第１１卷第６期２０１３年１１月生物加工过程ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＶ０１．１１Ｎｏ．６ＮＯＶ．２０１３ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—３６７８．２０１３．０６．００２不同萃取体系对小球藻藻渣成分的影响尹丰伟１，段琚１，高振１，郑洪立１，郑艳萍１，黄和１，２（１．南京工业大学生物与制药工程学院，南京２１１８００；２．南京工业大学材料化学工程国家重点实验室，南京２１０００９）摘要：考察５种萃取体系（Ａ：正己烷，Ｂ：正己彬乙醇，Ｃ：正己肜异丙醇，Ｄ：氯仿／甲醇，Ｅ：氯仿／乙醇）对小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）油脂的提取效果及藻渣成分的影响。实验结果表明：不同的萃取体系下，油脂得率为Ｄ（１２．２７％）、Ｅ（８．８７％）、Ｃ（７．７１％）、Ｂ（６．８０％）、Ａ（３．９１％），藻渣蛋白含量为Ａ（５２．６０％）、Ｅ（４６．２３％）、Ｂ（４０．１９％）、ｃ（３９．５２％）、Ｄ（３２．５２％），藻渣碳水化合物含量为Ａ（２３．２８％）、Ｅ（１６．１５％）、Ｂ（１３．２４％）、Ｄ（１３．５０％）、ｃ（９．０６％）；藻渣色素含量为Ａ（１．７５％）、Ｅ（１．２９％）、Ｂ（１．１４％）、Ｃ（０．９６％）、Ｄ（０．５８％）；藻渣灰分含量为Ｄ（３．６３％）、Ｅ（２．９４％）、ｃ（２．２３％）、Ｂ（２．２５％）、Ａ（１．４８％）。综合考虑微藻生物柴油的生产及藻渣的可利用性，ｙ（氯仿）／Ｖ（乙醇）＝ｌ是一种油脂萃取效果较好，藻渣营养成分损失较小的小球藻油脂萃取体系。关键词：小球藻；萃取；油脂；微藻；营养成分中图分类号：Ｑ８１９文献标志码：Ａ文章编号：１６７２—３６７８（２０１３）０６—０００９—０６ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓＯｉｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｏｆｏｉｌ－ｅｘｔｒａｃｔｅｄａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓｆｒｏｍＣｈｌｏｒｅｌｌａｖｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａＹＩＮＦｅｎｇｗｅｉｌ，ＤＵＡＮＪｕｎｌ，ＧＡＯＺｈｅｎｌ，ＺＨＥＮＧＨｏｎｇｌｉｌ，ＺＨＥＮＧＹａｎｐｉｎ９１，ＨＵＡＮＧＨｅｌ’２（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｔｅｅｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１１８００，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｔａｔｅｋｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭａｔｅｒｉａｌｓ·ＯｒｉｅｎｔｅｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮａｎｊｉｎｇｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｉｖｅｋｉｎｄｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ（Ａ：ｎ—ｈｅｘａｎｅ，Ｂ：ｎ—ｈｅｘａｎｅ／ａｌｃｏｈｏｌ，Ｃ：／／，一ｈｅｘａｎｅ／ｌｉｐｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｎｕｔｒｉｅｎｔｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｏｆｉｓｏｐｒｏｐｙｌ，Ｄ：ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ／ｍｅｔｈａｎｏｌ，Ｅ：ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ／ａｌｃｏｈ０１）ｏｎａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓｆｒｏｍＣｈｌｏｒｅｌｌａｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ，ｔｈｅｌｉｐｉｄｙｉｅｌｄｗｅｒｅ：Ｄ（１２．