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水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术研究

来源：意榕旅游网

植物病理学报

ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA　39(2):1742182(2009)

水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术研究

王子斌,左示敏,李刚,陈夕军,陈宗祥,张亚芳,潘学彪

(扬州大学江苏省作物遗传生理重点实验室,教育部植物功能基因组重点实验室,扬州225009)

摘要:以抗感反应不同的5个水稻品种为试验材料,在人工气候箱、控温室中进行水稻苗期抗纹枯病接种试验,并与田间相应的成株期抗性试验进行比较,研究水稻苗期快速鉴定技术。结果表明:85%的相对湿度为纹枯病菌侵染危害水稻苗期植株的适宜湿度;苗期5个水稻品种对纹枯病抗性差异极显著,可将其分为相对感病(Lemont、武育粳3号)和相对抗病

(YSBR1、Jasmine85、特青)2大类;接种叶龄对发病程度有显著的影响,5个品种在四叶期接种时的平均病级显著高于五

叶期接种的平均病级;苗期水稻品种间抗感差异小于田间鉴定试验结果,但两者间品种抗感趋势基本一致。苗期快速鉴定技术可用于大规模水稻品种(组合)的抗性筛选或初步鉴定。关键词:水稻;纹枯病;抗性;接种;鉴定

RapididentificationtechnologyofresistancetoricesheathblightinseedlingstageWANGZi2bin,ZUOShi2min,LIGang,CHENXi2jun,CHENZong2xiang,ZHANGYa2fang,PANXue2biao　(KeyLaboratoryofCropGeneticandPhysiologyofJiangsuProvince,KeyLaboratoryofPlantFunctionGenomics

ofMinistryofEducation,YangzhouUniversity,Yangzhou225009,China)

Abstract:Inordertoestablisharapididentificationtechnologyofresistancetosheathblight(SB)inriceseedlingstage,fivecultivarswithdifferentresistancetoSBwereadoptedinidentificationofseedlingstageinartificialclimateincubatorortemperature2controlledgreenhouseandtheresultswereverifiedthroughanexperi2mentatriceadultstageinfield.Theresultsshowedthatabout85%relativehumiditywassuitableforSBmy2celiumtodevelopinfectionstructuresandinfectriceseedlings.TheSBresistancelevelsamong5cultivarseed2lingsdifferedsignificantlyat1%levelsandcouldbedividedintotwogroups,relativelysusceptible(Lemont,Wuyujing3)andrelativelyresistant(YSBR1,Jasmine85,Teqing).Thesymptomseveredegreesofseedlingsatdifferentleaf2age(42leafstageor52leafstage)weresignificantlydifferentandtheaveragediseaseratingat42leafstagewassignificantlyhigherthanthatof52leafstage.Thedifferencesofresistanceamongdifferentcul2tivarsingreenhousewerelessthanthatinthefield,buttheresistant2to2susceptibleorderamongthecultivarswereconsistentwiththatinthefield.RapididentificationtechnologyofriceSBresistanceinseedlingstagecouldbeusedforscreeningresistanceofricegermplasmonalarge2scalescopeorprimaryresistanceidentifica2tion.

Keywords:rice;sheathblight;resistance;inoculation;identification

中图分类号:S435.111.42;S511.32　　　文献标识码:A　　　文章编号:041220914(2009)0220174209

　　水稻纹枯病(Rhizoctoniasolani)是世界性的水稻三大病害之一。其发病始于水稻植株基部,是一种叶鞘病害,也可危害叶片、茎秆甚至稻穗,造成

收稿日期:基金项目:通讯作者:第一作者:

2008208224;修回日期:2008210218农业部行业计划项目(nyhyzx072049)

严重的产量损失。我国南方一些省(区)已将该病

[1]

列为水稻生产的第一大病害。

迄今为止,水稻抗纹枯病遗传育种研究工作进

潘学彪,教授;左示敏,讲师;主要从事水稻抗纹枯病遗传育种研究;Tel:0514287972136,E2mail:shuidao@yzu.edu.cn王子斌(1973-),男,江苏高邮人,博士研究生,主要从事水稻抗纹枯病遗传研究。

　　2期

王子斌,等:水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术研究

175

展有限。其主要原因在于:水稻对该病害的抗性属于典型的数量性状,已经鉴定出的抗性QTL的效

[2～9]

应均较小。其次,环境特别是田间小气候的差异会明显影响抗性的表现,在一定程度上降低了抗性鉴定的可靠性。

至今虽然已研发了一些较有效的大田成株期纹枯病菌接种和抗性鉴定的方法,但其中一

[13]

