnRNA，RNA聚合酶Ⅲ合成tRNA，5sRNA，SnRNA。

3.性内切酶识别位点的核苷酸序列通常具有GAATTC结构。

4.克隆新基因的可用方法：图位克隆法、Gateway大规模克隆法、RACE技术、cDNA差式分析。 ~

5.基因治疗中病毒载体应具有的基本条件：携带外源基因并能装配成病毒颗粒、介导外源基因的转移和表达、对机体没有致病力。

6.糖肽键主要有两种类型：N连接糖肽键和0连接糖肽键。

7.端粒酶与真核细胞内染色体DNA末端复制有关，它是一种DNA聚合酶。

8.绝大多数维生素作为酶辅酶或辅基的组成部分，在物质代谢中起重要作用。

9.常用于检测DNA/RNA、蛋白质的分子杂交技术：Southern杂交、Northern杂交、Western杂交。

10.真核生物mRNA的成熟过程5‘加帽、3‘加尾、剪接、切割。

复制需要模板链、引物、4种脱氧核糖核苷酸、DNA聚合酶，缺一不可。

&

三、计算题

1、酶是定量的。

-3

S=L；v=min S=×10 mol/L；v=min

-1 -4

S=×10mol/L；v=min S=×10 mol/L；v=min

-2-5

S=×10 mol/L；v=min S=×10 mol/L；v=min

-2

Vmax 等于多少；为什么S>×10mol/L，v不变 答：min；酶已经被底物饱和

2、有一双链DNA共，分子量2467900Da，其中G有300个则共有多少个碱基其中A占多少比例欲制40μmol/L的DNA溶液，需加多少水 …

答：每个碱基为330Da，则碱基个数为2467900/330= G+C=600，则A+T=6878，A%=3439/7478=50%

四、简答题

1、写出构成DNA的四个脱氧核苷酸的中文名，并画出单链DNA片段的竖线式缩写式或中文缩写式。

2、蛋白质翻译后加工主要有

N端fMet或Met的切除；二硫键的形成；蛋白质的折叠；糖基化作用使多肽变成糖蛋白；特定氨基酸的修饰；切除新生肽链中的非功能片段 3、真核基因转录前有什么 ~

答：染色质丢失、基因扩增、基因重排、染色体DNA的修饰和异染色质化

4、构成球蛋白的作用力有哪些这些作用力在球蛋白结构确立和维持方面有什么作用 5、凝胶过滤层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 凝胶：当不同大小的蛋白质流经凝胶层析柱时，比凝胶珠孔径大的分子不能进入珠内网状结构，而被排阻在凝胶珠之外随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下流动并最先流出柱外，比网孔小的分子能不同程度的自耦出入凝胶珠内外，这样，由于不同大小的分子所经的路径不同而得到分离，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来聚丙烯：也称圆盘凝胶电泳或圆盘电泳，以聚丙烯酰胺为支持物，一般制成凝胶脉柱或凝胶板，由相连的两部分组成（小部分浓缩胶，大部分分离胶），这两部分凝胶的孔位、缓冲液组分和离子强度、pH以及电场强度都是不同的，即不连续的，这样样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的起始区带，然后再进行电泳分离。在圆盘电泳的过程中有三种物理效应：样品的浓缩效应、凝胶对被分离分子的筛选效应、一般电泳分离的电荷效应 6、试写出两种沉淀蛋白质的方法并举例说明。

答：重金属盐沉淀法：当溶液中的pH大于pI时，蛋白质颗粒带负电，这样它就容易与重金

2+2+

属离子（Cu、Hg等）结合生成不溶性盐而沉淀。例如：误服重金属的病人可口服大量牛奶或豆浆解毒，因为它能和重金属形成不溶性盐，然后再服用催吐剂排除体外；加热变性沉淀法：几乎所有的蛋白质都因加热变性而凝固，当蛋白质处于等电点时，加热凝固最完全迅速，加热变性引起大白纸凝固沉淀原因是使蛋白质天然构象解体，疏水基外露，破坏了水化层。我国很早就创造了将大豆蛋白的浓溶液加热并点入少量（MgCl2）盐卤制豆腐的方法

五、问答题

\"

1、DNA变性和蛋白质变性分别是什么试说明二者是异同 2、RNA的作用。

答：RNA包括tRNA、mRNA、rNRNA

mRNA为信使RNA，它转达DNA上的遗传信息，作为蛋白质合成的模板，占总RNA的1%-5%，功能一是把DNA上的信息准确无误的转录下来，二是负责将它携带的遗传信息在核糖体上翻译成蛋白质；tRNA为转移RNA，从DNA转录时先形成前体，再经加工，成熟的tRNA进入细胞。在蛋白质合成过程中，在氨基酰-tRNA合成酶的催化下，识别细胞质里的各种氨基酸，并将其转运到核糖体上。功能是在蛋白质合成过程中，将氨基酸搬运到核糖体上并根据mRNA的遗传密码一次准确的将它携带的氨基酸连接成多肽；rRNA为核糖体RNA，是由核仁形成区转录而来，先形成前体，再经过加工后，形成成熟的RNA进入细胞质同蛋白质结合成为核糖体，是蛋白质合成的场所。功能是一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体，核糖体是合成蛋白质的场所。

3、基因工程简历在生物学的哪些重要发现试说明你对基因工程的发展和方向的看法。 答：主要有三大：一是20世纪40年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，解决了遗传物质基础的问题；第二是50年代提出了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制，解决了自我复制和世代交替问题；三是50年代末至60年代，相继提出了中心法则和操纵子学说，成功地破译了遗传密码，阐明了遗传信息的流动和表达机制。技术上，DNA分子体外切割与连接技术及核苷酸序列分析技术的进步直接推动了重组DNA技术的产生与发展。基因工程的发展和方向：从20世纪70初发展历经30年，已成为生物技术的核心内容，21世纪基因工程相关领域的产业将成为21世纪的主导产业之一。基因工程的研究范围涉及农业、工业、医药、能源、食品、环保等许多领域。食品方面：改良食品工业菌种，改善食品原料品质；生产酶制剂方面：大规模生产；植物方面：可以用来提高作物产量，改善品质，增强抗性；基因药物、开发靶向药物方面：开发抗肿瘤药物、人源化的单克隆抗体的研究、血液替代品的研究。

4、试说明蛋白质的一段序列怎么影响蛋白质的结构和功能

答：多肽或蛋白的一级结构相似，其折叠后的空间构象及功能也相似，例如同源蛋白；一级结构发生改变，是分子病的原因，如镰刀状贫血症：人的血红蛋白的四条肽链中只有两个Glu变成Val分子，就能发生镰刀状细胞贫血症；一级结构的部分切除，能使蛋白质功能激活。蛋白质、酶、多肽、激素在刚合成时是以无活性的前体形式存在，只有切除部分多肽后才呈现生物活性，如血液凝固系统中的血纤维蛋白原和凝血酶原等。

