2015年12月 第23卷第23期 M0DERN 0NCOL0GY.DeC.2015.V0L 23.NO.23 LC3B—II在不同级别胶质瘤中的表达及意义 廉民学 ,孙念荣 ,姜海涛 ,梁晨 ,郭世文 Expression and significance of LC3 B——II in diferent graded glioma Lian Minxue ,Sun Nianrong ,Jiang Haitao ,Liang Chen ,Guo Shiwen Department ofNeurosurgery,The First Afilfiated Hospital,College ofMedicine, n Jiaotong University,Shaanxi 包n 710061, China; Department ofNeurosurgery,Shaanxi Luonan County Hospital,Shaanxi Luonan 726100,China. 【Abstract】 Objective:To evaluate the expression and significance of LC3B—II in different degraded of gliomas. Methods:Immunohistochemistry was employed to detect the expression of LC3B—II in 45 different degraded glio— mas,and the relationship between the expression of LC3B—II and clinical features of glioma was analyzed.Results: The expression of LC3B一1I in hi grade gliomas was higher than that in low grade gliomas,and the difference was statistically signiifcant.The expression of LC3B—I1 was not influenced by age and gender.Conclusion:In high grade gliomas,autophagy is more serious,and LC3B—II as a secondary pathological indicator of gliomas. 【Key words】glioma,autophagy,LC3B—II,immunohistochemistry Modem Oneology 2015。23(23):3407—3410 【摘要】 目的:探讨微管相关蛋白1轻链3B—II(microtubule—associated protein 1 light chain 3B—II,LC3B— II)在不同级别胶质瘤中的表达及意义。方法:免疫组化法检测45例不同级别胶质瘤中LC3B—II的表达,并 结合临床资料分析其与胶质瘤临床特征之间的关系。结果:LC3B—II在高级别胶质瘤组织中的表达高于低 级别胶质瘤组织,差异具有统计学意义。胶质瘤组织中LC3B—II的表达不受年龄、性别因素的影响。结论: 在高级别胶质瘤中细胞自噬较为严重,LC3B—II可作为胶质瘤的辅助病理指标。 【关键词】胶质瘤;细胞自噬;LC3B—lI;免疫组化 【中图分类号】R730.264 【文献标识码】A 【文章编号】1672—4992一(2015)23—3407—04 胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,增殖能力强,浸润性 DOI:10.3969/j.issn.1672—4992.2015.23.011 物 j。本研究采用免疫组织化学SABC法检测不同级别 生长,复发率高,死亡率高。胶质瘤的预后与其病理级别关 系密切,高级别胶质瘤尤其是间变性星型细胞瘤(WHO Ill 级)和胶质母细胞瘤(WHO IV级)平均生存期分别为30—36 胶质瘤组织中LC3B—II的表达情况,并结合临床资料分析 其与胶质瘤临床特征的关系和意义。 1材料与方法 1.1材料 个月和10~15个月…。胶质瘤细胞对放化疗的抵抗是临床 治疗中面临的主要难题。细胞自噬与多种疾病存在密切联 系 J。对于肿瘤,自噬具有双重调节作用:一方面可以抑制 肿瘤的发生;另一方面可维持肿瘤细胞的代谢和生长 J。 细胞自噬很可能是克服胶质瘤细胞放化疗抵抗,增加其药物 1.1.1标本选取西安交通大学第一附属医院2014年1 月至2014年12月行手术治疗的胶质瘤标本共45例,经病理 科证实均为胶质瘤。按WHO分级标准评为I级的有7例、II 级的有22例、III级的有12例、IV级的有4例。定义:I、II级 敏感性的潜在重要靶目标- ,,但对于临床上不同级别胶质 瘤,其瘤体内组织细胞自噬水平是否与肿瘤级别相关尚未见 国内外报道。LC3B—II是定量检测细胞自噬水平的标志 【收稿日期】2015—07—30 【基金项目】 高校基本科研业务费专项资金资助(编号: 1 191320102) 胶质瘤患者为低级别组,III、IV级胶质瘤患者为高级别组。 另外,研究人群中有男性患者26人(57.8%),女性患者l9 人(42.2%);50岁以上的患者21人(46.7%),50岁以下的 患者24人(53.3%)。 1.1.2试剂兔抗人LC3B抗体(美国Cell Signaling生物技 术公司);链霉亲和素一生物素复合物(streptavidin—biotin complex,SABC)试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);二 氨基联苯胺(3,3 diaminobenzidine,DAB)酶底物显色试剂 盒(福州迈新生物技术公司)。 1.2方法 【作者单位】 西安交通大学医学院第一附属医院神经外科,陕西 西安710061 陕西省洛南县医院神经外科,陕西究方向:神经胶质瘤的治疗。 