(离体鉴定法)的重演性较差,而较些简易方法

[11,12]

(如嵌入法)则工作量较大,在劳精细的方法

动力价格昂贵的地区很难应用于大规模的接种鉴定试验。

为满足抗病遗传育种研究的需要,本试验以抗感程度差异明显的5个水稻品种为试验材料,在温室可控条件下,探索水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术。

[10～14]

装约5cm高的营养土(砂壤土,拌入适量尿素),再覆盖约1cm厚的灭菌土。按普通半旱秧田制作秧板。按宽窄行点播5份水稻品种(宽、窄行距分别为5、3cm),边行距离箱边约3cm,共形成5个宽窄行。每品种大约播种30粒芽谷。秧苗置于自然光照环境下生长,至五叶期(叶龄为4.5左右)间苗,保留20棵大小一致且均匀分布的秧苗,接种纹枯病菌后将食品搬运箱移入不锈钢支架内,封膜保湿。每次试验以1个食品搬运箱为1个重复,共用3箱形成3次重复。

根据6月份第1次试验的情况,在8月份的第

2次试验中,除重复五叶期接种试验外,又增加了

1　材料与方法

1.1　试验材料

四叶期(叶龄为3.5左右)接种处理,两者同时接

种纹枯病菌,同时调查(通过错期播种来实现)。每个接种时期均设置3次重复。1.2.2　人工气候箱中纹枯病菌发病的适宜湿度试验　为明确纹枯病菌侵染危害水稻的适宜湿度,在小型人工气候箱中进行纹枯病菌发病的适宜湿度预备试验。秧苗准备方法同前,芽谷点播于圆形塑料盆钵,(盆钵高20cm,直径15cm)。每品种点播4盆,五叶期间苗,每盆保留5株大小一致秧苗,接种纹枯病菌后将盆钵移入人工气候箱。人工气候箱温度设为30℃、相对湿度设为75%、80%、85%、90%、95%、100%,观察纹枯病菌菌丝生长及其在水稻叶鞘上致病情况。

1.2.3　接种物准备和接种　稻谷浸泡后置于

1000mL三角瓶中灭菌,接种中等致病力的纹枯病

所用5个水稻品种分别为Lemont、武育粳3号(Wuyujing3)、YSBR1、特青(Teqing)和Jasmine85(J285)。其中,Lemont是国内外公认的感病品种,特青和Jasmine85则是公认的相对抗病品种。YSBR1是本研究组选育并经过多年鉴定为较抗病的新种质(曾用名:91SP),武育粳3号则是江苏省目前大面积应用的迟熟中粳稻品种,较感纹枯病。

1.2　试验设计

1.2.1　温室苗期接种鉴定试验　试验分别于2007年6月和8月在扬州大学江苏省作物遗传生

理重点实验室控温室中进行,控温室长、宽、高分别为3.5、3.0和2.8m。在控温室中搭建70cm高的平台,平台四周为5cm高的矮沿,其上铺有厚塑料薄膜,薄膜内注水后形成一长方形浅水池。在浅水池内搭建矩形不锈钢管支架,支架整体罩上尼龙薄膜,尼龙薄膜下部四周压入水中保湿。支架长、宽分别为1.8、1.0m,高度分别为0.5、0.8和

1.2m(通过采用可收缩钢管的方式实现),用以调

菌株RH29(由江苏省农业科学院植物保护研究所

提供),于28℃暗培养7～10d,待谷粒表面布满菌丝后用作接种物。紧贴每株水稻小苗基部的两侧各放置1粒接种物,接种时保持土表湿润不积水。接种完毕立即将食品搬运箱移入不锈钢支架内。1.2.4　苗期病情调查及统计　每天观察小苗生长情况,当感病对照Lemont出现死亡时(接种后约5～7d),撤去薄膜以降低湿度,阻止病情的进一步发展,并迅速完成病情调查。调查指标为病斑高度、“苗挺高”(土表至秧苗拉直后最高叶尖的高度),计算相对病级。相对病级=(病斑高度/

)×9。“苗挺高”