２７％），Ｅ（８．８７％），Ｃ（７．７１％），Ｂ（６．８０％），Ａ（３．９１％）；ｔｈｅａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓｏｆａｌｇａｅ—ｒｅｓｉｄｕｅｓｔｈｅｐｉｇｍｅｎｔｓｃｏｎｔｅｎｔｓｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｗｅｒｅ：Ａ（５２．６０％），Ｅ（４６．２３％），Ｂ（４０．１９％），Ｃ（３９．５２％），Ｄ（３２．５２％）；ｔｈｅｏｆａｌｇａｅ—ｒｅｓｉｄｕｅｓｔｏｔａｌｗｅｒｅ：Ａ（２３．２８％），Ｅ（１６．１５），Ｂ（１３．２４％），Ｄ（１３．５０），Ｃ（９．０６％）；ｗｅｒｅ：Ａ（１．７５％）），Ｅ（１．２９％），Ｂ（１．１４％），Ｃ（０．９６％），Ｄｗｅｒｅ：Ｄ（３．３６％），Ｅ（２．９４％），Ｃ（２．２３％），Ｂ（２．２５％），ｗａｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｍｉｅｒｏａｌｇａｅｏｎ（０．５８％）；ｔｈｅａｓｈｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｇａｅ—ｒｅｓｉｄｕｅｓｓｙｓｔｅｍＡ（１．４８％）．ｎｅｒｅｓｉｄｕｅｓ．ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎＶ（ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ）／Ｖ（ａｌｃｏｈ０１）＝１ｌｉｐｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｂｅｃａｕｓｅｏｆｉｔｓｈｉｇｈｅｒｌｉｐｉｄｙｉｅｌｄａｎｄｍｕｃｈｌｅｓｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｎｕｔｒｉｅｎｔｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆａｌｇａｅ－Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｌｉｐｉｄ；ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ；ｎｕｔｒｉｅｎｔｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ收稿日期：２０１２一１０—１０基金项目：国家重点基础研究发展计划（９７３计划）（２０１１ＣＢ２００９０６）作者简介：尹丰伟（１９８５一），男，山东青岛人，硕士研究生，研究方向：生物化工；高振（联系人），副研究员，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇａｏｚｈｅｎ＠ｎｊｕｔ．ｅｄｕ．ｃｎ万方数据１０生物加工过程第１１卷当前，由于全球能源、资源和环境压力，使研究者的目光投向了对生物质资源的开发与利用…，在众多的生物质原料中，微藻光合效率高、生长速度快、油脂含量高，具有开发成生物柴油原料的潜能【２Ｊ，但因生产成本高旧ｊ，未能实现规模化生产。微藻柴油生产中，油脂的提取是其中一个关键环节，有机溶剂萃取法因成本较低、溶剂可回收利用等优势ＨＪ，是微藻油脂提取中的常用方法。前人关于微藻油脂的提取做了大量研究，并针对不同的微藻提出了不同的有机溶剂萃取体系和提取方法∞‘７Ｊ，其中以混合萃取体系（极性与非极性有机溶剂混合）的提取效果最好¨Ｊ。微藻除了含有可供生产生物柴油的油脂外，还含有大量的蛋白、多糖、色素、矿质元素等，因此藻渣中会残留丰富的营养成分，并且微藻油脂提取后会产生５０％一８０％的藻渣。９Ｊ。有报道指出将微藻油脂生产和藻渣的利用结合起来是降低生物柴油生产成本的有效途径之一¨０｜，同时也可避免藻渣堆积带来的环境污染。