分析与检测 中 国 酿造 ２０１７年第３６卷第８期 总第３０６期 ・１６１・ 气相色谱直接进样法与顶空进样法测定白酒中甲醇的比较 罗明，成桂红，钟红霞，王健，徐跃成 （四川省食品药品检验检测院，四川成都６１０１００） 摘要：该实验对气相色谱直接进样法与顶空进样法测定白酒中甲醇的方法进行比较。直接进样法测定按ＧＢ／Ｔ ５００９４８—２Ｏｏ３《蒸 ．馏酒与配制酒卫生标准的方法分析》进行，并对色谱条件进行了改进及优化；顶空进样法测定时，对取样量、加热温度进行优化，建 立最佳色谱条件。两种方法的线性范围为０．０３２￣１．２８８ ｇ／Ｌ，线性相关系数Ｒ均＞Ｏ．９９９。直接进样法的检出限为０．０４ ｇ几，加标回收率 为９０％ １ １０％，相对标准偏差（ＲＳＤ）＜１％，方法不确定度结果为（０．１６６￣０．０１２）ｇ／Ｌ；顶空进样法的检出限为０．０２ ｇ门Ｌ，加标回收率范 围为９０％１１０％，相对标准偏差（ＲＳＤ）＜３％，方法不确定度结果为（Ｏ．１６０￣０．０１２）ｇ／Ｌ。以两种方法测定市售２０种白酒样品，测定结果 经配对舱验，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。直接进样法无前处理过程，简单快速精密度高；顶空进样法检出限更低，灵敏度更高。 关键词：气相色谱直接进样；项空进样；甲醇；白酒 中图分类号：０６５７．７ 文章编号：０２５４—５０７１（２０１７）０８—０１６１—０４ ｄｏｉ：ｌ０．１１８８２／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５４—５０７１．２０１７．０８．０３５ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｎｉｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｎ ｉｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆｍｅｔｈａｎｏｌ ｎ ｉＢａｉｉｆｕ ＬＵＯ Ｙｕｅ，ＣＨＥＮＧ Ｇｕｉｈｏｎｇ，ＺＨＯＮＧ Ｈｏｎｇｘｉａ，ＷＡＮＧ Ｊｉａｎ，ＸＵ Ｙｕｅｃｈｅｎｇ （ＳｉｃｈｕａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＰｒｏｄｕｃｔＱｕａｌｉｔｙＳｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ＆Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６１０１００，ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｂａｉｊｉｕ ＷａＳ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｎｉｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ ｄｉ— ｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ＧＢ／Ｔ ５００９．４８—２００３ ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ｓａｍｐｌｉｎｇ．ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｎｄ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ．Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｖｏｌｕｍｅ，ｈｅａｔｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｏｆ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０．０３２ ｇｍ ｔｏ １．２８８ ｇｍ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｄｉｒｅｃｔ ｎｉｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ Ｏ．０４ ｇｍ，ｔｈｅ ａｄｄｉｎｇ ｓｔａｎｄａｒｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｒａｎｇｅ ｗａｓ ９０％一１ １０％，ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ（ＲＳＤ）＜１％，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｈｏｄ ｔｗａｓ（０．