以20株小苗的相对病级平均数代表该品种病级,用DPS3.01软件(所有人:唐启义)进行各品种病级的方差分析和多重比较。

节膜内湿度。控温室内用高功率空调将膜内温度调节至28～30℃。

水稻品种浸种催芽后,选取芽长基本一致的萌发芽谷,点播于食品搬运箱中。搬运箱内(外)径长45(48)cm、宽35(37)cm、高10(11)cm。箱内

176

植物病理学报39卷

1.3　大田成株期验证试验

体,接种24h左右便可在植株上发现水渍状纹枯病病斑。当湿度降至80%以下时,植株表面观察不到菌丝体,病斑出现时间亦被推迟。据此,作者认为,85%左右的相对湿度是纹枯病菌侵入稻株和致病的最适宜湿度。此后的苗期鉴定试验中均采用这一湿度范围作为诱导病原菌入侵和致病的湿度指标。

2.2　水稻苗期对纹枯病抗性的鉴定

上述5份水稻品种2007年5月7日播种,6月7日移栽。随机区组设计,2次重复。每品种栽植4行形成1小区,每行12株。于分蘖末期采用牙签嵌入法接种纹枯病菌RH29,接种并调查中间2行20株(不包括行两端各1株)。接种时每株接种3个大分蘖(含主茎),接种时不破坏叶鞘的抱茎状态。分别于各品种抽穗后30d左右采用“叶

[14]

鞘位法”标准调查病级。以20株病级平均数代表该品种病级,用DPS软件进行各品种病级的方差分析和多重比较。

[11]

2　结果与分析

2.1　纹枯病菌入侵和发病最适宜相对湿度

表1、表2为2007年6月(五叶期)和8月(四

叶期)2次苗期温室接种鉴定试验合并数据的方差分析和多重比较。结果表明,5个水稻品种间存在着极显著的抗性差异,可将其分为2大类:相对感病类(Lemont、武育粳3号)和相对抗病类

(YSBR1、特青、Jasmine85)(图2)。这一结果与

观察发现,空气相对湿度越高,菌丝体生长越

快,相对湿度达到100%时,菌丝体的日伸长距离可达15～20cm(图1)。进一步的观察发现,当相对湿度达到或超过90%时,菌丝体仅需1.5～2d的时间就可布满小苗的全部外表面,但所有小苗植株表面不出现任何典型的纹枯病症状,品种间观察不到抗性差异。这表明,90%甚至更高的相对湿度有利于纹枯病病原菌生长,但并不是纹枯病菌入侵水稻植株和致病的适宜湿度。当湿度在85%左右时,在小苗的基部靠近接种点位置可见白色短菌丝

多年来这5个品种在田间的抗性表现基本吻合。

2.3　不同苗龄的稻苗接种后病情发展的差异在2007年6月份的试验中,最感病的品种Lemont从接种至死亡经历了6d时间。在这6d期间,水稻植株由于受到温室玻璃和保湿尼龙膜的双重遮光,加上高温的作用,植株明显窜高,表现瘦弱,这可能会影响鉴定结果的可靠性。因此,8月份在重复五叶期接种试验的同时增加了四叶期接种处理。

Fig.1　ThegrowthofmyceliumofRhizoctoniasolanionthesurfaceofrice

plantinsaturatedhumidity(18hafterinoculation)

　　2期

王子斌,等:水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术研究

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Table1　Theanalysisofvariancefordiseaseratingdataatdifferent

riceseedlingstageingreenhouse

Originofvariation

VarietiesErrorTotalvariation

df42529

Sumofsquare115.76145.320161.081

Meansquare28.9401.813

Fvalue15.964

Significantlevel

Table2　Themultiplecomparisonfordiseaseratingdataatdifferent

riceseedlingstageingreenhouse

VarietiesLemontWuyujing3YSBR1TeqingJ285

Averagediseaserating

7.275.612.772.712.30

5%significantlevel

abccc

1%significantlevel

AABBB

:Datainthetablewerethecombinedresultsof52leafstageand42leafstageinoculationexperimentsinseedlingstage.

Fig.2　Diseaseperformanceofriceseedlingsstageon6days

afterinoculationingreenhouse

ThericevarietieswereTeqing,YSBR1(91SP),Wuyujing3,J285andLemontrespectively(fromlefttoright).