虽然有关微藻油脂提取方面的研究已取得很大的进展，但这些研究很少涉及并考虑到不同萃取方法对提油之后藻渣的影响。针对该问题，笔者拟在前人研究的基础上，综合目前实验中常用的萃取体系，考察不同萃取体系对蛋白核小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）藻渣成分的影响，为小球藻油脂的提取和藻渣利用提供参考。１材料与方法１．１小球藻实验所用的蛋白核小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）由笔者所在课题组培养。１．２油脂的提取根据前人研究，拟采用５种不同的萃取体系（所用的试剂均为分析纯，以后皆用Ａ～Ｅ表示）：Ａ正己烷…Ｊ，Ｂ正己烷／乙醇（体积比１：１）∞Ｊ，Ｃ正己烷／异丙醇（体积比１：１）＂Ｊ，Ｄ氯仿／甲醇（体积比１：１）＂Ｊ，Ｅ氯仿／乙醇（体积比１：１，由笔者根据文献［８］提出）。称２ｇ藻粉，液氮破壁∞１后收集于５０ｍＬ具塞三角瓶中，分别加入２０ｍＬＡ—Ｅ的萃取体系，２５℃、２００ｒ／ｍｉｎ条件下振荡萃取２ｈ．萃取结束后加１０ｍＬ蒸馏水分层旧Ｊ，分别取正己烷层和氯仿层于２５ｍＬ圆底烧瓶中，并再用相同体积的正己烷和万方数据氯仿萃取２次。有机溶剂经减压蒸馏去除，即得粗油脂，具体流程见图１。矗脂萃◇＼／／＼有机溶剂水醇油脂细胞碎片受ｌ’ｉ圃ｔ油脂收集沉淀ｔＣ藻渣图１小球藻油脂的提取与藻渣获取路线Ｆｉｇ．１Ｒｏａｄｍａｐｏｆｌｉｐｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍＣｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ１．３藻渣的获得油脂提取之后，将剩下的含小球藻细胞碎片的藻液离心（在４℃下５０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｒａｉｎ）弃上清，细胞碎片再用蒸馏水洗３次，收集沉淀，６０℃烘干，即得藻渣（图１）。１．４分析方法油脂得率的计算及脂肪酸分析参照文献［６］。蛋白质的测定参照文献［１２］，以６．２５作为总Ｎ转化为蛋白质的系数。氨基酸测定：称取０．０２ｇ藻渣于１０ｍＬ水解管中，加１０ｍＬ６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ，１２０℃条件下水解２４ｈ。氨基酸的分析方法参照文献［１３］。藻渣碳水化合物的测定采用Ｈ：ＳＯ。一蒽酮法¨“。藻渣色素的提取与分析参照文献［１５］。藻渣灰分的测定参照文献［１６］。藻渣矿质元素的分析：藻渣灰化后以１：４９（体积比）的ＨＮＯ，溶解后，进行ＩＣＰ分析ⅢＪ。２．１萃取体系对油脂得率的影响考察萃取体系对油脂得率的影响，结果见图２。由图２可知：小球藻的油脂约占细胞干质量的１０％，不同的萃取体系下的油脂得率差异明２结果与讨论第６期尹丰伟等：不同萃取体系对小球藻藻渣成分的影响显；单一非极性有机溶剂（Ａ）下的油脂得率最少，只有３．９１％，混合萃取体系下油脂的得率较高，其中Ｄ条件下可达到１２．２７％。Ｈａｌｉｍ等¨川发现正己烷／异丙醇条件下获得的油脂要比单一的正己烷条件下多３倍左右，并提出了微藻油脂的萃取机制旧』，认为极性和非极性有机溶剂可针对不同类型油脂的萃取，而混合萃取体系更利于微藻油脂的萃取，原因与细胞中同膜蛋白相连的油脂相关。这是因为藻细胞含有极性脂，并通过氢键或其他较强的静电键与膜上的蛋白质相连，萃取体系中的极性溶剂可以破坏这种连接…Ｊ，将这类脂从膜蛋白上“拉”出来并溶于有机溶剂中。本实验进一步证实了该机制，并发现不同非极性／极性有机溶剂组合变化对油脂的提取效果不同。４２０８６零、胖难普霹４２ＯＡＢＣＤＥ萃取体系图２萃取体系对小球藻的油脂得率的影响Ｆｉｇ．２Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｌｅｍｓ０１１ｌｉｐｉｄｙｉｅｌｄｏｆＣｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ２．２萃取体系对脂肪酸分布的影响表１为萃取体系对脂肪酸分布的影响结果。