１６６￣０．０１２）ｇｍ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆｈｅａｄｓｐａｃｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ０．０２ ，ｔｈｅ ａｄｄｉｎｇ ｓｔａｎｄａｒｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｒａｎｇｅ ｗａｓ ９０％一１ １０％， ＲＳＤ＜３％，ａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ ｏｆｔｈｅ ｍｅｈｏｄ ｔｗａｓ（Ｏ．１６０￣０．０１２）ｇ／Ｌ．Ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ２０ ｋｉｎｄｓ ｏｆＢａｉｊｉｕ ｓａｍｐｌｅｓ，ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｐａｉｒｅｄ ｔ ｔｅｓｔ，ａｎｄ ｈｔｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｈａｄ ｎｏ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｒｏｃｅｓｓ，ｉｔ ｗａｓ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｌｏｗ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆｈｅａｄｓｐａｃｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ，ａｎｄ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；ｍｅｔｈａｎｏｌ；Ｂａｉｊｉｕ 甲醇是一种无色透明、易挥发性液体，在人体内代谢 产物为甲醛、甲酸，有很强的毒性，尤其对视神经损害严 重，误饮过量的甲醇会引起失明或中毒死亡【 。白酒是以 粮谷、薯类、水果、乳类等为主要原料，经发酵、蒸馏、勾兑 １材料与方法 １．１材料与试剂 乙醇（色谱纯）：天津四友精细化学品有限公司；甲醇 色谱标样（纯度为９９．５％）：天津市化学试剂研究所；超纯 水（Ｅｇ导率为１８．２ＭｆＤ：Ｍｉｌｌｉ—Ｑ超纯水机制备；２０种白酒（编 号为１ ～２０ ：市售。 而成的饮料酒，白酒中少量的甲醇可构成白酒不同的风格， 过量则有害健康。目前，甲醇的检测方法有比色法、滴定法、 生物传感器法、液相色谱法、气相色谱法，气相色谱法是 世界上公认的测定酒中甲醇的方法［６１。ＧＢ／Ｔ ５００９．４８—２ｏ０３ 《蒸馏酒与配制酒卫生标准的方法分析》中甲醇的测定方 取色谱纯乙醇用超纯水配制成体积分数６０％的乙醇 溶液，用作溶剂及试剂空白；标准储备液的配制：取１ ｍＬ 甲醇色谱标样称质量为０．８０５ ０ ｇ，用体积分数６０％乙醇溶 液定容至５０ ｍＬ，得１６．１ ｇ／Ｌ甲醇标准储备液，备用。标准使 用液的配制：分别准确吸取标准储备液０．０２ ｍＬ、０．０５ ｍＬ、 ０．１０ ｍＬ、０．２０ ｍＬ、０．４０ ｍＬ、０．８０ ｍＬ于１０ ｍＬ容量瓶中，用 体积分数６０％乙醇溶液定容至１０ ｍＬ，现用现配。 １．２仪器与设备 法有比色法和气相色谱直接进样法川，比色法操作繁琐、 费时【 ，气相色谱法采用填充柱恒温进样，对成分复杂的 白酒分离效果差【９］。本实验拟选用毛细色谱柱对气相色谱 直接进样法和顶空进样法分别进行色谱条件优化，用最佳 色谱条件分别进行方法学验证，目的是便于选择白酒中甲 醇含量测定的方法。 收稿日期：２０１７．０２．２７ ７８９０Ｂ气相色谱仪（ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＧＣ）配氢火 作者简介：罗弱（１９８６．），女，工程师，本科，主要从事食品检验方面的工作 ・１ ６２・ ２０１ ７ Ｖｏ１．３６ Ｎｏ．８ Ｓｅｒｉａｌ Ｎｏ．３０６ Ｃｈｉｎａ Ｂｒｅｗｉｎｇ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ 焰检测器（ｌｆａｍｅ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｏｒ，ＦＩＤ）及ＯｐｅｎＬＡＢ￣２作 站、７６９７Ａ顶空（Ｈｅａｄｓｐａｃｅ，ＨＳ）自动进样器、ＨＰ－ＩＮＮＯＷＡＸ 毛细色谱柱（３０ ｍｘ０．３２ ｍｉｎｘ０．５０ ｍ）、ＨＰ－ＩＮＮＯＷＡＸ毛 接进样法测白酒中甲醇的色谱条件为：进样体积０．５ Ｌ， 进样口温度２２０℃，柱流速０．８ ｍＬ／ｍｉｎ，分流￣Ｌ５０：１，程序升 温３０℃保持８ ｍｉｎ，以２￣Ｃ／ｍｉｎ升至７０℃，保持１ ｍｉｎ，再以 ５０％／ｍｉｎ升至１９０ ｏ【＝，保持４ ｍｉｎ。