，

2010年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

protein

同源蛋白质：在不同生物体内行使相同或相似功能的蛋白质（生化p181）

端粒酶：在细胞中负责端粒的延长的一种酶，是基本的核蛋白逆转录酶，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。 chromatograph

亲和层析：是利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别能力，也即生物学亲和力，建立起来的一种有效的纯化方法。（生化p313） —

DNA repair 易错修复：在DNA损伤时，缺乏校对功能的DNA聚合酶常在受损部位进行DNA复制以避免细胞死亡，但同时又导致较高的差错率的修复方式。也叫SOS反应。（分子p55） protease

丝氨酸蛋白酶：胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶是一类蛋白水解酶，因为这些酶的活性中心的特异丝氨酸残基其关键性作用，所以又称丝氨酸蛋白酶。（生化p185，p405） alternative splicing RNA选择性剪接：是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式（选择不同的剪接位点组合）产生不同的mRNA剪接异构体的过程。（分子p195） initiation complex

翻译起始复合体：由核糖体亚基，一个mRNA模板，一个起始的tRNA分子和起始因子组成并组装在蛋白质合成起始点的复合物。 ^

zipper

亮氨酸拉链：出现于DNA结合蛋白和其它蛋白质中的一种结构基元（motif）。当来自同一个或不同多肽链的两个两用性的α-螺旋的疏水面（常常含有亮氨酸残基）相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链（分子p303）

二、填空题

1.糖蛋白的连接方式N-糖肽链、O-糖肽链。 2.有机磷抑制酶活性的部位丝氨酸羟基。

与蛋白质作用的的研究的方法有酵母单杂交、DNA凝胶滞缓实验。 4.碘值反应脂肪酸不饱和脂肪酸，皂化值可以计算脂肪酸平均链长。 ~

5.在PH6-8有缓冲作用的氨基酸是组氨酸，茚三酮反应为黄色的氨基酸是脯氨酸。 反应试剂苯异硫氰酸酯PITC，检测TyrPauly反应的属于重氮化合物。

7.蛋白质三级结构驱动力是疏水作用，血红蛋白氧结合曲线为S型的原因正协同同促效应。 族维生素作为辅酶的作用传递CO2、传递一碳单元、电子转移。 9.耐寒植物富含不饱和脂肪酸，使流动性增加。

前体是hnRNA，RNA聚合酶Ⅲ的产物tRNA、5SrRNA、snRNA。

+

11.大肠杆菌DNA连接酶需NAD，哺乳动物DNA连接酶需ATP。

12.原核生物肽链延伸过程包括后续氨酰-tRNA与核糖体结合、肽键的生成、移位，23SRNA

有催化肽键形成功能。 '

13.组蛋白的修饰方式甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化。

14.链霉素如何抑制蛋白质的合成干扰fMet-tRNA与核糖体结合。 注：作用于30S亚基。

15.“Nick translation缺口平移\"方法标记DNA探针需要的酶是DNA聚合酶I。

注：缺口平移法用于标记DNA探针：其原理是以限量的DNaseI在待标记的双链DNA的每一条链上产生若干个单链缺口；再利用多聚酶Ⅰ的5’-3’外切酶活性和5’-3’多聚酶活性，在缺口处的5’末端每切除一个核苷酸，则在3’末端添加一个核苷酸，以修补缺口，随着缺口在DNA链上的移动，标记的核苷酸就掺入到新合成的DNA链中。

三、计算题和简答题

1、有酶溶液50mg/ml,取测定活性，底物从3mol/L变成L，反应时间为10min,总共反应体系为100ml，此时的反应速度为最大的60%。问： —

（1）1ml酶溶液的活力单位；（2）酶的比活力；（3）米氏常数。 答：

酶活力单位的定义：在最适条件下，每分钟内催化1微摩尔底物转化为产物所需的酶量定义为一个酶活力单位，即1IU=1μmol/min。

63

那么，酶溶液的活力单位为：[（）mol/L × × 10]/10min = 3×10IU则，1ml酶溶液的

3

活力单位为6×10IU。生化p336

3

比活力计算公式：比活力=活力U/总蛋白mg = 6×10IU / 50mg = 120。生化p336 米氏方程式：v = Vmax×[S] / (Km+[S])

那么米氏常数Km = [ Vmax / V-1 ] × [ S ] = 2 / 3 × = 。生化p356

2、关于血红蛋白中婴儿中γ链取代成人的β链，143为由Ser变为His的意义、为什么BPG和成人结合的紧密 …

答：

胎儿血红蛋白简称HbF，亚基组成为α2γ2。HbF的γ链和β链很相似，也由146个氨基酸组成，但γ链中的H21(第143位)残基是Ser，而不是β链中的His。这样就减少了BPG(2,3-二磷酸甘油酸)分子结合部位的正电荷，也即减低了对BPG的亲和力。HbF对BPG的亲和力减低使得它对氧的亲和力增高。因此循环系统的胎儿能有效地通过胎盘从母体的血循环中吸收氧。生化p258

3、在原核生物中高效表达真核基因应注意什么 答：

⑴用cDNA序列，不要用基因组序列（不要含有内含子），因为原核生物没有内含子剪切系统。 ⑵需要考虑原核生物密码子偏好的问题。 ⑶高效表达需要强启动子。 ⑷注意要表达蛋白的大小，一般情况下大于70KD的蛋白在原核菌种不容易表达或表达量低。 $

⑸所要表达的蛋白是否需要经过修饰才具有活性，原核生物中蛋白质修饰系统不同。 4、原核和真核的RNA聚合酶的异同点 答：分子p70-71 同：

（1）以双链DNA为模板，以4种核苷酸作为活性前提，并以Mg2+为辅因子。 （2）催化RNA链的起始，延伸和终止，不需要引物。 （3）是转录过程中的核心酶。 （4）结构形态相同。 ！

异：

（1）分子组成不同：详细展开

（2）原核只有一种，真核生物有三种RNA聚合酶 5、免疫球蛋白的多样性的分子基础 答：分子p391 Ig多样性的机制：编码Ig各条多肽链的胚系基因结构是在不同的染色体或同一条染色体的不同部位，各基因结构中包括编码V区的V、（D）、J基因片段群和编码C区的C基因。在B细胞发育过程中通过基因重排，V、D、J片段或V、J片段随机连接，组成V基因，众多V区基因片段的组合和轻重链的组合，造成Ig的多样性。此外，片段连接中的不准确或N-核苷酸的插入，也产生多样性。 6、DNA变性和复性的影响因素 答：生化p509-510 ；

DNA变性的影响因素：①DNA的均一性②G-C含量③介质中的离子浓度 DNA复性的影响因素：①分子量②DNA浓度③重复序列。 7、DNA甲基化抑制基因转录的机理 答：分子p293

①DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。研究表明，DNA甲基化达到一定程度时，会发生从常规的B-DNA向Z-DNA的过度，由于Z-DNA结构收缩，螺旋加深，使许多蛋白质因子赖以结合的元件缩入大沟而不利于基因转录的起始。

②甲基化影响性内切酶对特异位点的切割。

③DNA甲基化与组蛋白的修饰相关，DNA甲基化诱导组蛋白的去乙酰化从而抑制转录。 ④DNA甲基化甚至可以使整条染色体失活，如X染色体。 …

⑤启动子甲基化会降低甚至失去其起始转录的活性。 ⑥甲基化还会增加该位点的突变频率。

四、论述题

1、形成蛋白质的寡聚体的意义

答：生化上p247，即四级缔合结构和功能上的优越性 ①降低比表面积，增加蛋白质的稳定性

②丰富蛋白质的结构，以行使更复杂的功能。 .