由表１可知：该蛋白核小球藻的脂肪酸类型分布为Ｃ１４：０～Ｃ１８：３，不饱和脂肪酸（ＵＦＡ）含量较高，约占总脂肪酸的７７％；所有脂肪酸中，以Ｃ１８：２（亚油酸）、Ｃ１６：０（软脂酸）和Ｃ１８：３（亚麻酸）的含量较高。由表１还可以看出，不同萃取体系下得到的脂肪酸具有明显的差别：单一正己烷条件（Ａ）不利于饱和脂肪酸的提取，饱和脂肪酸（ＳＦＡ）占总脂肪酸的２１．０４％，这可能是由于不饱和脂肪酸多以极性结构脂的形式存在有关；其他４种混合萃取体系，以Ｂ得到的饱和脂肪酸比例较高，达到总脂肪酸的２４．４３％，以Ｃ条件下的最少，为２２．７４％。这说明油脂在细胞内有不同存在形式，且进一步说明不同的萃取体系对细胞内油脂的作用力不同。万方数据表１萃取体系对小球藻的脂肪酸分布及含量的影响Ｔａｂｌｅ１ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓｏｎｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎＣｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ图３为不同萃取条件下藻渣的蛋白含量结果。由图３可知：该小球藻藻渣中的蛋白质占到藻渣干质量的４５％左右，可作为一种良好的蛋白食品或蛋白饲料源；Ａ条件下的藻渣蛋白含量较高，占藻渣干质量的５２．６０％，Ｄ条件下得到的最少，为３２．５２％。本实验采用液氮研磨对细胞进行破壁处理∞ｊ，因此细胞膜上的极性脂与蛋白的复合体有可能在萃取时一并进入到有机溶剂中，造成藻渣蛋白含量的减少。另外，混合萃取体系中的极性溶剂（水醇相）含有色素、蛋白质、氨基酸和其他的非油脂成分¨８Ｉ，造成部分蛋白质的流失。实验中所用到的几种极性溶剂极性各不相同，可能会造成不同萃取体系中的水醇相蛋白含量不同。因此，藻渣蛋白含量受多种因素影响，具体原因和机制有待进一步深入研究。２．４萃取体系对藻渣的氨基酸组成及含量的影响表２为藻渣中的氨基酸及其含量。由表２可知：４种混合萃取体系（Ｂ～Ｅ）下的氨基酸含量相似，但单一萃取体系（Ａ）与混合萃取体系（Ｂ～Ｅ）相比在某些氨基酸含量上具有较大差异，这可能与萃取过程中因萃取体系不同而造成的蛋白质流失有关。２．３萃取体系对藻渣蛋白含量的影响１２生物加工过程第１１卷６０５０冰面４０怨３０皿２０嘲１００ＡＢＣＤＥ萃取体系图３萃取体系对藻渣的蛋白含量的影响Ｆｉｇ．３Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓｏｎｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓ表２萃取体系对藻渣中氨基酸的组成及含量的影响Ｔａｂｌｅ２ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓＯｉｌ８ｎｌｉｎｏａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｏｆａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓ２．５萃取体系对藻渣的碳水化合物含量的影响图４为不同萃取体系下的藻渣中碳水化合物含量结果。由图４可知：小球藻细胞中含有较多的糖脂（ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ），约占细胞干质量的５．７％‘１９１。糖脂作为一种极性脂是膜脂的重要组成成分㈨，在油脂万方数据的萃取过程中一部分糖脂溶于有机溶剂而被提取出来，使藻渣中的碳水化合物含量降低。另外，小球藻的部分碳水化合物因溶于水醇相中而流失¨８｜，也会降低藻渣碳水化合物的含量。从图４还可以看出，混合萃取体系对藻渣碳水化合物的含量影响较大，且不同的混合萃取体系之间也有较大差别。３０零２５骝２０舞１５善１０妥疆５ＯＡＢＣＤＥ萃取体系图４萃取体系对藻渣的碳水化合物含量的影响Ｆｉｇ．４Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓｏｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｃａｒｂｏｈｙ７ｄｒａｔｅｉｎａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓ２．