分析与检测母乳中的乳酸菌含量研究□ 冯秋芳 吴芳媛 林 黎 湖州市食品药品检验研究院摘 要：母乳是产妇分娩后为哺乳婴儿而分泌的天然食物，可满足婴儿成长所需并提高婴儿免疫力，是婴儿最佳的食物。在实验中对母乳中乳酸菌进行计数，含量为2.5～4.9 logCFU/mL，还分离鉴定出双歧杆菌属（Bifidobacterium spp）和植物乳杆菌（Lactobacillus Plantarum）两种乳酸菌，证实母乳中确实含有乳酸菌，乳酸菌对婴儿建立良好的肠道菌群起到重要作用，故提倡母乳喂养。关键词：母乳；乳酸菌；肠道菌群；婴儿；母乳喂养1 母乳儿提供成长所需的所有营养物质，六个月内婴儿可以纯母乳喂养，甚至不需喝水。不同时段的母乳都含有乳糖、蛋白质和脂肪但含量有差异，初乳（产后泌型免疫球蛋白和补体，脂肪较少；过和矿物质逐渐减少，脂肪最高；成熟乳5天内分泌的乳汁）色黄质略稠，蛋白母乳是天然的婴儿食物，可为婴儿抵抗力，促进消化吸收，并帮助产经济实惠、方便快捷。妇恢复身体健康，减少产妇患乳腺癌、卵巢癌的可能，而且能增进母子情感，改善人体胃肠道功能，清除肠道垃圾，建立良好的肠道菌群，还有免疫调节功能，有降血压、降血脂的作用。母乳中乳酸菌等活性成分是母乳与配方奶粉最大的区别，增加乳酸菌和双歧杆菌的含量是婴儿配方奶粉的目标，最方便的方法就是添加益生元成分。母乳中的益生菌通过哺乳进入婴儿体内，帮助婴儿建立肠道菌群[3]。3.2 设备2 母乳中的细菌质含量为成熟乳的2倍以上，主要为分渡乳（产后6～10天的乳汁）蛋白质（产后11天到9个月的乳汁）蛋白质含量更低，保持相对稳定水平；晚乳（产实验表明新鲜母乳经无菌采集后通过源有研究表明母乳中的微生物来源是者认为母乳中存在的细菌是哺乳过程中婴儿口腔内的细菌污染了母亲的乳母乳一直被认为是无菌液体，但平板计数培养基36 ℃培养48 h后有明显菌落生长。对于母乳中的细菌来内源性污染[1]，母亲肠道中的细菌经由内源性途径迁徙到乳腺；也有研究头，乳头上污染的细菌再通过婴儿吸这是婴儿口腔与乳腺的细菌交换[2]。综合各种研究母乳中的细菌是由于母亲肠道中存在细菌以及乳头与婴儿口腔交叉感染而来。利多仪器（上海）有限公司）；高压电子天平ME2002E（梅特勒-托后10个月以后的乳汁）营养成分都较必需物质，免疫球蛋白可提高婴儿的抗感染能力预防疾病发生，矿物质及微蒸汽灭菌器MLS-3781L-PC（松下健康 医疗器械株式会社）；烘箱Heraterm OGS180（美国ThermoFisher）；厌Scientific）；生物安全柜HF1200LC（上海力申科学仪器有限公司）；全自动物梅里埃）。微生物鉴定仪VITEK 2 Compact30（生3.3 培养基和试剂生理盐水（0.85%）；MRS（Man 氧培养箱DG250（英国Don Whitley 少，不同时段母乳中乳糖含量变化不大。母乳中的脂肪是婴儿脑部发育的吮过程中的负压沿乳腺管转移到乳腺，量元素可促进婴儿身体发育，益生元可以促进有益菌生长并调节肠道微生态。母乳中含有丰富微生物，乳酸菌能帮助婴儿建立起稳定的肠道菌群系统，提高婴儿的代谢和免疫能力。母乳中的营养物质不仅全面均衡，且是适宜人类婴儿的最佳配比，配方奶粉来源于牛乳并不完全适合婴儿，且经过加工和杀菌，活性物质大量损失。母乳喂养可增强婴3 母乳中乳酸菌计数3.1 乳酸菌的功能特性乳酸菌是一类发酵糖类产生大量乳酸的细菌的通称，无芽孢，革兰氏消化，代谢成有益物质被人体吸收，Rogosa Sharpe）培养基（广东环凯 微生物科技有限公司，批号3105720）。3.4 操作步骤3.4.1 样品制备染色阳性。乳酸菌可促进营养物质的抑制腐败细菌繁殖，促进益生菌生长，向10名健康哺乳妇女以无菌操作Jan. 2018 CHINA FOOD SAFETY 83Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.Technology科技分析与检测和植物乳杆菌（Lactobacillus Plantarum）质、饮食、地域等都会对母乳中的微生物造成影响[4]。两种乳酸菌。不同产妇所产母乳所含菌属有相同也有不同，产妇的身体素5 结论与展望乳酸菌，含量为2.5～4.9 logCFU/图1 乳酸菌含量表1 植物乳杆菌（Lactobacillus Plantarum）生化鉴定表29APPA+4dGAL+5ODCBiochemical Details-6PheATyrASAC+7ARG----8PVATE(+)CITLIP++--实验结果表明母乳中确实含有mL，还分离出双歧杆菌属和植物乳杆菌两种乳酸菌，植物乳杆菌和双歧杆菌可促进消化，对婴儿建立良好的肠道菌群起到重要作用。本次实验仅对由于母体的多样性及多变性，还有很多未知菌属未鉴定出。为促进婴儿的健康成长，母乳的微生物研究还有待加强，今后可以深入研究母乳中不同研究意义。10名健康哺乳妇女的乳样进行研究，18dMAL+19dMAN+21BXYL-22O/129R+23ProA27AMAN-30dMLZ+31URE+3356CMT+592KG5-61ESC+647dMLT-50dRIB+51MTE+52IGLM-53OPSBGAL+10PYRA-11SUCT-12+13dGLU+17BGLU+35dTRE+36-64dXYL(+)8ProAUREARG2646GIyA37BGURi-40ILATk-41AGLU-43dSOR+44AGAL+62ELLM754BdFUC-表2 双歧杆菌属（Bifidobacterium spp）生化鉴定表LeuATyrAARBESCBiochemical DetailsELLM-PheA+时段的乳酸菌对婴儿的影响，往婴儿配方奶粉中添加适量乳酸菌也有很大 -11dCEL+1328SAC+3051MTE+534dGAL+39BGALi+41AARA59PHOS-60GRAM+IARA+42AGALi+43BMAN-44+61dRIB2+62OPSAERO--33NAG-15APPA+18dGLU+20dMNE+22dMAL(+)+34BGLUi-36-45PVATE--37BGURi+++10PyrA势无疑是最佳喂养方式，母亲应纯母乳喂养至6个月，适当添加辅食，并坚持喂养至2周岁。参考文献综上所述，母乳喂养以其强大优-54BdFUC+55BNAGi-56AMANi-57AIFUC--63AARAF-64dXYL采集成熟乳样（每个两份），将其充分混匀后，用移液枪吸取样品25 mL中，用均质器充分均质制成1:10的样品匀液。3.4.2 计数本次实验分别选取乳样原液、MORPH-样液与培养基混合均匀，置厌氧培养箱36 ℃培养72 h。3.4.3 结果与分析10份乳样乳酸菌总数结果见图1[1]董学艳,姜铁民,刘继超,等.母乳中乳酸菌的研究进展[J].食品工业科技,2016(19):391-395.[2]荫士安.母乳中微生物及在婴儿免疫系统启动与发育中的作用[J].中国妇幼健康研究,2017,28(6):619-624.[3]Solís G, Reyesgavilan C G D L, Fernández N, et al. Establishment and development of lactic acid bacteria and bifidobacteria microbiota in breast-milk and the infant gut.[J]. Anaerobe, 2010, 16(3):307.[4]关琼,马占山.人类母乳微生物菌群的生态学分析[J].科学通报,2014,59(22):2205-2212.加至装有225 mL生理盐水的无菌袋（两份样品取平均结果）。4 乳酸菌鉴定4.1 纯培养1:10、1:100三个稀释度进行分析，依据GB4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》中皿中，每个稀释度做两个平行，将冷的检验方法进行乳酸菌计数。各吸取三个稀释度的样品匀液1 mL至无菌平却至46 ℃的MRS琼脂培养基缓缓倾入平皿15～20 mL，轻轻转动平皿使菌落接种于MRS琼脂平板，36 ℃厌氧培养48 h。4.2 生化鉴定全自动微生物鉴定仪鉴定仪鉴定从上述结果可看出母乳中含有双从10份乳样中分别选取3个单个结果见表1、表2。歧杆菌属（Bifidobacterium spp） 84 食品安全导刊 2018年1月Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.