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常用培养基的配制

来源:意榕旅游网
附录三 常用培养基的制备

目 录

一、肉浸液肉汤 二、营养琼脂 三、鲜血琼脂

四、半固体培养基 五、明胶培养基

六、乳糖胆盐发酵培养基 七、乳糖发酵培养基 八、缓冲蛋白胨水(BP)

九、氯化镁孔雀绿增菌液(MM) 十、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB) 十一、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) 十二、GN增菌液

十三、肠道菌增菌肉汤 十四、HE琼脂 十五、SS琼脂 十六、麦康凯琼脂

十七、伊红美蓝琼脂(EMB) 十八、三糖铁琼脂(TSI) 一、肉浸液肉汤 (一)成份

十九、三糖铁琼脂(换用方法) 二十、血消化汤

二十一、克氏双糖铁琼脂(KI)

二十二、克氏双糖铁琼脂(换用方法) 二十三、动力硝酸盐增养基(A法)(SPS) 二十四、动力硝酸盐培养基(B法) 二十五、马丁氏肉汤 二十六、察氏培养基

二十七、马铃薯萄萄糖琼脂(PDA) 二十八、马铃薯琼脂

二十九、Elek氏培养基(毒索测定用) 三十、胰蛋白胨水

三十一、3.5%氯化钠三糖铁琼脂 三十二、牛肉(或中心)消化汤 三十三、0.1%蛋白胨水稀释剂

一、肉浸液肉汤

(一)成份

绞碎牛肉 500g 蛋白胨 10g 磷酸氢二钾 2g 氯化钠 5g

蒸馏水 1000 ml

(二)制法 将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000ml,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4~7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分。

(三)用途 一般细菌培养用。 二、营养琼脂 (一)成份

肉水 1000ml 蛋白胨 10g

磷酸氢二钾 1g 氯化钠 5g 琼脂 20~30g

(二)制法 先将琼脂剪碎,用冷水洗净后加入肉汤中,划线补充水分,加热溶化。校正pH7.4~7.6,用纱布夹棉花过滤至透明。分装中试管或三角瓶。高压灭菌121℃20分,灭菌后中试管摆成斜面。

(三)用途 一般细菌的分离培养,纯培养,观察菌落性状及保存菌种用。为特殊培养基的基础。

三、鲜血琼脂 (一)成份 营养琼脂

脱纤维鲜血(马、绵羊、牛、家兔)5~8%。 (二)制法 将灭菌的营养琼脂加热溶化,冷至45~50℃时,加入无菌脱纤维鲜血5~8%,分装试管,即摆成斜面或倾注平皿,待凝固后,置37℃培养1日,有污染者废弃,无菌者保存于冰箱备用。

无菌脱纤维鲜血:以无菌手术采取健康动物(马、绵羊、牛用颈静脉采血、家兔用心脏采血)血液,加到盛有玻璃殊的三角瓶内,摇匀5~10分钟,置冰箱中备用。

(三)用途 用于分离培养和保存菌种。 四、半固体培养基 (一)成份

肉汤培养基(pH7.4~pH7.6) 100 ml 琼脂 0.3g

(二)制法 将琼脂加入肉汤培养基中加热溶化,校正pH至7.6,滤过后分接于试管内,以15磅高压灭菌20~30分钟,作成高层,经无菌检查合格后,置冰箱中保存备用。

(三)用途 菌种保存,观察细菌的运动性。 五、明胶培养基 (一)成分

普通肉汤 100 ml 明胶 12~15g(冬天少用,夏天多用)

(二)制法 将上述成分加热溶化,校正pH至7.6,趁热过滤,分装试管,用8磅15

分钟灭菌或流通蒸气100℃,30分钟间歇,灭菌,经无菌检验合格的保存于冰箱内备用。

六、乳糖胆盐发酵培养基 (一)成份

蛋白胨 20g 猪胆盐(或牛、羊肠盐) 5g 乳糖 10g 0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml 蒸馏水 1000ml (二)制法 将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH7.4,加入指示剂,分装每管10ml,并先放入一个小例立的管,115℃高压灭菌15分钟。