６不同萃取体系下的藻渣色素含量不同萃取体系下藻渣中叶绿素ａ、叶绿素ｂ和类胡萝卜素的含量变化如图５所示。由图５可知：Ａ条件下的藻渣色素含量最多，达到１７．５１ｍｇ／ｇ；其次为Ｂ、Ｃ和Ｅ，三者相差不大；Ｄ条件下最少，为５．５９ｍｇ／ｇ。将该结果与２．１节结果对照可知，油脂萃取效果好的体系同样对色素有着良好的萃取作用，这主要是因为这３种色素都是脂溶性的，在油脂的萃取过程中溶于有机溶剂而使藻渣中的色素含量降低。有研究表明氯仿／甲醇体系利于叶绿素ａ的提取旧１－２２］，本实验的结果也表明了这一点，并且还证明该体系同时还适用于另外２种色素的萃取（图５）。藻渣中色素含量的差异也说明不同萃取体系对微藻不同色素的作用力不同。１，ｋ∞∞＜昌咖童咖１确抽懈懈蝴坦）萃取体系图５萃取体系对藻渣的色素含量的影响Ｆｉｇ．５Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓｏｎｐｉｇｍｅｎｔｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎａｌｇａｅ－ｒｅｓｉｄｕｅｓ第６期尹丰伟等：不同萃取体系对小球藻藻渣成分的影响２．７萃取体系对藻渣的灰分含量的影响不同萃取体系下的藻渣中灰分含量如图６所示。由图６可知：藻渣中的灰分含量较少；不同萃取体系下的藻渣灰分含量不同，以Ｄ条件下得到的灰分最多，占到藻渣干质量的３．３６％。灰分主要是无机成分的残留物，本实验获取的藻渣是破壁后的小球藻经水和有机溶剂处理后的残余物，为藻细胞的结构成分（细胞器、细胞膜和细胞壁等），胞内游离无机盐易在处理过程中流失。而灰分含量的测定是以占干质量的百分比计算的，而由前面的分析可知，Ａ条件下的油脂得率最低，藻渣中残留的油脂、蛋白质、碳水化合物的含量最高，使得灰分在总干质量中所占的比例降低；Ｄ条件则恰好相反。４Ｏ３０２０。§求樾ｉ１ＯＯＡＢＣＤＥ萃取体系图６萃取体系对藻渣的灰分含量的影响Ｆｉｇ．６ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓＯｎａｓｈｃｏｎｔｅｎｔｉｎａｌｇａｅｒｅｓｉｄｕｅｓ２．８萃取体系对藻渣中矿质元素含量的影响分析了不同萃取体系下藻渣中的９种矿质元素（Ｐ、Ｃａ、Ｎａ、Ｋ、Ｆｅ、Ａ１、Ｚｎ、Ｃｕ和Ｍｎ），结果如表３所示。由表３可知：藻渣中含有丰富的Ｐ、Ｃａ和Ｎａ，分别占到矿质元素总质量的５０％、２０％和１５％左右，Ａｌ、ｚｎ、Ｃｕ和Ｍｎ的含量则相对较少。９种元素中，Ｐ含量具有显著的优势，这是因为藻渣主要是残破的细胞结构，而Ｐ又是细胞核和细胞膜等细胞结构的重要组成元素。不同萃取体系下，藻渣矿质元素占藻渣干质量的含量（ｍｇ／ｇ）由多到少依次为Ｄ（８６９．１９）、Ｅ（６５６．９８）、Ｂ（５４８．９８）、Ｃ（４８３．７８）、Ａ（４２４．７０），此趋势同藻渣灰分的含量趋势一致（图６），这是因为矿质元素是灰分的主要成分。２．９萃取体系的评价综合以上实验结果，针对微藻生物柴油的生产和藻渣的可利用性，并参照美国能源部关于微藻生物炼制的概述［２３｜，对油脂和藻渣成分各项指标分配权重。其中油脂的获得是主要目标，因此给以最高万方数据权重值为０．３，藻渣中的成分根据其经济价值分别赋予不同的权重（表４），并为各种萃取体系打分（相差不明显的计相同分）。在该评价方法下，Ｅ萃取体系得到的分数最高为４．０，其次为Ａ（３．８）和Ｄ（３．２），得分最少的为Ｂ（２．８）和ｃ（２．４）。因此在该评价方法下，Ｅ萃取体系（氯仿／乙醇）获得的油脂得率较高，且藻渣成分损失较少。表３萃取体系对藻渣中的矿质元素含量的影响Ｔａｂｌｅ３Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓｏｎｍｉｎｅｒａｌｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎａｌｇａｅ—ｒｅｓｉｄｕｅｓ表４萃取体系的评价Ｔａｂｌｅ４Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ３结论油脂萃取后的小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｈｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）藻渣中仍含有丰富的营养成分，具有进一步开发利用的潜力。单一非极性有机溶剂不利于油脂的萃生物加工过程第１１卷取，但得到的藻渣营养成分损失最少；混合萃取体系由于其极性溶剂能破坏极性脂与膜的连接，因此更能充分提取细胞中的油脂成分，但同时也造成藻渣成分损失较多——一部分溶于水醇相中而流失，另一部分溶于非极性溶剂中，具体的组成及含量有待于进一步研究。不同的混合萃取体系由于极性的不同对油脂的提取效果和藻渣成分的影响也不同，氯仿／乙醇（体积比１：１）体系相对是一种提油效果较好、藻渣营养成分损失较小的萃取体系，但由于氯仿的使用可能会限制藻渣的进一步利用，因此针对微藻及藻渣的利用方向可选择不同的萃取体系，另外开发一种有效的有机溶剂去除方法也可以拓宽藻渣的应用范围。参考文献：［１］ＬａｎｇＸ，ＤａｌａｉＡＫ，ＢａｋｈｓｈｉＮＮ，ｅｔａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｂｉｏ—ｄｉｅｓｅｌｓｆｒｏｍｖａｒｉｏｕｓｂｉｏ．ｏｉｌｓ『Ｊ］．ＢｉｏｒｅｓｏｕｒＴｅｃｈｎｏｌ，２００１，８０（１）：５３－６２．［２］ＷｉｊｆｆｅｌｓＲＨ，ＢａｒｂｏｓａＭＪ．Ａｎｏｕｔｌｏｏｋｍｉｃｒｏａｌｇａｌｂｉｏｆｕｅｌｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１０，３２９：７９６－７９９．［３］“ＹＧ，ＸｕＬ，ＨｕａｎｇＹＭ，ｅｔａ１．ＭｉｃｒｏａｌｇａｌｂｉｏｄｉｅｓｅｌｉｎＣｈｉｎａ：ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓａｎｄｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌＥｎｅｒｇｙ，２０１１，８８（１０）：３４３２－３４３７．［４］ＭｅｒｃｅｒＰ，ＡｒｍｅｎｔａＲＥ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｉｎｏｉｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍｍｉｃｒｏａｌｇａｅ［Ｊ］．ＥｕｒＪＬｉｐｉｄＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌ，２０１１，１１３（５）：５３９－５４７．［５］ＬｅｅＪＹ，ＹｏｏＣ，ＪｕｎＳＹ，ｅｔａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｓｅｖｅｒａｌｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｉｐｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍｍｉｃｒｏａｌｇａｅ［Ｊ］．ＢｉｏｒｅｓｏｕｒＴｅｃｈｎｏｌ，２０１０，１０１（１）：￥７５一￥７７．［６］ＺｈｅｎｇＨ，ＹｉｎＪ，ＧａｏＺ，ｅｔａ１．ＤｉｓｒｕｐｔｉｏｎｏｆＣｈｌｏｒｅＵａｖｕｌｇａｒｉｓｃｅｉｌｓｆｏｒｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｏｆｂｉｏｄｉｅｓｅｌ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｌｉｐｉｄｓ：ａｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｇｎｎｄｉｎｇ，ｕｈｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ，ｂｅａｄｍｉｌｌｉｎｇ，ｅｎｚｙｍａｔｉｃｌｙｓｉｓ，ａｎｄｍｉｃｒｏｗａｖｅｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０１１，１６４（７）：１２１５．１２２４．［７］ＧｒｉｍａＥＭ，ＭｅｄｉｎａＡＲ，ＧｉｍＡＧ，ｅｔａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｌｉｐｉｄｓａｎｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓｆｒｏｍｍｉｃｒｏａｌｇａｌｂｉｏｍａｓｓ［Ｊ］．