洛南726100 【作者简介】廉民学(1973一),男,山西永济人,博士,主治医师,研 标本常规石蜡包埋制成4 m切片,采用免疫组化SABC 【通讯作者】郭世文(1962一),男,甘肃甘谷人,博士,主任医师,博 士生导师,主要从事胶质瘤的研究。E—mail:gsw1962 @126 con 法进行染色。石蜡切片常规脱蜡水化,微波抗原修复,依次 滴加过氧化物酶阻断液(37℃封闭lOmin)、10%非免疫性动 物血清(37 ̄C孵育40min)、LC3B一抗工作液(1:200稀释, 日 医学一口0H一∞nu 0口0一2015年12月曲∞ e,第23卷第23期 产口0州 )∞nurI 0盘oI ∞ dx MODERN ONCOLOGY。Dec.2015。VOL.23.NO.23 80000 60000 40000 20000 0 II III IV WHO stage Because this data does not conform to the nortnal distirbution,we choose muhipacks for graph representation.The horizont ̄line in the box represents the median of the set of data,and both ends of the hor- izontla line represent the data of maximum and minimum value of the group.The symbol” ”means the group shows a signiifcant difference compared with grade 1 glioma.} means P<0.O1.and means P<0.001.The symbol’’ ”means the group shows a singiifcant diference compared with grade II glioma.样means P <0.05.and槲t'Q0H ∞nu,means P<0.01.I 0 I10【s 啦 -ldx 图2 LC3B—II在不同级别胶质瘤中免疫组化染色的定量分析 Fig.2 Quantitative analysis of LC3B—II staining in different levels of gliomas 80000 60000 40000 20000 0 <50 years ≥50 years Age stage The median line of box and whisker plot represents the median data of the group.Both ends of the horizontla lines mean maximum value and the minimum value of the data set.The symbol”}”represents a statistically signiifcant diference in the expression levels of LC3B— II between the lower level group and the senior rgoup. meails P< 0.05. means P<0.01. 图3 LC3B—II在不同年龄组间的表达情况 Fig.3 The expression levels of LC3B—II in different age groups 细胞自噬对肿瘤具有抑制和促进双重作用。现有证据 表明,自噬一方面可清除细胞内异常蛋白聚集,减少细胞癌 变发生几率;另一方面则可提高肿瘤细胞对缺氧、药物暴露、 射线暴露的耐受性,促进肿瘤细胞的生存。在目前胶质瘤的 临床治疗中,肿瘤细胞对放、化疗的抵抗是最棘手的问题,其 产生根源主要来自于肿瘤细胞的凋亡抵抗作用。现已发现 胶质瘤的级别越高,放、化疗抵抗越严重,患者的疗效也越 差 12]。另有研究证实,胶质瘤的这种放、化疗抵抗作用,与 细胞自噬密切相关。例如,当对胶质瘤细胞给予天然产物白 藜芦醇处理时,该化合物可以通过抑制细胞自噬来提高替莫 唑胺的抗瘤活性” ;而Lomonaco发现,在胶质瘤干细胞中, 诱导自噬能够提高细胞对伽马射线的抵抗,而抑制自噬则能 增加细胞对射线的敏感性 。这些研究结果均提示自噬对 于胶质瘤细胞放、化疗抵抗的产生具有重要作用。 80000 60000 40000 20000 0 Female Male Gender hTe median line of box and whisker plot represents the medina data of the group.Both ends of the horizontla lines mean maximum value and the minimum value of the data set.The symbol” ”represents a statistically singiifcant difference in the expression levels of LC3B— II between the lower level group and the senior group. means P<0.001. 图4 LC3B—II在不同性别组间的表达情况 Fig.4 hTe expression results of LC3B—II in different gender rgoups 在我们的研究中,级别越高的胶质瘤组织中LC3B—II 的表达水平也越高,提示胶质瘤级别与细胞自噬水平呈正相 关。该发现与利用其他肿瘤(如肺癌、乳腺癌等)进行的研究 结果不同,可能是由于自噬在肿瘤中的作用依肿瘤的类型而 定,胶质瘤级别越高,自噬水平也越高,该发现提示细胞自噬 可能是高级别胶质瘤快速生长、代谢旺盛的一种代偿性方 式;另外,由于细胞自噬涉及一系列复杂的信号转导过 程,这种高自噬水平也可能是高级别胶质瘤本身发展出的一 种固有属性。然而不管从哪方面理解,我们的结果都支持高 级别胶质瘤中的高自噬水平有可能是胶质瘤浸润生长,放、 化疗抵抗及复发的重要原因。除此之外,细胞自噬水平与胶 质瘤病理级别之间的相关性提示自噬标记物如LC3B—II有 可能作为胶质瘤的辅助病理指标;但自噬水平能否作为胶质 瘤患者的预后指标、能否为术后采用何种辅助治疗提供指导 还有待进一步的临床研究去证实。 【参考文献】 [1] Chen ZP.Confusion and thinking for glioma treatment[C].Shiji— azhuang:The 5th Chinese Conference on Oncology&Cross—Strait Axademic Conference on Oncology,2008:669—672.[陈忠平.胶 质瘤治疗的困惑与思考[C].石家庄:第五届中国肿瘤学术大 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(编校:徐萌) 星形细胞肿瘤DEK的表达及其与病理分级的关系 冯天达,车东方,刘云会 Study on relationship between expression of DEK in astrocytic tumors and its pathology classification Feng Tianda,Che Dongfang,Liu Yunhui Department ofNeurosurgery,the Shen ̄ing Hospital ofChina Medical University,Liaoning Shenyang 110004,China. 【Abstract】Objective:To detect the expression of DEK in astrocytic tumors and analyze the relationship between that and pathology classiicatifon of astrocytie tumors.Methods:Immunohistochemistry technique was adopted to exam— ine the levels of expression of DEK protein in astroeytie tumors tissues and brain tissues and the system of image anal— ysis was adopted to detect the results.Results:The positive rates of DEK protein in each group were:aslroeytic tumors (86.6%),pilocytic astmeytoma(66.7%),diffuse astrocytoma(84.2%),anaplastic astrocytoma(93.3%),glioblas— toma(100.O%),brain tissues(33.3%).The expression of DEK protein in each group by immunohistochemieal stai— ning was:astrocytie tumors 23.57±8.12,pilocytic astrocytoma 14.23±5.31,diffuse astrocytoma 19.52±6.68,ana— ptastic astroeytoma 32.12±13.56,glioblastoma 36.92±15.61,brain tissues 11.61±1.85.The expression of DEK in astroeytie tumors was signiifcantly higher than in brain tissues(P<0.05).Conclusion:The over—expression of DEK has close relation with occurrence of astroeytie tumors.The expression of DEK provide a new way for clinic diag- nosis,treatment and prognosis judgment of astmeytie tumors. 【Key words】astrocytic tumors,DEK,immunohistochemistry,pathology classification Modem Oneology 2015,23(23):3410—3413 【摘要】 目的:检测星形细胞肿瘤组织中DEK的表达,分析其与病理分级之间的关系。方法:应用免疫组化 技术并用图像分析系统检测各级别星形细胞肿瘤组织及脑组织中DEK的表达水平。结果:各组免疫组化染 色阳性率分别为:肿瘤组织(86.6%),其中毛细胞型星形细胞瘤(WHO I级66.7%),弥漫性星形细胞瘤 (WHO II级84.2%),间变性星形细胞瘤(WHO III级93.3%),胶质母细胞瘤(WHO IV级100.0%);脑组织 (33.3%)。各组免疫组化染色强度分别为:肿瘤组织23.57±8.12,其中毛细胞型星形细胞瘤14.23±5.3I, 弥漫性星形细胞瘤19.52±6.68,间变性星形细胞瘤32.12±13.56,胶质母细胞瘤36.92-4-15.61;脑组织 【收稿日期1 2015—05—28 【基金项目】 辽宁省教育厅科学技术研究项目(编号:L2010643) 【作者单位】 中国医科大学附属盛京医院神经外科,辽宁con 沈阳110004 【作者简介】冯天达(1970一),男,吉林四平人,副教授,副主任医师,主要从事星形细胞肿瘤的基因诊断与治疗。E—mail:fen ianda@aliyun