多酚检测方法

表儿茶素（购自Sigma 公司） 标定含量的提取物对照样 5.6.3 仪器和用具

5.6.3.1 玻璃仪器：容量瓶（50ml）、移液管（1ml、10ml）、比色皿：1cm、量筒。 5.6.3.2 电子天平：1/10000（德国产赛多利斯） 5.6.3.3 紫外分光光度计（上海产53WB） 5.6.3.4超声波清洗器 5.6.4 操作步骤：

5.6.4.1 斐林C试剂的配置：在2L的磨口瓶回流装置内加入100g钨酸钠（NaWO4.2H2O），25g钼酸钠（NaMO4.2H2O），700ml重蒸水，再加入50ml磷酸及100ml盐酸，充分混合后在电加热帽加热至微沸腾，保持温度回流10小时，再加入150g硫酸锂(LiSO4 )，50ml重蒸水及数滴溴，然后打开口继续加热15分钟，以便驱除过量的溴，冷却至室温用重蒸水定容至1L，过滤放入棕色瓶中于冰箱保存。使用前取一定体积再稀释1倍使用，没有稀释的斐林C试剂可长期贮藏在冰箱中，一般情况试剂呈金黄色，如果试剂呈绿色则弃去。

5.6.4.2 20%碳酸钠溶液的配置：精密称取20g无水碳酸钠置于100ml容量瓶中，加入重蒸水超声溶解，冷却至室温，用重蒸水定容至刻度，备用。 5.6.4.3. 测定：

5.6.4.3.1 精密称取提取物粉末15mg加入50ml容量瓶中，用50%的甲醇超声15min使溶解，冷却至室温，50%甲醇定容至刻度，摇匀。

5.6.4.3.2 精密吸取上述溶液1ml至50ml容量瓶中，加入20～30ml重蒸水，再加入2.5ml稀释后的斐林C试剂，静置8min，后加入10ml20%的碳酸钠溶液，用重蒸水定容至刻度，静置2h。

5.6.4.3.3 在765nm处测定其吸光度值（用50%的甲醇做空白对照）。 5.6.5计算：

（E×A+0.006）×2.5

多酚（%）=

式中；A样：样品溶液吸光度值 M样：样品重量（mg）

E：表儿茶素吸光系数;8.34

M

×100%