178

植物病理学报39卷

　　表3、表4为2007年8月份四叶期和五叶期试验数据的方差分析和多重比较结果。虽然YSBR1与特青的抗性位次发生了互换,但品种间的抗性差异基本和表2保持一致。由表3得出可知:接种秧龄对发病程度有显著的影响,四叶期接种的5个品种的平均病级(3.23级)显著高于五叶期接种的平均病级(2.86级)。这表明,苗龄较小时,从接种到最感病品种充分发病所需的时间以及秧苗在温室保湿状态下滞留的时间较短,秧苗素质受鉴定环境的影响较小,有利于提高鉴定结果的可靠性。

2.4　大田成株期接种验证试验

于苗期,可能是由于这2个品种在苗期鉴定时幼苗生长速度较快,“苗挺高”较高,因而相对病级较

轻;但在田间鉴定时,这2个品种生长繁茂,易形成有利于发病的小气候,因而发病相对较重。参试品种在大田对水稻纹枯病的抗感趋势与苗期的基本一致,即Lemont和武育粳3号发病相对较重,而

YSBR1等发病相对较轻。

将2次室内鉴定结果视为2个独立区组,用2个区组的平均数代表品种1次鉴定的病级数据,则可将室内和田间鉴定的结果合并分析如表7～表9。品种间抗感差异极显著,抗感趋势苗期与大田基本一致,但田间鉴定试验中5个品种平均病级(5.77)极显著高于苗期5个品种平均病级(3.95)。这表明苗期鉴定可能会缩小品种间抗感差异。因此,水稻纹枯病苗期鉴定可用于大规模的抗性筛选或初步鉴定试验,而不太适合抗性QTL的精细定位研究。表5、表6为5个参试品种在田间成株期抗性验证试验结果。由表6可知,大田试验中品种平均病级分布为高度感病(7.75级)至抗病(2.50级),品种间抗感差异大于苗期鉴定(幅度为7.27级至

2.30级)的差异。特青和J285的田间病级明显重Table3　Theanalysisofvariancefordiseaseratingdata

atdifferentleaf2age(42leafstageand52leafstage)ofriceseedlingstageingreenhouse

Originofvariation

GroupsVarieties(A)Inoculatestage(B)

A×BErrorTotalvariation

df24141829

Sumofsquare

0.27848.7531.0120.2183.26353.524

Meansquare

0.13912.1881.0120.0540.181

Fvalue0.76767.2405.5830.300

Significantlevel

0.47900.0300.874

Table4　Themultiplecomparisonfordiseaseratingdata

atdifferentleaf2age(42leafstageand52leafstage)ofriceseedlingstageingreenhouse

VarietiesLemontWuyujing3TeqingYSBR1J285

Averagediseaserating

5.363.482.252.102.03

5%significantlevel

abccc

1%significantlevel

ABCCC

　　2期

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Table5Theanalysisofvariancefordiseaseratingdataatriceadultplantstageinfield

Originofvariation

GroupsVarietiesErrorTotalvariation

df1449

Sumofsquare

0.00931.0060.32631.341

Meansquare

0.0097.7520.082

Fvalue0.11095.110

Significantlevel

0.7560.000

Table6　Themultiplecomparisonfordiseaseratingdataatriceadultplantstageinfield

VarietiesLemontWuyujing3TeqingJ-85YSBR1

Averagediseaserating

7.756.556.305.752.50

5%significantlevel

abbccd

1%significantlevel

AABBBC

Table7　Thecombinedanalysisofvariancefordiseaseratingdataatriceseedling

stageandadultplantstageinfield

OriginofvariationGroupsVarieties(A)Methods(B)

A×BErrorTotalvariation

Df1414919

Sumofsquare

6.22754.79116.59812.03711.901101.555

Meansquare

6.22713.69816.5983.0091.322

Fvalue4.70910.35912.5522.276

Significantlevel

0.0580.0020.0060.141

Table8　Thecombinedmultiplecomparisonfordiseaseratingdataofdifferentvarieties

atriceseedlingstageandadultplantstageinfield

VarietiesLemontWuyujing3TeqingJ-85YSBR1

Averagediseaserating

7.375.954.414.002.57

5%significantlevel

aabbccdd

1%significantlevel

AABBCBCC

Table9　Thecombinedmultiplecomparisonfordiseaseratingdataofdifferent

identificationmethodsatriceseedlingstageandadultplantstageinfield

MethodsIdentificationinfieldIdentificationinseedlingstage

Averagediseaserating

5.773.95

5%significantlevel

1%significantlevel

180

植物病理学报39卷

3　小结与讨论

3.1　建立水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术体系

环境趋于一致,数据可靠性高,便于观察,较适合在

苗期开展较大规模的抗性鉴定研究。

3.2　关于水稻纹枯病苗期接种鉴定技术的局限

的意义

为了弥补大田成株期抗性鉴定中工作量大、接

种鉴定周期长、易受小环境影响等缺陷,人们尝试过多种方法进行水稻对纹枯病抗性的评价。

利用在透明有机玻璃盒中湿纱布保湿的方法

[13]

