ChemiDocXRS+ ImageLab操作指南

建立您的程序：

1. 在凝胶成像（Gel Imaging）对话框中选择Chemi（化学发光）应用程序

2. 在成像区域（Imaging Area）对话框中的下拉菜单里选择合适的样品大小（非必需） 3. 选择成像曝光（Image Exposure）方法 可以人为估计曝光时间并手控设定（Manual Exposure），或者使用信号累积模式（Signal Accumulation Mode，SAM） 在建立一个化学发光的程序时最难的任务就是图像曝光的确定，因为您想获得一个充分利用了相机大的动态范围的图像。过短的图像曝光时间可能使高于膜背景的微弱信号不能被识别；过长的图像曝光时间能够使得某些条带饱和（也就是说，超出了相机准确报告信号的能力）。

如果这是您第一次用ChemiDoc XRS+分析化学发光样品，您需要在使用手控或信号累积模式（SAM）之前决定一个合适的成像时间框架。获得这个信息的最好的方式是取得一个相对短的手工曝光并利用Image Lab里的工具估计最适的曝光时间。

手控曝光

1. 选择手控设定曝光时间（Manually set exposure time）并在读秒框中输入10秒。

2. 选择Highlight saturated pixels 。 3. 把胶置于透射箱的中心位置。 4. 在程序窗口中点击

按钮。

5. 在你的显示器上看样品的实时图像时，打开的成像仪的门并手工移动样品直至它位于视野的中心区域。

6. 如果必要的话，利用照相机的变焦滑板节成像区域的大小。 7. 选择

按钮获得你的第一个成像。

调

如果您所需的图像在计算机的显示器上出现，寻找图像中的不能定量的红色的饱和区域。如果您看到了饱和区域，请重新用一个较短的时间成像。

如果没有饱和区域，移动鼠标置于最暗的条带之上。在较低的右下角Image Lab窗口中看信号的强度值。在这个例子里，强度为

1994。这大约是照相机能记录的最大值的32分之一（最大值为65,535）。用你的最初的10秒曝光再乘以30就可在照相机的最大动态范围附近成像你的样品。如果你只需要对单一图像的成像时间估计的话，直接在手工曝光区域里输入300。

信号累积模式（Signal Accumulation Mode，SAM）

如果预估方法不足以精确满足您的目的，请选择SAM按钮，然后按Setup按钮。一个新的对话框会跳出来，其包含有可输入细分的成像时间的领域。

在这个例子中，我们已经输入了小于和大于我们原始的300秒曝光估计时间，因为我们有理由相信准确的成像时间将会在这些时间之中。我们总共想要5个成像，推测其中一个将会与最佳成像极为接近。一个您的SAM设定的图像显示出现在对话框里。

在您选择按钮然后按钮后，您会看到一个进度条显示着整体的成像

时间。在250秒第一个图像出现在主程序窗口，同时一个小的缩略图将出现在窗口下方。在275秒，第二个图像出现在程序窗口，同时在窗口下方会加入第二个小的缩略图。这个过程将持续至所有的5个图像都被获得。

就像前面做过的那样，通过移动鼠标在图像上，您能判定强度值。您也可以通过使用位于程序窗口左边的图像转换窗口（Image Transform）中的调节划片改变图像的表观。在SAM程序中的任何地方您都能通过点击缩略图查看图像。

如果您发现一个符合您要求的图像，点击 按钮放弃任何其它的不满意图

像，删除在缩略图窗口中的其它图像，完成建立您的程序。您也能在SAM获得期间或之后保存图像。简单地右键单击缩略图窗口内的任意图像并命名保存在您的系统里。

从相似实验中获得的转印膜经常产生相似的化学发光信号，所以您也能够打开并重新利用一个SAM程序处理一个好的曾经获得的图像。

在决定获取图像的数量时，记住增加SAM图像会导致背景信号的平均。当较多的图像被获得时，在背景强度水平附近的弱的信号将会变得难以识别。如果辨别最弱的信号很重要，我们推荐在合适的时间下获得单一的成像。