注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。 七、乳糖发酵培养基 (一)成份

蛋白胨 20g 乳糖 10g

0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml 蒸馏水 1000ml (二)制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH7.4,加入指示剂,按检验要求分装30ml、10ml或3ml,并放入一个倒立的小管,115℃高压灭菌15分钟。

注:1、双料乳糖发酵除蒸馏水外,其他成分加倍。 2、30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。

八、缓冲蛋白胨水(BP) (一)成份

蛋白胨 10g 磷酸二氢钾 1.5g 磷酸氢二钠(Na2HPO4〃12H2O) 9g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 按上述成分称好后,装入大烧瓶,121℃高压灭菌15分钟。用时无菌分装,每瓶225ml。

注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。 九、氯化镁孔雀绿增菌液(MM) (一)成份 1.甲液:

胰蛋白胨 5g 氯化钠 8g

磷酸二氢钾 1.6g 蒸馏水 1000ml 2.乙液:

氯化镁(化学纯) 40g 蒸馏水 100ml 3.丙液: 0.4%孔雀绿水溶液

(二)制法分别按上述成分配好后,121℃高压,灭菌15分钟备用。临用时取甲液90ml、

乙液9ml、丙液0.9ml,以灭菌操作混合即可。

注:本培养基亦称Rappaprt10(R10)增菌液。 十、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB) (一)成份 1.基础培养基 肠胨 5g 胆盐 1g

碳酸钙 10g 硫代硫酸钠 30g

蒸馏水 1000 ml 2.碘溶液 碘 6g 碘化钾 5g 蒸馏水 20ml

(二)制法 将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100ml。分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀。121℃高压灭菌15分钟临用时每100ml基础培养基中加入碘溶液2ml、0.1%煌绿溶液1ml。

十一、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) (一)成份

蛋白胨 5g 乳糖 4g

亚硒酸氢钠 4g 磷酸二氢钾 5.5 g

磷酸二氢钾 4.5g L—胱氨酸 0.01g 蒸馏水 1000ml

1%L—胱氨酸—氢氨化钠溶液的配法:称取L—胱氨酸0.1g(或DL—胱氨酸0.2g),加1N氢氧化钠1.5ml,使溶解,再加入蒸馏水8.5ml即成。

(二)制法 将除亚硒酸氢钠和L—胱氨酸以外的各成份溶解于900ml蒸馏水中,加热煮沸,冷却后备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100ml蒸馏水中,加热煮沸,冷却后以无菌操作与上液混合。再加入1%L—胱氨酸—氢氧化钠溶液1ml。分装于灭菌瓶中,每瓶100ml,pH应为7.0±0.1。

十二、GN增菌液 (一)成份

胰蛋白胨 20g 葡萄糖 1g

甘露醇 2g 柠檬酸钠 5g

去氧胆酸钠 0.5g 磷酸氢二钾 4g 磷酸二氢钾 1.5g

氯化钠 5g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 按上述成分配好,加热使溶解,校正pH7.0。分装每瓶225ml,115℃高压灭

菌15分钟。

十三、肠道菌增菌肉汤 (一)成份

蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 牛胆盐 20g 磷酸氢二钠 8g 磷酸二氢钾 2g 煌绿 0.015g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 按上述成分配好,加热使溶解,校正pH7.2。分装每瓶30ml,115℃高压灭菌15分钟。

十四、HE琼脂 (一)成份 1. 基础液: 肘胨 12g 牛肉膏 3g 乳糖 12g 蔗糖 12g 水杨苷 2g 胆盐 20g 氯化钠 5g 琼脂 10g~20g 0.4%溴 香酚蓝溶液 16ml 蒸馏水 1000ml 2. Andrade指示剂:

酸性复红 0.5g 1N氢氧化钢溶液 16ml 蒸馏水 100ml

将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液,数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2ml。 3. 甲液:

硫代硫酸钠 34g 柠檬酸铁铵 4g 蒸馏水 100ml 4. 乙液:

去氧胆酸钠 10g

蒸馏水 100ml

(二)制法 将前面八种成分溶解于400ml蒸馏水内作为基础液,将琼脂加入于600ml蒸馏水内,加热溶解。加入甲液20ml和乙液20ml于基础液内,校正pH7.5。再加入Andrade指示剂20ml,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板。

注:此培养基不可高压灭菌

十五、SS琼脂

(一)成份 1.基础培养基

牛肉膏 5g 肘胨 5g 三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000ml

制法:将牛肉膏、肘胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中,将琼脂加入于600ml蒸馏水中,煮沸使其溶解,再将二液混合,121℃高压灭菌15分钟,保存备用。

2.完全培养基

基础培养基 1000ml 乳糖 10g

柠檬酸钠 8.5g 硫代硫酸钠 8.5g

10%柠檬酸铁溶液 10ml 1%中性红溶液 2.5ml 0.1%煌绿溶液 0.22ml 制法:加热溶化培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。

注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48小时内使用。

②煌绿溶液配好后应在10天以内使用。 ③可以购用SS琼脂的干燥培养基。 十六、麦康凯琼脂 (一)成份

蛋白胨 17g 肘胨 3g

猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g 氯化钠 5g 琼脂 17g 乳糖 10g 0.01%结晶紫水溶液 10ml 0.5%中性红水溶液 5ml 蒸馏水 1000ml (二)制法

1.将蛋白胨、肘胨、胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中,校正至pH7.2。将琼脂加入于600ml蒸馏水中,加热溶解。将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高灭菌15分钟备用。

2.临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖。冷至50~55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板。

注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。 十七、伊红美蓝琼脂(EMB) (一)成份

蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g

琼脂 17g 2%伊红y溶液 20ml 0.65%美蓝溶液 10ml 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH7.1,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15分钟备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。

十八、三糖铁琼脂 (一)成份

蛋白胨 20g 牛肉膏 5g 乳糖 10g 蔗糖 10g

葡萄糖 1g 氯化钠 5g 硫酸亚铁铵[Fe(NH4)2(SO4)2〃6H2O] 0.2g 硫代硫酸钠 0.2g 酚红 0.025g 琼脂 12g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将除琼脂和酚红以外的各成份溶解于蒸馏水中,pH7.4。加入琼脂,加热煮沸,以融化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15分钟。放置高层斜面备用。

十九、三糖铁琼脂(换用方法) (一)成份

蛋白胨 15g 肘胨 5g

牛肉膏 3g 酵母膏 3g 乳糖 10g 蔗糖 10g

葡萄糖 1g 氯化钠 5g

硫酸亚铁 0.2g 疏代硫酸钠 0.3g 琼脂 12g 酚红 0.025g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中校正pH7.4。加入琼脂,加热煮沸,以融化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15分钟,放置高层斜面备用。

二十、血消化汤 (一)成份

绞碎猪胃 100g

绞碎猪血块 100g 磷酸二氢钾 1g 2N碳酸钠溶液 50ml 浓盐酸 10ml 蒸馏水 1000ml (二)制法

1.洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机续碎。 2.用绞肉机将猪血块绞碎。

3.将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃、猪血块和盐酸,置55℃水浴中24小时,常加以摇动。

4.从水浴锅内取出,加入2N碳酸钠液5ml,煮沸10分钟,置于冰箱内一夜。

5.吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入2N碳酸钠溶液45ml,煮沸,校正pH7.2~7.4。

6.用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20分钟。

注:①本培养基不含糖可供作鉴别培养基的基础,不需加蛋白胨和氯化钠。 ②2N碳酸钠溶液的配法:无水碳酸钠10.6g,溶于1000ml蒸馏水中。 二十一、克氏双糖铁琼脂(KI) (一)成份 下层:

血消化汤(pH7.6) 500ml 琼脂 2g

葡萄糖 1g 0.2%酚红溶液 5ml 上层:

血消化汤(pH7.6) 500ml 琼脂 6.5g

硫代硫酸钠 0.1g 硫酸亚铁按 0.1g 乳糖 5g 0.2%酚红溶液 5ml (二)制法

1.取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别装入琼脂,加热溶解。

2.分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌试管内,(12×100mm),每管约2ml。10磅高压灭菌15分钟。

3.将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固。 4.俟下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5ml,放成斜面。

二十二、克氏双糖铁琼脂(换用方法) (一)成份

蛋白胨 20g 牛肉膏 3g

酵母膏 3g 乳糖 10g

葡萄糖 1g

氯化钠 5g

柠檬酸铁铵 0.5g 疏代硫酸钠 0.5g 琼脂 12g 酚红 0.025g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH7.4。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层。121℃高压灭菌15分钟。放置高层斜面备用。

二十三、动力—硝酸盐培养基(A法) (一)成份

蛋白胨 5g 牛肉膏 3g

硝酸钾 1g 琼脂 3g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 加热溶解,校正pH7.0。分装试管,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟。 二十四、动力—硝酸盐培养基(B法) (一)成份

蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 硝酸钾 5g 磷酸氢二钠 2.5g 半乳糖 5g 甘油 5g 琼脂 3g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将上各成份混合,加热溶解,校正pH7.4。分别装试管,121℃高压灭菌15分钟。

二十五、马丁氏肉汤 (一)成份

猪胃 数个 过滤清水(普通水) 150ml 纯盐酸 15ml (二)制法

取猪胃去掉筋膜及脂肪,以绞肉机绞碎,每300g猪胃加盐酸15ml,过滤水150ml,于50℃消化24小时(每小时搅拌1~2次),取出后加热至80℃,使消化作用停止,并用NaOH中和,调PH至7.2,用滤纸过滤,分装试管或小三角烧瓶,15磅高压15分钟灭菌。

二十六、察氏培养基 (一)成份

硝酸钠 3g 磷酸氢二押 1g

梳酸镁(MgSO4〃7H2O) 0.5g 氯化钾 0.5g

硫酸亚铁 0.01g

蔗糖 30g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml (二)制法 加热溶解,分装后121℃灭菌20分钟。 (三)用途 青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。 二十七、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) (一)成份

马铃薯(去皮切块) 300g 葡萄糖 20g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将马铃薯去皮切块,加1000ml蒸馏水,煮沸10~20分钟。用纱布过滤加蒸馏水至1000ml。加入葡萄糖和琼脂,加热溶化,分装,121℃高压灭菌20分钟。

(三)用途:分离培养霉菌。 二十八、马铃薯琼脂 (一)成份

马铃薯(去皮切块) 200g 琼脂 20g

蒸馏水 1000ml (二)制法 同马铃薯葡萄糖琼脂。 (三)用途 鉴定霉菌用。

二十九、Elek氏培养基(毒素测定用) (一)成份 肘胨 20g 麦芽糖 3g 乳糖 0.7g 氯化钠 5g 琼脂 15g 40%氢氧化钠溶液 1.5ml 蒸馏水 1000ml

(二)制法 用500ml蒸馏水溶解除琼脂外的成份,煮沸,并用滤纸过滤。用1N氢氧化钠校正pH7.8。用另外500ml蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合,分装试管10ml或20ml。121℃

高压灭菌15分钟。临用时加热溶化琼脂倾注平板。 三十、胰蛋白胨水 (一)成份

胰蛋白胨 10g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 将上述成份溶解,校正pH7.0。分装试管,121℃高压灭菌15分钟。 三十一、3.5%氯化钠三糖铁琼脂 (一)成份

三糖铁琼脂 1000ml 氯化钠 30g

(二)制法 按本附录十八或十九配制三糖铁琼脂,再加入氯化钠30g,分装试管,121℃高压灭菌15分钟。放置高层斜面备用。

三十二、牛肉(或牛心)消化汤 (一)成份

绞碎牛肉(或牛心) 1000g 15%氢氧化钠溶液 27ml 胰蛋白酶 40ml 氯仿 1ml

氯化钠 10g 蒸馏水 200ml (二)制法

1.称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15分钟; 2.加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷却至40℃;

3.加胰蛋白酶、氯仿,在36±1℃放置4~5小时,每小时摇动一、二次; 4.4小时后,吸取上层液5ml于试管中,加1%硫酸铜溶液0.1ml、4%氢氧化钠溶液5ml,混合之。若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出;

5.加入15%乙酸溶液45ml,对pH试纸呈酸性;

6.煮沸15分钟,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜;

7.次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸;

8.校正pH7.0~7.6(加15%氢氧化钠液约10ml)加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20分钟。

注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需要加蛋白胨。

②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500ml,蒸馏水1500ml,混合之,装入玻塞瓶内。

每日摇匀三次,三天后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用。 三十三、0.1%蛋白胨水稀释剂 (一)成份

蛋白胨 1g 蒸馏水 1000ml

(二)制法 溶解蛋白胨于蒸馏水中,校正pH至7.0,121℃灭菌15分钟。

Yeast extract 3 酵母膏 Malt extract 3 Peptone from soybeans 5 Glucose 10 Agar 15 Distilled water 1000

MA medium (Ichimura,1979)

Working solution

NaNO3 KNO3

Ca(NO3)2〃4H2O Na2SO4 MgCl2.6H2O Β

-Sodiumglycerophosphate Na2EDTA FeCl3.6H2O MnCl2.4H2O ZnCl2 CoCl2 .6H2O Na2MoO4.2H2O H3BO3 Bicine Distilled water pH

F/2培养基 A:NaNO3 B:NaH2PO4〃H2O C:Na2SiO3 〃9H2O D:Na2EDTA E:FeCl3 〃6H2O F:CuSO4 〃5H2O ZnSO4 〃7H2O CoCl2〃6H2O MnCl〃4H2O Na2MO4〃 2H2O G:B1 B12 生物素 H:海盐

[g/l] 0.05 0.1 0.05 0.04 0.05 0.1 0.005 0.0005 0.005 0.0005 0.005 0.0008 0.02 0.5 1000ml 8.6

WORK(mg/L) 75 5 20 4.36 3.16 0.01 0.023 0.012 0.18 0.07 0.1ug/L 0.5ug/L 0.5ug/L 24g/L Mother(g/L) 75 5 20 4.36 3.16 0.01 0.023 0.012 0.18 0.07 0.1mg/L 0.5mg/L 0.5mg/L 对于藻体的高密度培养,将F/2培养基的A改为乙酸铵:0.5g/L,B改为NaH2PO4:0.2g/L

SE Medium

Working solution (g/l)

NaNO3 K2HPO4 . 3H2O MgSO4 . 7H2O CaCl2 . 2H2O KH2PO4 NaCl Soil extract * FeCl3〃6H2O Fe—EDTA A5 solution *

0.25g 0.075g 0.075g 0.025g 0.175g 0.025 40ml 0.005 1ml 1

distilled water 958

Soil Extract(土壤提取液)配置方法

取花园土未施过肥0。5kg置于烧杯或三角瓶中,加入蒸馏水1000毫升,瓶口用透气塞封口,在水浴中沸水加热2小时,冷却数小时,在无菌条件下过滤,取上清液,将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升。土壤提取液保存在4ºC备用。 * Composition of the A5 solution Add to 100 ml of distilled water:

H3BO3 MnCl2 . 4H2O ZnSO4 . 7H2O CuSO4 . 5 H2O Na2MoO4〃2H2O (NH4)6Mo7O24 . 4H2O

286 mg 181 mg 22 mg 7.9 mg 39mg 3.9 mg

EDTA-Fe的配置方法:

将EDTA和FeCl3〃6H2O分别溶于水和HCl(0.1N),混匀即可。

Na2EDTA 1g distilled water FeCl3〃6H2O HCl(0.1N)

50ml 81 mg 50ml

微量元素溶液 A5 是BG-11培养基微量元素的重要组成部分。

BG-11是培养蓝藻使用最广泛的培养基,除了极少数蓝藻,大部分都可以用BG-11培养基。

A5微量溶液组成成分

Add to 1000 ml of distilled water:

将以下物质称量并定容至1000ml

H3BO3 …………………………………………2.86g MnCl2 ·H2O …………………………………1.81g ZnSO4 ·7H2O ………………………………0.222g CuSO4 ·5 H2O ………………………………0.079g Na2MoO4 ·2H2O……………………………0.390g Co(NO3)2 ·6H2O ………………………… 0.049g

BBM培养基 BBM Medium(雨生红球藻生长最好的培养基(若要用于虾青素积累要加0.25g/L的乙酸钠))

Component Amount Stock Solution

(1) NaNO3 1 mL/L 25 g/100mldH2O (2) K2HPO4 1 mL/L 7.5 g/100 mL dH2O (3) MgSO4·7H2O 1 mL/L 7.5 g/100 mL dH2O (4 )CaCl2·2H2O 1 mL/L 2.5 g/100 mL dH2O (5 ) KH2PO4 1 mL/L 17.5 g/100 mL dH2O (6 ) NaCl 1mL/L 2.5g/100ml dH2O (7 ) B1 1mg/L (8) biotin 0.25ug/L (9) B12 0.15ug/L

(10) PIV ( Trace mental solution ) 1ml/L Na2EDTA 0.75g/L dH2O MnCl2·4H2O 0.041g/L dH2O ZnCl2·7H2O 0.005g/L dH2O Na2MoO4·2H2O 0.004g/L dH2O FeCl3·6 H2O 0.097g/L dH2O CoCl2.6 H2O 0.002g/L dH2O

BG11 ( Blue-Green Medium)

Component Amount Stock Solution (1) NaNO3 100 mL/L 15.0 g/L dH2O (2) K2HPO4 10 mL/L 2 g/500 mL dH2O (3) MgSO4·7H2O 10 mL/L 3.75 g/500 mLdH2O (4 ) CaCl2·2H2O 10 mL/L 1.8 g/500 mL dH2O (5 ) Citric acid 10 mL/L 0.3 g/500 mL dH2O (6 )Ferric ammonium citrate 10 mL/L 0.3g/500ml dH2O (7 ) EDTANa2 10 mL/L 0.05g/500ml dH2O (8) Na2CO3 10 mL/L 1.0g/500ml dH2O (9) A5 (Trace mental solution )1ml/L

H3BO3 2.86g/L dH2O MnCl2·4H2O 1.86g/L dH2O ZnSO4·7H2O 0.22g/L dH2O Na2MoO4.2H2O 0.39g/L dH2O CuSO4. 5 H2O 0.08g/L dH2O Co(NO3)2.6 H2O 0.05g/L dH2O

Adjust PH to 7.1 with 1M NaOH or HCl

JM培养基

Component Amount(mg/L) (1) NaNO3 1500 (2)Ca(NO3)2·4H2O 20 (3) KH2PO4 12.4 (4 ) Na2HPO4 ·12 H2O 36 (5 ) Na2HCO3 15.9 (6 ) MgSO4·7H2O 50 (7 ) H3B03 2.48 (8) Na2一EDTA 2.25 (9) NaFeEDTA 2.25 (10) (NH4)6MoO24·4H2O 1.0 (11) Cyanocobalami 0.04 (12) ThiamineHCI 0.04 (13) Biotin 0.04

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