③提高基因编码的效率和经济性。

④使酶的催化基团汇集，提高催化效率。 ⑤形成一定的几何形状，如细菌鞭毛。 ⑥适当降低溶液渗透压。

⑦具有协同效应和别构效应，实现对酶活性的调节。

2、简述五种重组DNA导入细胞的方法并说明其原理 答：分子p163上CaCl2法、电击法及生化下p588 1、转化法 ]

转化（transformation）：通过生物学、物理学和化学等方法使外源裸露DNA进入受体细胞，并在受体细胞内稳定维持和表达的过程称为转化。如果外源DNA分子是病毒（噬菌体）的DNA或cDNA，此过程也称为转染（transfection）。 （1）直接转化法

有的微生物细胞就能直接摄取外源DNA。 （2）化合物诱导转化法

2＋2＋2＋

感受态细胞（competent cell）：用二价阳离子（如Mg、Ca、Mn）处理某些受体细胞，可以使其成为处于对外源DNA的接受比较敏感的生理状态的一种细胞。 （3）接合转化法

通过共体细胞同受体细胞间的间接接触而传递外源DNA的方法。整个转化过程涉及到3种有关的细菌菌株，称为三亲本接合转化法。此方法主要用于微生物细胞的基因转化。 （4）电穿孔转化法 {

利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促使外源DNA的有效导入。 （5）微弹轰击转化法 基因转化法

（6）激光微束穿孔转化法

利用直径很小、能量很高的激光微束照射受体细胞，可导致细胞膜的可逆性穿孔。 （7）超声波处理转化法

超声波处理细胞时可击穿细胞膜并形成过膜通道，使外源DNA进入细胞。 （8）脂质体介导转化法 ？

将DNA或RNA包裹于脂质体内，然后进行脂质体与细胞膜融合将基因导入。 （9）体内注射转化法

将目的基因重组体通过显微注射装置直接注入细胞核中。 （10）花粉管通道转化法 植物授粉过程中，将外源DNA涂在柱头上，使DNA沿花粉管通道或传递组织通过珠心进入胚囊，转化还不具正常细胞壁的卵、合子及早期的胚胎细胞。 （11）精子介导法

精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。

（12）磷酸钙转染法 ^

有的动物细胞能捕获黏附在细胞表面的DNA-磷酸钙沉淀。DNA同CaCl2混合制成DNA-CaCl2溶液；逐滴加入不断搅拌的Hepers-磷酸钙溶液，形成DNA－磷酸钙溶液共沉淀复合物；用吸管将沉淀复合物吸附在单层培养的动物细胞表面。 2、病毒（噬菌体）颗粒转导法

用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆载体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞，将此过程称为病毒（噬菌体）颗粒转导法。

3、保持遗传信息的稳定性和表达的精确性的机制 答：

①从DNA结构的稳定性来说明，双链互补。 ②DNA复制时采用多点复制、边解螺旋边复制，确保复制在短时间完成，避免发生基因突变。 ③DNA聚合酶的模板依赖性，使子代DNA与亲代DNA核苷酸顺序相同。 -

④复制过程中各种修复机制，保证了遗传信息的稳定性。

⑤翻译过程中，氨基酸与氨酰-tRNA特异结合，保证了表达的精确性。 ⑥翻译时，密码子与反密码子配对也保证了表达的准确性。

⑦从大的方面讲，有丝和减数都在遗传信息稳定性的保持中起到了相当大的作用。 4、从花药cDNA文库中筛选出一300bp的在花药中特异表达的cDNA，设计实验： （1）得到该基因的cDNA全序列； （2）分析有无内含子；

（3）获得基因启动子的序列并验证特异性。 ;

答：

（1）通用引物进行PCR扩增后，回收纯化后，测序分析可得cDNA全序列。

（2）用该cDNA与花药中的mRNA做杂交。当RNA链和cDNA杂交时，互补区可形成双链，非互补区依然保持单链结构。在电子显微镜下可以观察。如果存在内含子的话则可以看到非互补区。 （3）通过生物信息学的方法，在数据库中找到启动子序列。在启动子可能存在的片段的5'-端和3'-端相向分别进行缺失，然后再连接起来，利用Northern杂交法检测RNA的形成情况。显然，不管是从启动子的5'端还是3'端进行顺序缺失，只要缺失进入启动子区域，RNA量便会大大减少，或完全消失。

2011年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

cell

感受态细胞：具有摄取周围环境中游离DNA分子能力的细菌细胞称为感受态细胞。如大肠杆菌经CaCl2处理，就成为容易受质粒DNA转化的细胞。生化下441 》

substrate

自杀性底物：指那些底物类似物能为酶所催化，其形成产物与酶的活性中心共价结合，不可逆地抑制酶的活性的物质。生化上p376

溶解温度：通常把加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的溶解温度，用Tm表示。生化上p509 degeneracy

密码子简并性：同一种氨基酸具有两个或更多个密码子的现象称为密码子的简并性。分子p111

fragment

冈崎片段：DNA办不连续复制过程中，2条新生链都只能从5端向3端延伸，前导链连续合成,滞后链分段合成，这些分段合成的新生DNA片段称冈崎片段。分子p46 '

recombination

同源重组：是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin)之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。生化下p438 transcriptase

逆转录酶：又称RNA指导的DNA聚合酶。是以RNA为模板合成DNA的酶，是逆转录过程的核心酶。 effect

葡萄糖效应：又称葡萄糖阻遏或分解代谢产生阻遏作用。葡萄糖或某些容易利用的碳源，其分解代谢产物阻遏某些诱导酶体系编码的基因转录的现象。分子p236

增强子：是DNA上一小段可与蛋白质结合的区域，与蛋白质结合之后，基因的转录作用将会加强。分子p463 —

fragment

Klenow片段：大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ经胰蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。分子p418

二、填空题

略

三、计算题

有关蛋白质和核酸数量的和一道酶反应米氏方程的计算

#

四、简答题

1、SDS-PAGE与PAGE的比较。SDS-PAGE加巯基乙醇的作用 答：生化上p298与p309

PAGE及非变性凝胶电泳，也称为天然凝胶电泳，与SDS-PAGE即变性凝胶电泳最大的区别就在于蛋白在电泳过程中和电泳后都不会变性。最主要的有以下几点： ①凝胶的配置中非变性凝胶不能加入SDS，而变性凝胶的有SDS。 ②电泳载样缓冲液中非变性凝胶的不仅没有SDS，也没有巯基乙醇。

③在非变性凝胶中蛋白质的分离取决于它所带的电荷以及分子大小，不像SDS-PAGE电泳中蛋白质分离只与其分子量有关。 ￥

④非变性凝胶电泳中，酸性蛋白和碱性蛋白的分离是完全不同的，不像SDS-PAGE中所有蛋白都朝正极泳动。非变性凝胶电泳中碱性蛋白通常是在微酸性环境下进行，蛋白带正电荷，需要将阴极和阳极倒置才可以电泳。 ⑤因为是非变性凝胶电泳，所有的电泳时候电流不能太大，以免电泳时产生的热量太多导致蛋白变性，而且步骤都要在0-4度的条件下进行，这样才可以保持蛋白质的活性，也可以降低蛋白质的水解作用。这点跟变性电泳也不一样。

所以与SDS-PAGE电泳相比，非变性凝胶大大降低了蛋白质变性发生的机率巯基乙醇是强还原剂，能破坏蛋白质中的二硫键，使蛋白质伸展。 2、如何确定某氨基酸残基为酶的活性所必须 答：生化上p385

研究酶活性部位的方法有：

①酶分子侧链基团的化学修饰法：⑴非特异性共价修饰⑵特异性共价修饰⑶亲和标记 ②动力学参数测定法：活性部位的氨基酸残基的解离状态和酶活性直接相关，据此判断。 ;

③X-衍射晶体结构分析法：X-衍射晶体结构分析法可以解析酶分子的三维结构，有助于了解酶活性部位氨基酸残基及所处的位置与实际状态。 ④定点诱变法：将编码该氨基酸基因的碱基进行定点的诱变，使其编码氨基酸和编码氨基酸的性质发生改变，根据酶活性的变化来判断。 3、肽蛋白质类激素与类固醇激素作用机理的区别 答：生化上p570-571 ①蛋白质，多肽类激素以及前列腺素由于本身是不能通过细胞膜进入细胞的，因此其必须首先与靶细胞质膜上的特异受体结合，从而改变质膜内侧的腺苷酸环化酶的活性。腺苷酸环化酶催化ATP转化为cAMP，cAMP携带着激素的信息完成激素所产生的各种生理反应。实际上就是依赖于第二信使的机制。

②类固醇激素是一类多环有机化合物，这类分子能够通过细胞膜屏障而进入细胞内，所以这类激素的特异受体不在细胞膜上，而在靶细胞内。类固醇激素与靶细胞质的受体蛋白形成激素受体复合物，并向细胞核转移。这种激素和受体的复合物直接作用在染色质上，影响染色质特定部位的基因表达，从而控制蛋白质的合成和决定细胞的生长和分化。 4、转录起始位点上游DNA片段去除后转录活性下降，为什么 答：分子p80-81 %

因为转录起始位点包含重要的转录信息，包括增强子，启动子等。以真核生物为例： 增强子：增强或促进转录起始。GC区：控制转录频率。TATAbox：精确的控制转录起始。

5、DNA损伤原因及修复方式。 答：分子p55

DNA损伤的原因：

①自发性损伤：如DNA复制时产生的错配，自发性的化学变化（脱嘌呤或嘧啶，脱氨基） ②物理因素引起的损伤：放射线，电离辐射。 %

③化学诱变：烷化剂，嵌入剂等。

修复方式：①错配修复②切除修复③重组修复④DNA直接修复⑤SOS反应 6、RNA剪接与RNA编辑的不同。 答：分子p96-100

RNA剪接是指切除前体mRNA分子内含子的非编码区，并将外显子编码区连接起来形成成熟mRNA的过程，只存在于真核生物，是RNA加工的必要步骤。在此过程中，DNA的实际编码序列是不发生变化的。RNA编辑是某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA编码的遗传信息发生改变。不是很普遍。

五、论述题

1、可逆抑制剂与不可逆抑制剂的区别，如何通过酶促反应动力学判断 )

答：生化上p368-370

不可逆抑制剂通常以共价键与酶蛋白中的必需基团结合，而使酶失活，它不能用透析、超滤等物理方法除去。

可逆抑制剂以非共价键与酶蛋白中的必需基团结合，可用透析等物理方法除去抑制剂而使酶重新恢复活性。P370图9-18,9-19，并加以解释。

2、复制叉上进行的基本活动和酶有哪些 答：分子p44-49 解析：DNA复制起始一共涉及到DnaA（复制起始因子，识别OriC序列）、DnaB（DNA解链酶）、DnaC（召唤DnaB到复制叉）、HU（结合DNA使之弯曲）、引物合成酶、单链DNA结合蛋白、RNA聚合酶、DNA旋转酶、Dam甲基化酶，一共是9种重要的酶或蛋白质，其中DnaA、DnaB、引物合成酶、单链DNA结合蛋白、Dam甲基化酶非常重要。

DNA复制时，往往先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由聚合酶从RNA引物3’端开始合成新的DNA链。对于前导链来说，这一引发过程比较简单，只要有一段RNA引物，DNA聚合酶就能以此为起点，一直合成下去。对于后随链，引发过程较为复杂，需要多种蛋白质和酶参与。后随链的引发过程由引发体来完成。引发体由6种蛋白质构成，预引体或引体前体把这6种蛋白质结合在一起并和引发酶或引物过程酶进一步组装形成引发体。引发体似火车头一样在后随链分叉的方向前进，并在模板上断断续续的引发生成滞后链的引物RNA短链，再由DNA聚合酶III作用合成DNA，直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。由RNA酶H降解RNA引物并由DNA聚合酶I将缺口补齐，再由DNA连接酶将每两个冈崎片段连

在一起形成大分子DNA。 …

3、真核生物基因表达的特点。 答：

①真核生物基因表达的水平多：包括转录前水平，转录活性，转录后，翻译水平，翻译后水平的调节。

②真核生物基因的表达与染色质的结构变化相关：a.染色质结构影响基因转录。紧密的染色质结构阻止基因的表达，如异染色质。b.组蛋白的作用：组蛋白是碱性蛋白质，带正电荷，可与DNA链上带负电荷的磷酸基相结合，从而阻碍基因表达。组蛋白的修饰能基因的表达。拓扑结构变化：正性超螺旋会拆散核小体，有利于RNA聚合酶向前移动转录；而负性超螺旋则有利于核小体的再形成。

③真核生物基因表达以正性调节为主：真核RNA聚合酶对启动子的亲和力很低，基本上不依靠自身来起始转录，需要依赖多种激活蛋白的协同作用。真核基因中虽然也发现有负性元件，但其存在并不普遍；真核基因转录表达的蛋白也有起阻遏和激活作用或兼有两种作用者，但总的是以激活蛋白的作用为主。即多数真核基因在没有蛋白作用时是不转录的，需要表达时就要有激活的蛋白质来促进转录。 4、举例说明三种生物大分子相互作用的研究方法。 答：

①DNA与蛋白质相互作用：a.酵母单杂交（分子206）；凝胶滞缓实验（分子223）；蛋白质印迹杂交；足迹法；与蛋白质复合体的电镜观察。 \\

②蛋白质与蛋白质相互作用：a.酵母双杂交；（体外蛋白相互作用）；c.噬菌体展示技术；d.荧光共振能量转移法；e.抗体与蛋白质芯片技术；f.免疫共沉淀 ③RNA与蛋白质相互作用：核糖体展示技术。

2012年硕士研究生入学考试试题

一、填空题

略

二、判断题

略

》

三、名词解释

1.半保留复制

双链DNA的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。分子p38 2.β-氧化

脂酰CoA进入线粒体基质后，在脂肪酸β-氧化酶系催化下进行氧化分解，由于氧化是在脂酰基的β-碳原子上的发生的，故称β-氧化。生化下p235 3.多聚离子脂质体

脂质体加上聚乙烯亚胺后，经过改造成的一种基因转运系统，具有极强的转染效率。 4.糖基化 。

糖基化是在酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程。生化下p535 endonuclease

性内切酶：识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。

聚合酶链式反应：是指通过模拟体内DNA复制方式在体外选择性地将DNA某个特定区域扩增出来的技术。

光合作用：即光能合成作用，是植物、藻类和某些细菌，在可见光的照射下，经过光反应和暗反应，利用光合色素，将二氧化碳（或硫化氢）和水转化为有机物，并释放出氧气（或氢气）的生化过程。 electrophoresis !

二维电泳：是将不同种类的蛋白质按照等电点和分子量差异进行高分辨率分离的方法。 cycle

尿素循环：又称为鸟氨酸循环，肝脏中2分子氨（1分子氨是游离的，1分子氨来自天冬氨酸）和1分子CO2生成1分子尿素的环式代谢途径。 dogma

中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制（如烟草花叶病毒等）和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程（某些致癌病毒）是对中心法则的补充。

四、简答题

1、糖蛋白中糖链的作用。 】

答：生化上p60

①参于肽链的折叠和缔合：维持亚基的正确构象；亚基间通过糖链相互识别而发生缔合。 ②参与糖蛋白的转运和分泌。 ③参与分子识别和细胞识别。

2、用放射素标记丙酮酸中的羧基C，图示经过一次三羧酸循环后在草酰乙酸中被标记的C原子。

3、影响酶反应速度的因素有哪些 答：生化上p355

影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。 】

其变化规律特点：

①酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比，如下图所示。

②底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎：成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著；当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。如下图所示。

③pH对酶促反应的影响：每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活性，超过这个范围酶就会失去活性。其特点如下图中曲线变化所示。在一定条件下，每一种酶在某一定PH时活力最大，这个pH称为这种酶的最适pH。 ④温度对酶促反应的影响：酶促反应在一定温度范围内反应速度随温度的升高而加快；但当温度升高到一定限度时，酶促反应速度不仅不再加快反而随着温度的升高而下降。在一定条件下，每一种酶在某一定温度时活力最大，这个温度称为这种酶的最适温度 ⑤激活剂对酶反应的影响。

4、如图是质粒琼脂糖凝胶电泳图，请你判断这三条条带分别对应共价闭合环开DNA、开环DNA和线性分子的哪一种

【

答：生化上p490

质粒DNA分子具有三种构型：共价闭合环开DNA（cccDNA,SC构型）、开环DNA（OC构型）和线性分子（L构型）。在细菌体内，质粒DNA是以负超螺旋构型存在的。在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同，但具有不同的电泳迁移率。其中跑在最前沿的是共价闭合DNA，其后依次是线性DNA和开环DNA,其原因是共价闭合的DNA其空间位阻最小，所以跑得最快。而开环DNA空间位阻最大，所以跑得最慢。 所以：上图条带从上往下依次是开环DNA、线性DNA和超螺旋DNA。 5、给出一段DNA序列的电泳图，据图读出DNA的顺序。

6、关于等电点的计算题。 7、化学渗透假说是什么

关于光合磷酸化的机理有多种学说，如中间产物学说、变构学说、化学渗透学说等，其中被广泛接受的是化学渗透学说。化学渗透学说的主要内容：

（1）呼吸链中的电子传递体在线粒体内膜中有着特定的不对称分布，递氢体和电子传递体是间隔交替排列的，催化反应是定向的。 |

（2）在电子传递过程中，复合物I，III和IV的传氢体起质子泵的作用，将H+从线粒体内膜基质侧定向地泵至内膜外侧空间将电子传给其后的电子传递体。

（3）线粒体内膜对质子具有不可自由透过的性质，泵到外侧的H+不能自由返回。结果形成内膜内外的电化学势梯度(由质子浓度差产生的电位梯度)。 （4）线粒体F1-F0-ATPase复合物能利用ATP水解能量将质子泵出内膜，但当存在足够高的跨膜质子电化学梯度时，强大的质子流通过F1-F0-ATPase进入线粒体基质时，释放的自由能推动ATP合成。

五、论述题

1、如何获得水母荧光蛋白GFP蛋白基因，请写出实验方案，过程，如何测定水母蛋白GFP三级结构。 答：

通过数据库查找该基因序列，据此设计引物，PCR扩增该基因，琼脂糖凝胶电泳检测，回收纯化DNA，测序验证后再比对数据库，如果序列正确就克隆了该基因。 |

设计实验表达蛋白质：将该基因连接到真核表达载体上，转化到酵母细胞里进行表达。（生化下p603）

提纯蛋白质：裂解酵母细胞壁，从裂解液中提取蛋白质。利用亲和层析的方法纯化蛋白质。（生化上p314）

研究蛋白质三维结构的方法：X-射线衍射法。此外，可以根据蛋白质的氨基酸序列用生物信息学的方法预测蛋白质的三维结构。

2013年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

receptor

chromatography

凝胶过滤层析：又称排阻层析或分子筛方法，主要根据蛋白质的大小和形状，即蛋白质的质量进行分离纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多事交联的聚糖类物质，使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离 【

unit

肽单位：又称肽基（peptide group），是肽链主链上的重复结构，由参与肽键形成的氮原子和碳原子和它们的四个取代成分：羰基氧原子，酰氯氢原子和两个相邻的α-碳原子组成的平面单位肽单位。 fragment

transcriptase 反转录酶

6.简并密码子 7.多顺反子 8.反式作用因子 】 9.信号肽 10.锌指

二、填空题

1.蛋白质三级结构中，极性残基在氨基酸分子表面，而非极性残基几乎都在分子内部。 分子中有转录功能的链叫模板链，无转录功能的链为编码链。 3.酶的竞争性抑制动力学特点是Vmax不变，而Km增加。 4.磺胺类药物是对氨基苯甲酸的拮抗物，可抑制细菌二氢叶酸的合成，青霉素是通过糖肽转肽酶的不可逆抑制起到抗菌作用。 %

5.原核生物的mRNA翻译的起始密码子除AUG外，还由位于起始密码子上游的SD序列决定。 6.酶的共价修饰最常见的是磷酸化（加速糖原分解），磷酸化可使糖原合酶的活性降低，使糖原磷酸化酶的活性增强。

7.实验室中常用的测定蛋白质相对分子质量的方法有凝胶过滤法、沉降分析法、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

8.丝氨酸蛋白酶家族中活性中心催化三联体包括Ser、His和Asp。 9.人体内两种主要环核苷酸是cAMP和cGMP。

10.多肽经胰蛋白酶作用降解后，新产生肽段羧基端氨基酸是Arg和Lys，蛋白质糖基化位点主要发生在Asn、Ser、Thr。

11.研究核酸和蛋白质相互作用的方法有凝胶滞缓实验、酵母单杂交、DnaseⅠ足迹法。 12.真核生物RNA聚合酶Ⅰ催化除5SrRNA以外的rRNA。RNA聚合酶Ⅱ的转录产物是mRNA %

13.在转录过程中，第一个进位的核苷通常是3-磷酸鸟苷或腺苷。

三、计算题

1、某酶的粗提取液经过亲和层析和纯化后，经实验室测得如下数据 总体积（ml） 总蛋白量（mg/ml） ~单位体积活力（IU/ml） 20 300 100 5 100 10 层析前 层析后 ·

求酶的纯化倍数；纯化后该酶的比活力；回收率

2、计算由400个氨基酸残基组成的某大肠杆菌蛋白质合成时需要消耗多少个高能磷酸键（计算时不考虑氨基酸合成、hrRNA、tRNA、核糖体合成时多需要的能量。请写出计算依据）

四、简答题

1、简要介绍两种分析基因表达的研究技术及原理。 答：

定点突变：是重组DNA进化的基础，通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列，适用于研究某些氨基酸残基对蛋白质结构催化活性及结合配体能力的影响。

Northern印记：是一种基于RNA-DNA杂交原理建立的一种RNA技术。RNA变性及电泳后，并转移到固相支持物上，用杂交反应来鉴定其中特定mRNA分子的含量及其大小。 ?

原位杂交：用常标记的核酸探针特异地与目标靶mRNA序列杂交，检测mRNA在细胞中的位置（或在组织中的）

RT-PCR（反转录PCR）：以mRNA为模板，体外扩增cDNA，再以cDNA为模板，进行特定基因转录产物PCR扩增，可用以RNA定性分析 2、简述影响酶催化效率的因素。

3、已知烟草花叶病毒是一种RNA病毒，感染烟草后，可使叶片出现花叶病斑，现有两个烟草花叶病毒A和B，A感染病毒可产生大病斑，B产生小病斑，根据这些异常设计实验证明该病毒的遗传物质是RNA而不是蛋白。 对照实验：第一组为烟草花叶病毒，第二组为烟草花叶病毒外壳，第三组为烟草花叶病毒RNA，分别去感染未感染烟叶病毒，结果第一和第三组感染，然后往培养皿中加入烟草花叶病毒和RNA酶，RNA酶酶解RNA后，病毒不再繁殖，即可证明使蛋白质对指导合成新的病毒不起作用。

4、可诱导操纵子与可阻遏操纵子有何区别 5、解释血红蛋白氧合曲线呈S型的原因。

6、简述一个基因可以产生多种蛋白质的机理及生物学意义。 、

答：

机理：基因编码产生的前体RNA是不同的，剪切产生不同的mRNA；同一个基因上有不同的读码框，常见于原核生物和病毒中；同一段基因上有不同的启动子，如果蝇的SXL基因在早期和晚期的表达。

意义：充分利用资源，使基因数目不至于太多，一个基因产生多个蛋白；在进化过程中形成适应性；对不同生命阶段的生命活动进行严格。

五、问答题

1、试述DNA分子克隆的步骤及原理。 2、试比较RNA的剪接与编辑有何异同点。

3、大肠杆菌生长在含有乳糖但不含葡萄糖的培养基中，如果发生下述情况，乳糖操纵子基因将会如何变化 $

（1）向培养基中添加葡萄糖；

（2）一个基因突变后使得CAP不能结合在启动子附近位点上； （3）透过酶基因失活突变。

答：操纵子失活；转录不能发生；葡萄糖不能进入细胞

4、什么是酶活性中心，酶活性中心有哪些特点，介绍两种研究酶活性中心的方法原理。

2014年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

1.等电聚焦 ，

一种高分辨率的蛋白质分离技术，它也可以用于蛋白质等电点的测定，从广义上说是一种自由界面电泳，具有不同等电点的两性电解质载体在电场中自动形成pH梯度，使被分离物移动至各自等电点的pH处，聚集成很窄的区带。介质可为具有pH梯度的蔗糖溶液。 2.结构域

多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成局部折叠区，它是相对的紧密球状实体，成为结构域。 3.核酶

Ribozyme:广义的核酶指具有催化作用的DNA和RNA，它能够通过催化靶位点RNA链中的磷酸二酯键的断裂，特异性剪切底物RNA分子，从而阻断基因表达

二、简答题

1、关于PCR的知识点。 、

2、氨基酸相互转化对蛋白质结构的影响。

蛋白质的结构和功能是由某些关键的氨基酸决定的。当这些氨基酸改变时，则蛋白质也发生相应的变化。但当一些意义不大的氨基酸被其他氨基酸取代时，蛋白质不一定能发生结构功能的变化。如血红蛋c（Hbc），β链中赖氨酸被谷氨酸取代，依旧能发挥血红蛋白作用，而血红蛋白Hbs却为镰刀状细胞。 3、酶曲线。

4、DNA变性和蛋白质变性的异同点。 异：

（1）破坏作用力不同：蛋白质变性破坏的是次级键，如氢键、盐键、范德华力，DNA变性破坏的是氢键；

（2）引起变性的因素不同：蛋白质变性的物理因素，如加热、紫外、高压、表面张力，化学因素如有机溶剂、重金属离子、酸碱等，DNA变性的因素有很多，如高温、酸碱、有机溶剂；

（3）现象不同：蛋白质变性是生物活性丧失，溶解度下降，粘度下降以及其他物理化学变化，DNA主要有增色效应，浮力密度升高，粘度升高； ！

（4）复性不同，蛋白质复性主要是除去变性因子，如恢复T，pH，DNA复性主要是变性双链核酸分子的重新结合。 同：

变性后形态结构会发生改变；变性后功能会受到很大程度影响

总结：蛋白质变性是蛋白质中次级键的断裂，从而引起天然构象的解体，但氢键结构中的共价键并没有受到破坏；DNA变性是核酸双螺旋区的氢键断裂变成单链，并不涉及共价键的断裂。

5、原核生物复制叉上有什么活动，需要什么酶

DNA聚合酶Ⅰ：同时具有3’—5’核酸外切酶活性和5’—3’核酸外切酶活性 DNA聚合酶Ⅱ：5’—3’聚合酶活性，主要起修复DNA作用

DNA聚合酶Ⅲ：既有5’—3’聚合酶活性，又有3’—5’外切酶活性，是复制中延长的主导聚合酶 ！

6、蛋白糖链的生物功能。

7、关于酶的分类，六种酶，要求会根据方程式判断。

三、论述题

1、血红蛋白与氧气结合分析，与BPG结合如何影响与氧气的亲和力 2、脂溶性激素与水溶性激素的信号转导有何差异

3、当大肠杆菌遇到氨基酸匮乏或紫外线照射有何机制 大肠杆菌氨基酸缺乏时会产生一个应急反应，产生鸟苷四磷酸和鸟苷五磷酸，主要功能是干扰RNA聚合酶与启动子结合的专一性，诱发细菌应急反应，帮助大肠杆菌杂不良环境条件下存活。 -

紫外照射：启动直接修复系统。

4、蛋白质一级结构测序的策略和步骤。

四、计算题

1、关于DNA长度、超螺旋的计算。 2、关于酶纯化倍数、回收率的计算。

2015年硕士研究生入学考试试题

。

一、名词解释

& confomation

构型：是一个分子中指院子特有的的固定空间排列，致使分子能以立体化学的形式区别开 构象：指一个分子中不改变共价键结构，仅单键周围的原子旋转所产生的原子的空间排布。一种构象改变为另一种构象不要求共价键的断裂和重新形成 domain & super-secondary stucture 结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成局部折叠区，它是相对的紧密球状实体

超二级结构域：由若干相邻的二级结构元件组合在一起，彼此相互作用形成种类不多的、有规则的二级结构组合或二级结构件，在多种蛋白质中充当三级结构的构件 effect & hyperchromic effect

别构效应：指寡聚蛋白与配基结合改变蛋白质的构象，导致蛋白质生物活性改变的效应 增色效应：因高分子结构的改变，而使摩尔吸光系数增大的现象 & ribosome

脂质体：是由包围水相空间的磷脂双层形成的囊泡（小泡）

核糖体：细胞中的一种细胞器，除脯氨酸、组氨酸，细胞内的一种核糖核蛋白颗粒，主要由RNA和蛋白质构成，功能是按MRNA的指令将AA合成蛋白质的多肽链 chaperon & molecular hybidization 分子伴侣：

分子杂交：不同的DNA与RNA可按照碱基互补配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程 & ARS

开放阅读框：是结构基因的正常核苷酸序列，其间不存在终止密码子，可编码完整的多肽链。从起始密码子到终止密码子的阅读框为顺式作用元件 自主复制序列：复制起始位点，真核细胞中发现的一类能启动DNA复制的序列，含有一个AT富集区

& semiconservative replication

转座：称为DNA的转座或移位，是由可移位因子介导的遗传物质的重排的现象 半保留复制：

mutation & nonsense mutation

移码突变：在正常的DNA分子中，一对或少数几对邻位的核苷酸的插入或替换，造成这一位置之后的一系列编码发生移位错误的改变 无义突变：在DNA序列中任何导致编码氨基酸的三联密码子转变为终止密码子（UAG/UGA/UAA）的突变，它使蛋白质的合成提前终止，合成无功能或无意义的肽 & operon

内含子：指存在于真核生物原始转录物或基因组DNA中，但不存在与成熟mRNA、rRNA、tRNA中的那部分核苷酸

操纵子：指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称，原核生物中一系列结构或功能相似的基因聚在一起形成转录的功能单位 finger & basic-reucine ziper

锌指：是许多转录因子所共有的DNA结合结构域，具有很强的保守性，在DNA结构域中含有

较多的半胱氨酸和组氨酸的区域，借台联的弯曲使2个半胱氨酸和2个组氨酸与一个锌离子，或4个半胱氨酸与一个锌离子结合形成一个形如指状的三级结构。 碱性亮氨酸拉链：存在于DNA结合部位和其他部位的一种结构基元，位于同一个或不同多肽链的两个两用型的α-螺旋的疏水面（常常含有亮氨酸残基）相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链。

二、填空题

1.天然淀粉一般含有两种组分：支链淀粉和直链淀粉，前者易溶于水，形成稳定的胶体，后者仅少量溶于热水。

2.由于细胞壁化学组成和结构不同将细菌分成两大类：能保留革兰氏染色的称革兰氏阳性菌，不能保留的称革兰氏阴性菌。

3.胞壁肽是一个含有四肽侧链的二糖单位，二糖单位由β-1,4糖苷键连接的 和 而成，四肽侧链的N端通过酰胺键与NAM残基上的乳酸基相连。

4.糖胺聚糖中结构最简单与其他糖胺聚糖有很大不同的是：透明质酸。

9c,12c9c,12c,15c

:2Δ指顺，顺-9,12-十八烯酸，18:3Δ指顺，顺，顺-9,12,15-三烯酸。

6.油脂的不饱和度通常用碘值来表示，在催化剂如Ni的存在下油脂中的双键与氢发生加成称氢化。

7. 、 为类固醇类化合物的核心结构；神经酰胺为鞘糖脂的核心化合物。

8.脂蛋白依密度增加为序可分为：乳糜微粒、极低密度脂蛋白、中间密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白。

9.在等电点以上的任一pH，氨基酸带负电，并因此在电场中向正极移动，在低于等电点的任一pH，氨基酸带正电，在电场中向负极移动。 10.有机磷化合物能抑制某些蛋白酶及脂酶活力，与酶分子活性部位的丝氨酸羟基共价结合，从而使酶失活。

11.在别构酶的协同效应中，当呈正协同效应时，动力学曲线为S型曲线；当呈负协同效应时，动力学曲线为双型曲线。

12.真核生物DNA序列大致上可被分为：不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。 13.与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码连或有意链，而另一条依据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链或反义链。

14.σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶的专一性识别模板上的启动子。

15. 调节基因的产物是 ，起着提高结构基因转录水平的作用； 调节的基因的产物是阻遏蛋白，起着阻止结构基因转录的作用。

三、简答题

1、真核生物的复制过程所需的组成成分及作用，并简述复制过程。 2、简述蛋白质测序的策略。

3、稳定蛋白质三维结构的非共价键。 4、血红蛋白的氧协同效应。

5、影响酶反应的因素有哪些，它们分别怎样影响酶反应 6、简述葡萄糖效应，并说明其产生机理。 7、简述真核生物染色体DNA的组装过程。 答：三级压缩

组蛋白H2A、H2B、H3、H4各两个组成八聚体核心，146bp的DNA缠绕其上形成圈，形成核

小体颗粒，两颗粒间经过60bp的DNA连接，出口和入口处再结合组蛋白H1作为稳定结构，经过不断连接，核小体颗粒形成外径10nm的纤维状串珠，为染色体一级结构。此一级结构在酶的作用下形成每圈6个核小体，外径60nm的螺旋结构，为染色体二级结构。螺旋结构再次螺旋化，形成超螺旋，为三级结构。超螺旋形成绊环，即线性的螺线管，形成的放射状环。绊环在非组蛋白上缠绕形成显微镜下可见的染色体结构。