ＪＡｍＯｉｌＣｈｅｍＳｏｃ，１９９４，７１（９）：９５５－９５９．［８］ＨａｌｉｍＲ，ＤａｎｑｕａｈＭＫ，ＷｅｂｌｅｙＰＡ．Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｏｉｌｆｒｏｍｍｉｃｒｏａｌｇａｅｆｏｒｂｉｏｄｉｅｓｅｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ：ａｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌＡｄｖ，２０１２，３０（３）：７０９－７３２．［９］ＭｉｌｌｅｄｇｅＪＪ．Ｔｈｅｃｈａｌｌｅｎｇｅｏｆａｌｇａｌｆｕｅｌ：ｅｃｏｎｏｍｉｃｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｆ万方数据ｔｈｅｅｎｔｉｒｅａｌｇａｌｂｉｏｍａｓｓ［Ｊ］．ＣｏｎｄｅｎｓｅｄＭａｔｔｅｒ，２０１０，１（６）：４－６．［１０］ＶａｓｕｄｅｖａｎＰＴ，ＢｒｉｇｇｓＭ．Ｂｉｏｄｉｅｓｅｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ：ｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｅｏｆｔｈｅａｒｔａｎｄｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ［Ｊ］．ＪＩｎｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００８，３５（５）：４２１－４３０．ＨａｌｉｍＲ，ＧｌａｄｍａｎＢ，ＤａｎｑｕａｈＭＫ，ｅｔａ１．Ｏｉｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍｍｉｅｒｏａｌｇａｅｆｏｒｂｉｏｄｉｅｓｅｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＢｉｏｒｅｓｏｕｒＴｅｃｈｎｏｌ，２０１１，１０２（１）：１７８－１８５．［１２］卫生部．ＧＢ５００９．５＿２０１０食品中蛋白质的测定［Ｍ］．北京：中国标准出版社，２０１０．［１３］史纯珍，张红漫，黄和，等．米根霉胞内氨基酸的高效液相色谱测定及其代谢途径分析［Ｊ］．分析化学，２０１２，４０（４）：５７４－５７８．［１４］ＭｏｒｒｉｓＤＬ．ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓｗｉｔｈＤｒｅｙｗｏｏｄａｎｔｈｒｏｎｅｒｅａｇｅｎｔ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９４８，１０７：２５４－２５５．［１５］ＷｅｌｌｂｕｒｎＲ．Ｔｈｅｓｐｅｃｔｒａｌｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｓａｎｄｂ，ｗｅｌｌｔｏｔａｌｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ，ｕｓｉｎｇｖａｒｉｏｕｓｓｏｌｖｅｎｔｓｗｉｔｈｓｐｅｃｔｍｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ，１９９４，１４４（３）：３０７－３１３．［１６］卫生部．ＧＢ５００９．４—２０１０食品中灰分的测定［Ｍ］．北京：中国标准出版，２０１０．［１７］“Ｘ，ＣｏｌｅｓＢＪ，ＲａｍｓｅｙＭＨ，ｅｔａ１．ＳｅｑｕｅｎｔｉａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｓｏｉｌｓｆｏｒｍｕｌｔｉｅｌｅｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｂｙＩＣＰ·ＡＥＳ［Ｊ］．ＣｈｅｍｉＧｅｏｌ，１９９５，１２４（１／２）：１０９—１２３．［１８］ＦａｊａｒｄｏＡＲ，Ｃｅｒｄ６ｎＬＥ，ＭｅｄｉｎａＡＲ，ｅｔａ１．ＬｉｐｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍｔｈｅｍｉｃｒｏａｌｇａＰｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ［Ｊ］．ＥｕｒＪＬｉｐｉｄＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌ，２００７，１０９（２）：１２０－１２６．［１９］ＭｕｒａｋａｍｉＣ，ＴａｋａｈａｓｈｉＪ，ＳｈｉｍｐｏＫ，ｅｔａ１．ＬｉｐｉｄｓａｎｄｆａｔｔｙａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｏｆＣｈｌｏｒｅｌｌａ［Ｊ］．ＪＪｐｎＯｉｌＣｈｅｍＳｏｃ，１９９７，４６：４２３—４２８．［２０］ＬｉｕＪ，ＨｕａｎｇＪ，ＳｕｎＺ，ｅｔａ１．ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｉｐｉｄａｎｄｆａｔｔｙａｃｉｄｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆｐｈｏｔｏａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａｎｄｈｅｔｅｒｏｔｒｏｐｈｉｃＣｈｌｏｒｅｌｌａｚｏｆｉｎｇｉｅｎｓｉｓ：ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆａｌｇａｌｏｉｌｓｆｏｒｂｉｏｄｉｅｓｅｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＢｉｏｒｅｓｏｕｒＴｅｃｈｎｏｌ，２０１１，１０２（１）：１０６·１１０．［２１］ＷｏｏｄＬＷ．Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ—ｍｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌａ［Ｊ］．ＣａｎＪＦｉｓｈＡｑｕａｔＳｃｉ，１９８５，４２（１）：３８－４３．［２２］ＬｌｏｙｄＳＷ，ＴｕｃｋｅｒＣＳ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｒｅｅｓｏｌｖｅｎｔｓｙｓｔｅｍｓｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｆｒｏｍｆｉｓｈｐｏｎｄｐｈｙｔｏｐｌａｎｋｔｏｎｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ［Ｊ］．ＪＷｏｒｌｄＡｑｕａｃｕｈＳｏｃ，２００７，１９（２）：３６－４０．［２３］ＵＳＤＯＥ．Ｎａｔｉｏｎａｌａｌｇａｌｂｉｏｆｕｅｌｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｒｏａｄｍａｐ［ＥＢ／ＯＬ］．［２０１２—１０－０８］．ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗｌ．ｅｅｒｅ．ｅｎｅｒｇｙ．ｇｏｖ／ｂｉｏｅｎｅｒｇｙ／ｐｄｆｓ／ａｌｇａｌ—．ｂｉｏｆｕｅｌｓ＿ｒｏａｄｍａｐ．ｐｄｆ．不同萃取体系对小球藻藻渣成分的影响
作者：作者单位：
尹丰伟， 段珺， 高振， 郑洪立， 郑艳萍， 黄和， YIN Fengwei， DUAN Jun， GAO Zhen， ZHENGHongli， ZHENG Yanping， HUANG He
尹丰伟,段珺,高振,郑洪立,郑艳萍,YIN Fengwei,DUAN Jun,GAO Zhen,ZHENG Hongli,ZHENG Yanping(南京工业大学生物与制药工程学院,南京,211800)， 黄和,HUANG He(南京工业大学生物与制药工程学院,南京211800;南京工业大学材料化学工程国家重点实验室,南京210009)生物加工过程
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引用本文格式：尹丰伟.段珺.高振.郑洪立.郑艳萍.黄和.YIN Fengwei.DUAN Jun.GAO Zhen.ZHENG Hongli.ZHENG Yanping.HUANG He 不同萃取体系对小球藻藻渣成分的影响[期刊论文]-生物加工过程 2013(6)