此条件下甲醇峰峰形好， 细色谱柱（３０ ｍｘ０．２５ ｒｎｍｘ０．２５ ｍ）、ＣＰ．ＷＡＸ５７ＣＢ色谱柱 （５Ｏ ｍｘ０．２５ ｍｍｘ０．２０ ｍ）：美捷伦科技有限公司； 白酒样品中甲醇峰的分离度为１．２６８，直接进样法甲醇标准 ２０１０ｐｌｕｓ气相色谱仪配氢火焰检测器（ｆｌａｍｅ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｏｒ，ＦＩＤ）及ＧＣｓｏｌｕｔｉｏｎＩ作站：日本岛津公司；Ｍｉｌｌｉ－Ｑ 超纯水机：密理博中国有限公司；ＸＳ１０５电子天平：瑞士 ＭＥＴＴＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ集团；吉尔森移液器（１００￣５ ０００ ＩｘＬ）： 法国ＧＩＬＳ０Ｎ公司。 ｌ＿３方法 １．３．１色谱条件 （１）直接进样法 Ａｇｉｌｅｎｔ ＣＰ．ｗａｘ５７ＣＢ色谱柱；程序升温：３０℃保持８ ｍｉｎ， 以２￣Ｃ／ｍｉｎ升至７０℃，保持１ ｍｉｎ，再以５０％／ｍｉｎ升至１９０℃， 保持４ ｍｉｎ；进样口温度：２２０℃；检测器温度：２８０ ０Ｃ；分流 比：５０：１；柱流速：０．８０ ｍＬ／ｍｉｎ；定量方法：外标法；进样体 积：０．５ Ｌ。 （２）顶空进样法 Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰ—ＩＮＮＯＷＡＸ色谱柱；程序升温：４０ ｑｃ保持 ８ ｍｉｎ，以５℃／ｍｉｎ升至１００℃，不保持，再以４０℃／ｍｉｎ升至 １８０。【＝，保持４ｍｉｎ；进样口温度：２２０ｃｃ；检测器温度：２５０℃； 分流比：６０：１；柱流速：１ ｍＬ／ｍｉｎ；定量方法：外标法；进样 体积：１ ｍＬ；顶空自动进样器条件：加热箱９０℃，定量环 １００℃，传输线１ １０℃，样品瓶平衡时Ｉ＇￣２０ ｍｉｎ，进样持续时 间：０．５ ｍｉｎ，进样循环３６ ｍｉｎ。 １．３．２测定步骤 直接进样法取混匀的标准使用液及洒样约１ ｍＬ于进 样小瓶，待测；顶空进样法准确取混匀的标准使用液及酒 样各２ ｍＬ于２０ ｍＬ顶空瓶中，压紧瓶盖，待测。待仪器工作 正常且稳定后，依次对标准使用液各浓度梯度、空白、加 标回收、样液进行测定。 ２结果与分析 ２．１直接进样法色谱条件优化 甲醇沸点为６４．７ ｃｃ ，选择气化温度８０℃、９０℃、１００℃、 １２０℃、１５０℃、２００ ｃＣＩ、２２０℃，程序升温条件：４０℃保持５ ｍｉｎ， 以５ ｑＣ／ｍｉｎ速率升至２００ ｏＣ，保持１ ｍｉｎ，检测器：２８０ ｏＣ，分 流ＬＬ：４０：１，进样体积：０．５ Ｌ，在此条件下对甲醇标品定性 并比较峰面积，结果表明，气化温度不低于１５０ ｏＣ时，甲醇 峰峰面积趋于稳定且峰形好，因此选择１５０℃作为进样口 温度。但是对于成分比较复杂的白酒样品时会发现甲醇峰 和其他峰包裹的现象，继续做了如下优化：选择进样口温 度２２０℃，检测器２８０℃条件不变情况下，分别对初始柱温 保持时间、初始柱温、初始柱温保持时问、柱流速、程序升 温速率、分流比、进样量进行一系列优化试验… ，确定直 溶液色谱图及白酒样品色谱图见图１。 ７ ０ ６・Ｏ 至５．０ ４．０ 酱３．０ ２ Ｏ １ ０ Ｏ．Ｏ ｌ Ｏ Ｏ Ｏ 旦 ｊ型 保目时Ｐｊ／ｍｉｎ 图１ 直接进样法甲醇标准溶液（Ａ）及白酒样品（Ｂ）色谱图 Ｆｉｇ．１ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ａ）ａｎｄ Ｂａｉｊｉｕ ｓａｍｐｌｅ（Ｂ）ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ２．２顶空进样法色谱条件优化 ２．２．１ ＨＰ—ＩＮＮＯＷＡＸ毛细色谱柱优化 ＨＰ．１ＮＮＯＷＡＸ色谱柱的最低使用温度为４０℃，初始温 度４０℃不变的情况下，对初始温度保持时间、柱流速、程序 升温速率、分流比、进样量参照直接进样法进行优化，甲醇 峰不能得到理想的优化条件，于是考虑换用ＨＰ—ＩＮＮ０ｗＡｘ 色谱柱，在上述优化条件下继续优化，得到顶空进样的最 佳色谱条件：程序升温为４０℃保持８ ｍｉｎ，以５ ｏＣ／ｍｉｎ升至 １００℃，不保持，再以４０℃／ｍｉｎ升至１８０℃，保持４ ｍｉｎ；进样 口温度：２２０℃；检测器温度：２５０℃；分流比：６０：１；柱流 速：１ ｍＬ／ｍｉｎ；顶空自动进样器条件：加热箱９０℃，定量环 １００℃，传输线ｌｌ０℃，样品瓶平衡时间２０ ｍｉｎ，进样持续时 间０．５ ｍｉｎ，进样循环３６ ｍｉｎ。 ２．２－２样品瓶加热温度及取样量优化 因为甲醇沸点为６４．７℃，样品瓶加热温度分别设为６０℃、 ７０℃、８０℃、９０℃、１００℃进行试验，６０℃、７０℃响应值较小， １００℃有拖尾峰，因此确定９０℃为最佳样品瓶加热温度。样 品瓶中分别取１ ｍＬ、２ ｍＬ、３ ｍＬ、４ ