1、（2013 全国课标卷 Ι）回答下列有关泡菜制作的习题：
（1） 制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是
。为了缩短制作时间，有人还会 的过程。、
和
等。 。 。
在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是
（2） 泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行
该过程发生在乳酸菌的 中。
（3） 泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有
（4） 从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他
杂菌的消长规律是 ，原因是：
2、（2013 全国课标卷Ⅱ） 临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题：
（1） 为了从样本中获取致病菌菌落，可用
法或 法将样本借种于固体培
养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2） 取该单菌落适当稀释，用
_法接种于固体培养基表面，在 37℃培养箱中培养 24h，
使其均匀生长，布满平板。
（3） 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有 A，B，C，D 四种抗生素的滤纸片均匀置
于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A ；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 B
_。
。
；含 C 的滤纸片周围的透
明圈比含 A 的小，说明 此菌落很可能是抗生素 D 的
含 D 的滤纸片周围的透明圈也比含 A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，
（4） 根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素
3、（2014 新课标Ⅱ卷）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量， 并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1） 该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平
板先行培养了一段时间，这样做的目的是 和 37。据此可得出每升水样中的活菌数为
。
；然后，将 1mL 水样稀释 100 倍，
在 3 个平板上用涂布法分别接入 0.1mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为 39、38
（2） 该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过
灭菌，在第二次及
以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的 是
。
表示的是用稀释涂布平板法接种培
（3） 示意图 A 和 B 中，
养后得到的结果。
（4） 该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培
1
养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是： 振荡培养能提高培养液的 的利用率。
4、（2014 新课标Ⅰ卷）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1） 分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由 3 种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖
的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高
苷酶可将 分解成 。
色复合物。用含有 CR
。
（2） 在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR 可与纤维素形成
的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 （ 成分见下表）：
培 养 基 甲 培 养 基 乙 （3） 为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基
酵母膏 无机盐 淀粉 + + + + + + 纤 维 素 琼脂 CR 溶液 水 粉 + - - + + + + +
注：“+”表示有，“－”表示无。 据表判断， 培养基甲 是 原因是
；
（ 填“能”或“不能”） 用于分离和鉴别纤维素分解菌， 原因
（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，
；培养基乙
5、 (2016全国卷II) 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：
（1） 酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞
的
中进行，其产物乙醇与
。
试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇
的检验；过程③在酵母菌细胞的 中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度
（2） 第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼
吸作用类型，该过程需要在 或“高于”）第二阶段。
（4） 醋酸杆菌属于
条件下才能完成。
（填“低于”
（3） 在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度
核生物，其细胞结构中（填“含有”或“不含有”）线粒体。
6、(2016 全国卷 III)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
（1） 分离纯化乳酸菌时，首先需要用
对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的
和
。
理由是
。
2
（2） 推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有
分离纯化时应挑选出 油”或“碳酸钙”）。
的菌落作为候选菌。
（填“蒸馏水”、“甘
（3） 乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的
7、(2016 全国卷Ι)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下： ① 配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、 NaCl 、X 、H2O ）； ② 制作无菌平板；
③ 设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④ 将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：
（1） 该培养基中微生物所需的氮来源于
。若要完成步骤②，该培养基中的成分X 通常是
。
。
（2） 步骤③中，实验组的操作是
（3） 若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为 36 个/平板，而空白对照组的一个平板上出
现了 6 个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了 的平均值，该做法 现象。若将 30 个/平板作为本组菌落数
（填“正确”或“不正确”）。
8、（2017•新课标Ⅰ卷）某些土壤细菌可将尿素分解成 CO2 和 NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：
（1） 有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生
。能分
解尿素的细菌不能以尿素的分解产物 CO2 作为碳源，原因是 糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是
（2） 为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择
，但可用葡萄（填“尿素”
（答出两点即可）。。
（答出两点即可）。
“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是
（3） 用来筛选分解尿素细菌的培养基含有 KH2PO4 和 Na2 HPO4，其作用有
9、（2017•新课标Ⅱ卷）豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素， 某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的 A、B 两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在 32 h 内定期取样观测发酵效果。回答下列问题： （1）该实验的自变量是 。
。
、
。
（ 2） 如 果 发 现 发 酵 容 器 内 上 层 大 豆 的 发 酵 效 果 比 底 层 的 好 ， 说 明 该 发 酵 菌 是
（3） 如果在实验后，发现 32 h 内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定
发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是
（ 4） 从 大 豆 到 豆 豉 ， 大 豆 中 的 成 分 会 发 生 一 定 的 变 化 ， 其 中 ， 蛋 白 质 转 变 为
3
，脂肪转变为
（1） 限制性内切酶切割 DNA 分子后产生的片段，其末端类型有
。 和
。
10.（2012 全国卷 1） 根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（2） 质粒运载体用 EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的 DNA 除可用 EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 采用
DNA 连接酶。
（4） 反转录作用的模板是
。
DNA 连接酶和
（3） 按其来源不同，基因工程中使用的 DNA 连接酶有两类，即
，产物是 和
。若要在体外获得大量反转录产物，常也可作运载体。
技术。
（5） 基因工程中除质粒外，
（6） 若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，
原因是 。
11. 真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内
含子对应的RNA 序列的机制。已知在人体中基因 A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题：(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因 A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋 白 A，其原因是 。
(2) 若用家蚕作为表达基因 A 的载体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用 作为载体，其原因是
。
(3) 若要高效地获得蛋白 A，可选用大肠杆菌作为受体，因为与家蚕相比，大肠杆菌具有
(答出两点即可)等优点。
(填“蛋白 A 的基因”
(4) 若要检测基因 A 是否翻译出蛋白 A，可用的检测物质是
或“蛋白 A 的抗体”)。
(5) 艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明 DNA 是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是
。
12. 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基
因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
(1) 在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实
验材料，原因是 是 。
。提取 RNA 时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的
。
4
(2) 以 mRNA 为材料可以获得 cDNA，其原理是
(3) 若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原
因是 (答出两点即可)。
。
(4) 当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA 连接酶催化形成的化学键
(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是
。
13. 某一质粒载体如图所示，外源 DNA 分子插入到 Ampr 或 Tetr 中会导致相应的基因失活（Ampr 表示
氨苄青霉素抗性基因，Tetr 表示四环素抗性基因）．有人将此质粒载体用 BamH I 酶切后，与用 BamHI 酶切获得的目的基因混合，加入 DNA 连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌．结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化．被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌．回答下列问题：
（1） 质粒载体作为基因工程的工具， 应具备的基本条件有：
动子和终止子．
（2） 如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆
菌 细 胞 中 ， 未 被 转 化 的 和 仅 含 环状 目 的 基 因 的 细 胞 不 能 区 分 的 ， 其 原 因 是
（答出两点即
可）．而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启
的
固体培养基．
细
胞
也
是
；并且 不
能
区
分
的
和 ，
其
原
因
．在上述筛选的基础上，若要筛选含
的
是
有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有
（3） 基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其 DNA 复制所需的原料来自于
．
14. 图（a）中的三个 DNA 片段上以此表示出了 EcoRI、BamHI 和 Sau3AI
三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图（载体上的 EcoRI、Sau3AI 的切点是唯一的）
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1） 经 BamHI 酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被
酶切后的产物连接，理由是 ．
（2） 若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三
种含有目的基因的重组子，如图（c）所示．这三种重组子中，不 能 在 宿 主 细 胞 中 表 达 目 的 基 因 产 物 的 有
，不能表达的原因是
．
5
（3） DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的有 和 ．
，其
中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
15. 在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割
掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段 C 后，产生 A、B 两条肽链，再经酶丙作用生成由 51 个氨基酸残基组成的胰岛素。目前，利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题：
（1） 人体内合成前胰岛素原的细胞是
，合成胰高血糖素的细胞是 。
（2） 可根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的 序列，用该序列与质粒
表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成
的基因工程菌。
中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为
（3） 用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，则
用该工程菌进行工业发酵时，应从 胰岛素。
16. 下图是某细菌的基因 导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。
（1） 获得基因 有两种途径：一是以 的
合成互补的单链
，然后在
为模板，在 的
酶的催化下，
的作用下合成双链
，从而获得所需
序列，
基因；二是根据目标蛋白质的 然后按照碱基互补配对原则，根据其
（2） 利用
序列，推测出相应的
序列，再通过化学方法合成所需基因。
、
扩增仪中完
技术扩增 时，需要在反应体系中添加的有机物质有
聚合酶，扩增过程可以在
成。
、4 种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的
（3） 由 和载体 拼接形成的 通常称为 。
。
（4） 在基因工程中，常用
处理 ，其目的是
6
限时训练 43 答案
1、（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量 （2）无氧呼吸 细胞质 （3）温度、食盐用量、腌制时间 （4）乳酸菌数量增加，
杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸 2、（1）划线
稀释涂布（或涂布）
（2）涂布
（3）敏感 不敏感 该致病菌对 C 的敏感性比对 A 弱
耐药菌 （4）A
3、（1）检测培养基平板灭菌是否合格
（2） 灼烧；
7
3.8×10
将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 ⑷、溶解氧
营养物质
（3）B
4、（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈
（3） 不能 液体培养基不能分离单菌落
不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成 CR-纤维素红色复合物，即
使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 5、（1）细胞质基质 （3）低于 （4）原 6、（1）无菌水 成单个的菌落
（2） 中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸 （3） 甘油
重铬酸甲 不含有
线粒体 快 （2）有氧
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形
利于乳酸菌的识别和分离 在平板上有溶钙圈
7、(1) 牛肉膏和蛋白胨 琼脂；(2) 将平板开盖在不同高度下放置适当且相同时间，每组均设置相同个数的多个平板； (3) （微生物）污染 不正确 8、（1）脲酶
分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用 CO2 来合成有机物
为细胞生物生命活动提
供能量，为其他有机物的合成提供原料
（2） 尿素 其他两组都含有 NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3，不能起到筛
选作用
（3） 为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中 pH 稳定
9、（1）菌种
（2） 好氧菌
发酵时间
（3） 延长发酵时间，观测发酵效果，最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间 （4） 氨基酸和肽
脂肪酸和甘油
10.（1）黏性末端 平末端
（2） 切割产生的 DNA 片段末端与 EcoRⅠ切割产生的相同 （3） 大肠杆菌 T4
cDNA（或 DNA） PCR
（4） mRNA（或 RNA） （5） 噬菌体
动植物病毒
7
（6） 未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源 DNA）的能力极弱
11.(1)基因 A 的编码区中内含子和外显子，在真核生物细胞内把内含子转录来的 RNA 切除，而原核生物细胞内基因转录后不切除，直接表达。
(2) 噬菌体 噬菌体是细菌病毒，专门寄生在细菌体内，而家蚕是真核生物
(3) 繁殖快 易培养 产物含量高 产物易分离等
(4) 蛋白 A 的抗体
(5) 不仅证明了生物的遗传物质是 DNA，还证明了 DNA 可以从一种生物转移到另一种生物个体。
12. (1)基因表达强烈，相应 mRNA 多抑制 RNA 被水解
(2)逆转录过程的碱基互补配对
(3)目的基因因缺少相应的启动子和终止子，缺少复制原点(4)磷酸二酯键
(5)转录和翻译过程受影响
13.（1）能自我复制、具有标记基因
（2） 二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长
含有质粒载体 含有插入了目的基因的
四环素
重组质粒（或答含有重组质粒）
（3） 受体细胞
二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长
14.（1） Sau3AⅠ；两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端（2）甲和丙；甲中目的基因插入在启动子的上游， 丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录（3） E•coliDNA 连接酶；T4DNA 连接酶；T4DNA 连接酶
15.（1）胰岛 B 细胞；胰岛 A 细胞
（2） DNA；胰岛素原 （3） 菌体
16.（1）逆转录酶
（2） 引物 模板 （3） 基因表达载体
聚合酶 氨基酸 脱氧核苷酸
（4） 使其成为感受态细胞，有利于吸收重组 分子
8
限时训练 43 答题纸
1、（1） （2） （3）
稀释涂布（或涂布）
（2）涂布
（3）
、
（3）敏感 不敏感 该致病菌对 C 的敏感性比对 A 弱
、
2、（1）划线
耐药菌 （4）A
3、（1）检测培养基平板灭菌是否合格
（2） 灼烧；
7
3.8×10
将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 ⑷、溶解氧
营养物质
（3）B
4、（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈
（3） 不能 液体培养基不能分离单菌落
不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成 CR-纤维素红色复合物，即
使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 5、（1）细胞质基质 （3）低于 （4）原 6、（1）无菌水 成单个的菌落
（2） 中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸 （3） 甘油
重铬酸甲 不含有
线粒体 快 （2）有氧
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形
利于乳酸菌的识别和分离 在平板上有溶钙圈
7、(1) 牛肉膏和蛋白胨 琼脂；(2) 将平板开盖在不同高度下放置适当且相同时间，每组均设置相同个数的多个平板； (3) （微生物）污染 不正确 8、（1）脲酶
分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用 CO2 来合成有机物
为细胞生物生命活动提
供能量，为其他有机物的合成提供原料
（2） 尿素 其他两组都含有 NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3，不能起到筛
选作用
（3） 为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中 pH 稳定
9、（1）菌种
（2） 好氧菌
发酵时间
（3） 延长发酵时间，观测发酵效果，最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间 （4） 氨基酸和肽
脂肪酸和甘油
10.（1）黏性末端 平末端
（2） 切割产生的 DNA 片段末端与 EcoRⅠ切割产生的相同 （3） 大肠杆菌 T4
cDNA（或 DNA） PCR
9
（4） mRNA（或 RNA）
（5） 噬菌体 动植物病毒
（6） 未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源 DNA）的能力极弱
11.(1)基因 A 的编码区中内含子和外显子，在真核生物细胞内把内含子转录来的 RNA 切除，而原核生物细胞内基因转录后不切除，直接表达。
(2) 噬菌体 噬菌体是细菌病毒，专门寄生在细菌体内，而家蚕是真核生物
(3) 繁殖快 易培养 产物含量高 产物易分离等
(4) 蛋白 A 的抗体
(5) 不仅证明了生物的遗传物质是 DNA，还证明了 DNA 可以从一种生物转移到另一种生物个体。
12. (1)基因表达强烈，相应 mRNA 多抑制 RNA 被水解
(2)逆转录过程的碱基互补配对
(3)目的基因因缺少相应的启动子和终止子，缺少复制原点(4)磷酸二酯键
(5)转录和翻译过程受影响
13.（1）能自我复制、具有标记基因
（2） 二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长
含有质粒载体 含有插入了目的基因的
四环素
重组质粒（或答含有重组质粒）
（3） 受体细胞
二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长
14.（1） Sau3AⅠ；两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端（2）甲和丙；甲中目的基因插入在启动子的上游， 丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录（3） E•coliDNA 连接酶；T4DNA 连接酶；T4DNA 连接酶
15.（1）胰岛 B 细胞；胰岛 A 细胞
（2） DNA；胰岛素原 （3） 菌体
16.（1）逆转录酶
（2） 引物 模板 （3） 基因表达载体
聚合酶 氨基酸 脱氧核苷酸
（4） 使其成为感受态细胞，有利于吸收重组 分子
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