8、根据所需分离的蛋白质分子大小，选择合适的分离方法对其分离，并说明理由。 答：

透析和超过滤：透析是利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖等分开，超过滤是利用压力或离心力强行使水和其他小分子溶质通过半透膜，而蛋白质被截留在膜上，以达到浓缩和脱盐的目的。 密度梯度离心：颗粒的沉降不仅取决于它的大小还取决于它的密度，如蛋白质在具有密度梯度的介质中离心时，质量和密度大的颗粒比质量和密度小的颗粒沉降的快，并且每种蛋白质颗粒沉降到与自身密度相等的介质密度梯度时即停止不前。 凝胶过滤：当不同分子大小的蛋白质流经凝胶层析柱时，比凝胶珠孔径大的分子不能进入珠内网状结构而被排阻在凝胶珠外，随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下移动，并最先流出柱外，而比凝胶珠孔径小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠内外。这样由于不同大小的分子所经的路径不同而被分离。

9、等效酸和等效碱的形成原理。

四、问答题

1、特定的酶切割特异性位点，给出八个特定的氨基酸肽链，问经过某个酶切后得到几个小片段氨基酸。

2、给出一张表，列出各种氨基酸的表达量，问哪些是必须氨基酸，哪些是非必须氨基酸，并说明理由。

3、生长激素对人体的作用方式。 生长激素为蛋白质，不同动物的生长激素相对分子质量不同，各种种属来源的生长激素具有一部分序列相同的肽段，这部分肽段与生物活性相关。生长激素功能广泛，它刺激肾及软骨的生长，促进粘多糖及胶原合成，它还能影响蛋白质、糖类、脂质的代谢，最终影响体重增长。幼年生长激素分泌不足则生长矮小，成为侏儒，但智力不受影响，若分泌过多，则成为畸形巨人，称巨人症。成年人若发生垂体机能亢进，因骨干不能对称生长，某一部分骨骼畸形长大，则患肢端肥大症，垂体活性过高还会引起高血糖及糖尿现象，这是因为生长素促进肾上腺皮质分泌糖皮质激素所致。饥饿时生长激素分泌增高，继而显示出血中葡糖的利用减少及脂肪利用的增高。

4、有关分子生物学中的核酸重组，要求画出所得的重组核酸类型。标出其中的间距（多少bp），说明哪一种是所需的重组核酸。 5、DNA转录过程，组成成分，转录特点。

2016年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

1.基因芯片 2.管家基因 3.启动子 4.亲和标记 5.别构调节 6.超二级结构

7.终止因子terminal factor 8.查可夫规则 即碱基互补原则

二、填空题

1.在 范围波长可以检测DNA

2.实验室常用的两种电泳方法： 和

三、计算题

1、缓冲液配置计算，判断氨基酸酸式盐的哪个羟基先解离，并写出解离方程式。 2、酶活力的简单计算。

四、简答题

1、从热力学方面解释球形蛋白在水相中的折叠过程。 2、什么是分子识别，并举例。

3、给一个表格，解释为什么结合了错误AA的AA-tRNA不能结合在核糖体上参与多肽链形成。

4、免疫球蛋白多样性的分子基础。 5、什么是G蛋白，有什么特点

6、写出几种突变修复类型，并选择一种详细说明。 7、一段基因的碱基发生突变，会出现哪些情况 答案主要是向无义突变，错义突变等上答

五、论述题

1、列举DNA修复的几种机制并对其中一种做出解释。

2、问在多肽链中插入四个核苷酸组成的序列会造成什么影响，若对多肽链进行单核苷酸缺失突变处理，能否消除这种影响，并分析原因。

3、什么是酶活中心，酶活中心的特点，通常包含哪些氨基酸残基

2017年硕士研究生入学考试试题

一、名词解释

filtration chromatography constant (Km)

fragment

modification mutation

二、填空题

1.请选出糖胺聚糖和还原糖。

A.蔗糖 B.麦芽糖 C.透明质酸 D.忘记了 E.淀粉

2.在pH等于7的溶液中电泳，赖氨酸和亮氨酸分别向哪极移动。 3.给出两个肽段，问哪个在280nm有较强吸光度。 4.胆固醇的核心结构是 ，极性头基团是 。 OD260/280为 表示纯DNA， 时表示纯RNA。

6.真核生物中多数转录因子都含有的两个结构域 和 。 7.基因编辑的三种常用技术： 、 、 。

8.在转录水平的中，原核生物以 负 为主，真核生物以 正 为主。 9.蛋白质构象数量受到最大的因素是 和 。 10.参与大肠杆菌DNA切除与修复的酶是 和 。

三、计算题

1、某二倍体生物，其单倍体基因组DNA有45000kb，碱基G含量为21%，计算每个细胞内DNA中A、T、C、G碱基数量。 2、计算天冬氨酸分别在，，，时主要离子形式所带的静电荷数。

3、根据以下实验结果，确定某一蛋白质分子的亚基组成和该蛋白实际相对分子质量。 （1）凝胶过滤后相对分子质量为200kDa；

（2）SDS-PAGE(不加β-巯基乙醇）相对分子质量为100kDa；

（3）SDS-PAGE(加β-巯基乙醇）相对分子质量为40kDa和60kDa两条带。

四、简答题

1、蛋白质分离纯化技术中哪些用到了蛋白质等电点性质

2、如何筛选含有重组质粒的阳性转化子，并说明原理（下面有张图，为puc18质粒）。 3、一个天然蛋白可以形成无规则结构吗即没有α螺旋、β螺旋等规律重复的二级结构。 4、解释下列糖类结构的生物学意义 （1）细胞表面糖蛋白的寡糖链； （2）糖胺聚糖的毛刷状结构； （3）糖原的分支结构；

（4）纤维素β-1,4-糖苷键及纤维素链之间氢键。 5、说明下列酶的抑制剂类型 （1）丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶； （2）磺胺抑制叶酸合成；

（3）农药乐果抑制乙酰胆碱酯酶； （4）碘乙酰胺抑制木瓜蛋白酶； （5）TPCK抑制胰凝乳蛋白酶。

6、何谓遗传密码简并性，其生物学意义是什么

7、原核生物在核糖体上形成一个肽键哪些步骤要消耗高能磷酸键

五、问答题

1、举例说明细胞级联放大系统如何放大原始信号，其生物学意义是什么

2、为什么高等生物选择DNA双链作为遗传信息载体，而不用单链DNA或者RNA

3、RNA病毒复制方式为什么单链正RNA病毒不需要携带依赖RNA的RNA聚合酶，而单链负RNA病毒需要携带依赖RNA的RNA聚合酶

4、比较原核生物和真核生物的mRNA、rRNA、tRNA转录后加工修饰的特点。