进行离体接种鉴定便是其中的一种方法。此法由于离体器官会迅速黄化,更重要的是器官离体后处于应激反应状态,体内代谢紊乱,防卫系统可能被启动,因此,此法鉴定的结果参考价值有限。

“雾室(mistchamber)”苗期接种鉴定是一种

[15]

活体鉴定方法。这种鉴定方法是将幼苗置于接近饱和的湿度下,再配合高强度接种,结果菌丝体迅速包裹幼苗致其腐烂死亡。一些单位曾用此法鉴定水稻品种抗性,结果认为品种间不存在抗性差异。也有研究者曾认为这种苗期鉴定方法的结果与田间实际情况不符,因而放弃了苗期鉴定的方法。本试验结果表明,饱和湿度是纹枯病菌菌丝体生长和伸长的最适相对湿度,但不是形成侵染结构、入侵危害稻株的最适湿度。85%的相对湿度才是纹枯病菌侵染苗期水稻的最适宜湿度。只有将相对湿度降至85%左右,才能在苗期有效地鉴别品种的抗感差异。这是苗期活体接种鉴定方法可行性的关健所在。

[16]

Jia等采用“微室(micro2chamber)”苗期接种鉴定方法对“雾室”苗期接种鉴定方法进行了改进。其采用2～3L的透明塑料瓶(如通常使用的雪碧、可乐瓶),去除底部后罩在幼苗上,底部入土,上口去掉瓶盖,这样,便创造了一个适合纹枯病菌生长和侵入的“微室”环境。据称,“微室”内的相对空气湿度大致在80%左右。但是,“微室法”可能并不十分精细,不同温室的“微室”之间可能存在湿度差异,而且同一温室不同位置的“微室”之间,也可能因环境的不同,而很难形成一致的湿度条件。此外,大量的“微室”使得在病害发展过程中对病情的观察显得不够方便。即便如此,该法与传统“雾室法”相比,已经是一个大的进步。

本研究通过构建较大型的保湿环境,采用调节薄膜支架的高度和室内温度来维持膜内的湿度。只要做好预备试验,这样的设计能使不同幼苗所处

性

通过本试验,初步建立了水稻纹枯病苗期温室接种鉴定技术和方法,但该方法并不能取代田间成株期的抗性鉴定。首先室内鉴定只是模拟田间自然状态下的抗性鉴定,还必须通过田间的重复鉴定加以确认。其次,某些因素可能对不同品种,甚至同一品种种子的发芽、出苗以及苗期生长产生影响,这些因素导致的差异在田间成株期可能已不复存在,但在苗期,这种差异却可能对鉴定结果有明显的影响。

在苗期温室鉴定和成株期田间鉴定中,尽管不同品种的抗感趋势大体一致,但由于上述因素的影响,苗期鉴定中不同品种对纹枯病的抗感差异可能小于田间鉴定的结果。本试验结果证实了这一点。因此,作者认为,苗期鉴定技术主要应用于大规模的抗性筛选或初步鉴定试验,而不适合抗性QTL的精细定位研究。因为QTL精细定位研究需要尽可能充分地反映抗感差异。

3.3　对水稻纹枯病苗期接种鉴定主要技术环节

的认识

水稻抗纹枯病苗期接种鉴定技术初步建立,许多技术环节还不够成熟,尚需进一步细化和标准化,以便使这一技术更好地应用于水稻大规模抗纹枯病鉴定和遗传育种研究。以下是作者对一些重要技术环节的认识,提出来供同行参考和讨论。

1)试验环境中空气相对湿度和温度的调节:在以往的研究中发现(资料未发表),当空气相对湿度低于75%时,纹枯病菌生长不明显,在水稻植株上也不形成明显病斑。为发展水稻对纹枯病抗性的苗期快速鉴定技术,作者首先就病原菌生长、植株发病与相对湿度之间的关系在人工气候箱中进行了预备试验。

试验表明,28～30℃的温度和80%～85%

[16]

(80%为Jia等研究结果,85%为本试验结果)的相对湿度是较适宜的水稻苗期纹枯病抗性鉴定的温湿条件。实践中可通过改变支架的高度和调节温室的温度等措施来实现。这2项措施需根据具体情况结合起来使用。这里所说的具体情况包

　　2期

王子斌,等:水稻抗纹枯病苗期快速鉴定技术研究

181

括不同温室和薄膜的透光性能、试验季节的室外光照强度和气温等。此外,病原菌和秧苗对温度的适应范围均较宽,而病原菌致病要求的空气相对湿度范围则较窄,因此,通过温度调控膜内湿度的空间余地较大。在本研究的试验环境下,薄膜覆盖的上

表面面积约1.8m,当膜内温度为30℃时,将支架从50cm升高至80cm,湿度会下降3个百分点(从91%降至88%);当温度降至28℃时,湿度可降至85%左右。

将试验置于离地工作台(bench)上进行(如材料与方法部分所述),是一项重要的技术环节。因为在寒冷季节进行试验时,置于温室地表的试验器材(如本试验采用的食品搬运盒)附近的温度会明显低于膜内上层空气中的温度,造成膜内湿度按高度递降,土表(接种点)附近的湿度可能达不到病原菌向上生长和侵染稻株的要求。

2)秧苗健壮程度的调控:试验表明,壮苗关系时萌发。作者采取的办法是:用相对高的水温

(32℃)恒温浸种,当发现一些品种如Lemont的谷

壳已透明,胚已明显膨胀且个别种子已开始破胸时(浸种时间不到2.5d),将其从水中提出至阴凉(20℃)处,待其他品种也达到这一状态(1d后)时,再将Lemont种子回到温水中浸泡,最终所有品种同时进入催芽阶段,萌发整齐。

不同品种苗期生长速率可能不同,同时播种但叶龄进程可能不同,“苗挺高”因此可能出现显著差异。对于“苗挺高”高的品种而言,即使病斑的绝对高度无差异,但相对病情却可能较轻。在本试验中,特青和J285苗期生长较快,“苗挺高”较高,对它们的病情评定可能偏轻(与田间鉴定的结果相比)。在今后的试验中可以考虑推迟它们的出苗期(迟浸种或短暂终止它们的浸种,以推迟萌发),以保证所有品种在接种时叶龄基本一致。但这需要预备试验,工作量大,因而限制了这一措施在很多情况下的采用。

同一品种的不同种子,发芽势间也存在差异。[16]

Jia等提出选取饱满度一致的种子,以及本研究提出精选发芽一致的种子,都是在播种阶段提高成苗一致性的有效措施。

4)病情的适宜调查时间的确定:苗期接种鉴定试验中秧苗小,其中感病对照从接种至死亡的时间短,试验中最适宜调查的时间段很短。调查的时间稍有延误(哪怕只延误了半天),则品种间的抗感差异将被明显缩小。因此,适时调查是非常重要的试验环节。本研究中便曾遇到这样的问题:午后观察时,Lemont尚未出现死亡,但傍晚时已可见少量死亡,此时需立即连夜调查。如于第2d早晨开始调查,Lemont已全部死亡,调查明显偏迟,结果可靠性降低。参考文献

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TheoryApplied

到苗期纹枯病抗性鉴定的质量,应尽可能在自然光照条件下培育壮秧。但是,这样的要求限制了能够进行试验的季节(日均温大约在15～30℃的范围内),降低了温室的利用效率。如在较寒冷的季节进行苗期接种试验时,育苗应在透光较好且不积露的玻璃温室、不覆盖薄膜的条件下进行。如在较炎热的季节进行试验时,室外育苗场地则应有较大面积遮光降温的条件,以便正午前后进行遮挡。这些措施会使秧苗素质有一定程度的提高,但仍达不到壮秧的标准。由于秧苗素质可能会对鉴定结果产生影响,因此不能简单地将不同时间的鉴定结果拿来比较。一般应在不同季节进行试验,用平均值来代表各品种的发病情况。

培育四叶期壮苗用于接种鉴定也是提高试验质量的关键措施。这是因为接种的四叶期秧苗进入薄膜保湿环境后,至适合病情调查的时间(最感病对照开始死亡)较短,在一定程度上减轻秧苗“窜高”,能保证秧苗在较好的“体质”下进行鉴定试验。

3)秧苗发育进程一致性的调节:种子从萌发

至成苗接种,仅生长12d。高质量的试验要求秧苗的发育进程一致,但实践中要在这么短的时间内,保证不同品种秧苗发育进程的一致性相当困难。

不同品种谷壳厚度不同,内外颖钩合程度不同,因而吸水速率有差异,同时浸种却可能不会同

182

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责任编辑:曾晓葳

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