环境样品的分析步骤

1、 目标化合物（Targets)的确定

2、 回收率指示物(surrogates standards)的选定 3、 内标化合物(internal standards)的选定

4、 检测方法（仪器）的选取（FID,EDC,FPD,NPD,AED,MS)

5、 前处理方法流程的选定（针对不同环境基质样品，其前处理纯化技术不同）

第一章 目标化合物的选定

一、多环芳烃类

USEPA规定的16种优先控制多环芳烃混合标样（美国SUPELCO）以及常见的一些多环芳烃类污染物，出峰顺序如下：

1、naphthalene 萘；

2、1-methynaphthalene 1-甲基苯； 3、2-methynaphthalene 2-甲基苯； 4、1-ethylnaphthalene 1-乙基苯；

5、hexamethylbenzene 六甲基苯（内标） 6、acenaphthylene 苊烯 7、acenaphthene 苊 8、fluorene 芴

9、phenanthrene 氘代菲（回收率指示物） 10、phenanthrene 菲 11、anthracene 蒽 12、fluoranthene 荧蒽 13、pyrene 芘

14、benzo(a)anthracene 苯并[a]蒽 15、chrysene 屈

16、benzo(b)fluoranthene 苯并[b]荧蒽 17、benzo(k)fluoranthene 苯并[k]荧蒽 18、benzo(a)pyrene 苯并[a]芘 19、perylene 苝

20、indeno(1,2,3-cd)pyrene 茚[123-cd]芘 21、dibenzo(a,h)anthracene 二苯并[a,h]蒽 22、benzo(g,h,i)perylene 苯并[ghi]苝 说明：用紫色标出的物质非16种优先控制多环芳烃

二、有机氯类

EPA 8081方法、USEPA规定的20种优先控制有机氯农药混合标样，它们的出峰顺序： 1、TMX 四氯间二甲苯（回收率指示物） 2、α-HCH α-六六六 3、β-HCH β-六六六 4、γ-HCH γ-六六六

5、PCNB 五氯硝基苯（内标） 6、δ-HCH δ-六六六

7、heptachlor 七氯 8、aldrin 艾氏剂 9、heptachlor epoxide 环氧七氯 10、γ-chlordane γ-氯丹 11、α-endosulfan α-硫丹 12、α-chlordane α-氯丹 13、p,p’-DDE 4,4-滴滴伊 14、dieldrin 狄氏剂 15、endrin 异狄氏剂 16、β-endosulfan β-硫丹 17、p,p’-DDD 4,4-滴滴滴 18、endrin aldehyde 异狄氏剂醛 19、endosulfan sulfate 硫丹硫酸酯 20、p,p’-DDT 4,4-滴滴涕 21、endrin ketone 异狄氏剂酮 22、methoxychlor 甲氯滴滴涕

23、PCB209 十氯联苯（回收率指示物）

三、多氯联苯类

35种多氯联苯混合标样（美国ACROS）,它们的出峰顺序： 1、TMX 2、PCB8, 3、PCNB（内标） 4、PCB28, 5、PCB52, 6、PCB49, 7、PCB44, 8、PCB37, 9、PCB74, 10、PCB70 11、PCB66, 12、PCB60, 13、PCB101, 14、PCB99, 15、PCB 87，81， 16、PCB 77， 17、PCB 82， 18、PCB 123， 19、PCB 118， 20、PCB 114， 21、PCB 153， 22、PCB 105， 23、PCB 179， 24、PCB 138， 25、PCB 158， 26、PCB 126， 27、PCB 166， 28、PCB 187， 29、PCB 183， 30、PCB 128， 31、PCB 167， 32、PCB 156， 33、PCB 180， 34、PCB 169， 35、PCB 170， 37、PCB 1， 38、PCB209 四、酚类

EPA8270方法规定的18种酚类污染物（美国SUPELCO）；4-壬基酚（4-nonylphenols）混合标样，包括11种壬基酚同分异构体（美国ACROS）；双酚A（BPA，美国ACROS），它们的出峰顺序：

1、 苯酚 phenol

2、 邻甲基苯酚 2-methylphenol 3、 间甲基苯酚 3-methylphenol 4、 对甲基苯酚 4-methylphenol 5、 2-氯酚 4-chlorophenol

6、 2,4-二甲基苯酚 2,4- Dimethylphenol 7、 2,4-二氯酚 2,4-Dichlorophenol 8、 2,6-二氯酚 2,6-Dichlorophenol 9、 2,4,6-三氯酚 2,4,6-Trichlorophenol 10、 4-壬基酚 4-Nitrophenol 11、 2,3,4,6-Tetrcechlorop 12、 NP1 13、 NP2 14、 NP3 15、 NP4 16、 NP5 17、 NP6 18、 NP7 19、 NP8 20、 NP9 21、 NP10 22、 NP11 23、 五氯酚 Pentrachlorophenol 24、 4-n-NP（内标） 25、 氘代芘 D16-pyrene（内标） 26、 氘代双酚A D16-BPA（回收率指示物） 27、 双酚A BPA 28、

第二章 回收率指示物、内标化合物和检测方法（仪器）的选定

一、回收率指示物和内标化合物的选定 麦碧娴版 名称 多环芳烃PAHs naphthalene-d8 acenaphthene-d10 phenanthrene-d10 chrysene-d12 perylene-d12 4,4’-dichlorobiphenyl 2,4,5,6-tetrachloro-m-xylene Decachlorobiphenyl(PCB209) 回收率指示物 浓度 5ppm 有机氯农药 Organochlorine Pesticides 多氯联苯PCBs 200ppb 200ppb

实际测试中使用的回收率指示物和内标 实际测试中使用 回收率指示物 名称 多环芳烃PAHs 氘代菲 Ph-d10 浓度 50ppb 内标 名称 六甲基苯 HMB Hexamethylbenzene 五氯硝基苯 PCNB Pentachloronitrobenzene 浓度 100ppb 40ppb 有机氯农药 四氯间二甲苯TMX Organochlorine Pesticides 十氯联苯PCB209 多氯联苯PCBs 酚类 氘代双酚A BPA-d16 氘代菲Ph-d10 氘代芘Pyr-d10 200ppb 4-n-NP 二、检测方法（仪器）的选定 1、 多环芳烃 1．1 仪器

气相色谱-质谱联用仪HP60-5973MSD

采用HP-5MS石英毛细管色谱柱（0.25mm× 60m×0.25μm）,载气为He，流速恒定为

。。

1ml/min，线速度26cm/s。进样口温度300C，MSD300C ，电子能量70ev。 1．2 SIM模式下程序升温模式

。。。。。

始温50C保留2min，20C/min升至200C保留2min，5C/min升至240C保留2min，。。

3C/min升至290C保留15min，最后无分流进样1μL。 2、 有机氯 2．1 仪器

气相色谱-质谱联用仪HP60-5973MSD

采用HP-5MS石英毛细管色谱柱（0.25mm× 60m×0.25μm）,载气为He，流速恒定为

。。

1ml/min，线速度26cm/s。进样口温度300C，MSD300C ，电子能量70ev。 2．2 SIM模式下程序升温模式

。。。。。

始温50C保留2min，20C/min升至200C保留2min，5C/min升至240C保留2min，。。

3C/min升至290C保留15min，最后无分流进样1μL。 3、 多氯联苯 3．1 仪器

气相色谱-质谱联用仪HP60-5973MSD

采用HP-5MS石英毛细管色谱柱（0.25mm× 60m×0.25μm）,载气为He，流速恒定为

。。

1ml/min，线速度26cm/s。进样口温度300C，MSD300C ，电子能量70ev。 3．2 SIM模式下程序升温模式

。。。。。

始温50C保留2min，20C/min升至200C保留2min，5C/min升至240C保留2min，。。

3C/min升至290C保留15min，最后无分流进样1μL。 4、 酚类

4．1 仪器

气相色谱-质谱联用仪HP60-5973MSD

采用HP-5MS石英毛细管色谱柱（0.25mm× 60m×0.25μm）,载气为He，流速恒定为

。。

1ml/min，线速度26cm/s。进样口温度300C，MSD300C ，电子能量70ev。 4．2 SIM模式下程序升温模式

始温50C保留2min，20C/min升至200C保留2min，5C/min升至240C保留2min，3

。

C/min升至290C保留15min，最后无分流进样1μL。

。。。。。。

第三章 前处理方法流程的选定

干净样品

富集→5％甲醇水溶液洗涤→洗脱→浓缩→定容待测 脏样品

富集→5％甲醇水溶液洗涤→洗脱→浓缩→净化→旋蒸→吹氮→定容待测 一、 富集 固相萃取（SPE）

1、多环芳烃、有机氯、多氯联苯富集选用C18柱；

酚类、雌激素富集选用HLB柱。 2、活化方法 C18柱

依次用：1体积正己烷、二氯甲烷、1体积甲醇、1体积蒸馏水各活化5min， 注意：不能流干！ HLB柱

依次用：1体积甲丁醚、1体积甲醇、1体积蒸馏水各活化5min， 水样全部抽完后要用5％的甲醇洗掉杂质。 注意：HLB柱一定要抽干！ 3、富集量 二、 洗脱

多环芳烃 依次用5ml正己烷：二氯甲烷＝1：1 、5ml二氯甲烷洗脱 有机氯 依次用5ml正己烷：二氯甲烷＝1：1 、5ml二氯甲烷洗脱 多氯联苯 依次用5ml正己烷：二氯甲烷＝1：1 、5ml二氯甲烷洗脱 酚类 10ml 甲丁醚：甲醇＝1：1分三次洗脱 雌激素 10ml 甲丁醚：甲醇＝1：1分三次洗脱 三、 浓缩

将洗脱液通过旋转蒸发或吹氮浓缩至1ml 四、 净化

1、正己烷湿法装柱

1)取一根干净的长层析管，先用10ml正己烷淋洗层析管，从下端排出至液面刚好浸没石英砂，此淋洗液废弃。关上开关，将层析柱中加满入正己烷；

2)打开开关，保持正己烷以适当的流速流出，此时向层析柱中依次加入10g硅胶、5g氧化铝和1g无水硫酸钠，大约分别为10cm、5cm、1cm。此过程要保证正己烷液面始终高于柱界面防止柱子断裂，并要不断的用洗耳球敲打，使装入的固体紧密。

2、将1ml待净化的样品用滴管从K-D浓缩器移入净化柱中，浸泡5min以上，保证样品与净化柱充分接触交换。 3、 多环芳烃的洗脱

1）第一级洗脱：以15ml正己烷分三次洗涤盛有样品的K-D浓缩器，均用滴管转移入净化柱当中，然后以1滴/s左右的速度流出，直到液面刚好处于无水硫酸钠层面之上，关闭开关。此级洗脱出的为非极性组分，主要成分为烷烃类。

2）第二级洗脱：以70ml正己烷/二氯甲烷＝7：3（体积比）混合液淋洗净化柱，控制流速为1滴/s左右的速度流出，直到液面刚好处于无水硫酸钠层面之上，关闭开关。 此级洗脱出的为中等极性至非极性组分，主要成分为多环芳烃类、有机氯类。

3）第三级洗脱：以30ml甲醇淋洗净化柱，控制流速为1滴/s左右的速度流出，至流干。 此级洗脱出的为极性组分。 4、 有机氯的洗脱

与多环芳烃净化方法完全相同 5、 多氯联苯的洗脱

用100ml正己烷洗脱 6、 酚类的净化

1） 选用小的净化柱，正己烷湿法装柱时加入4g硅胶和2g无水硫酸钠。 2） 分四级洗脱，四级洗脱液收集到一个鸡心瓶中： Ⅰ.10mL15%甲苯的正己烷溶液 Ⅱ. 10mL45%甲苯的正己烷溶液 Ⅲ. 10mL75%甲苯的正己烷溶液 Ⅳ. 10mL15%2-丙醇的甲苯溶液 注意：这四种溶液要现配现用！ 7、 雌激素的净化 五、旋转蒸发 旋蒸条件的选择： 二氯甲烷一般用 正己烷一般用 甲醇一般用 甲丁醚一般用

六、整个过程的耗材

TM

所用仪器 固相萃取装置：Supelco VisiprepDL十二管防交叉污染固相萃取装置 固相萃取柱 SUPELCO C18 固相萃取柱、Waters OASIS HLB 固相萃取柱

有机溶剂 二氯甲烷（Dichloromethane）为农残级（美国Fisher Scientific公司）；

甲醇（Methanol）为HPLC级（美国Fisher Scientific公司）； 正己烷（n-Hexane）为农残级（美国Fisher Scientific公司）； 叔丁基甲基醚

第四章 整个过程的质量控制

一、样品的采集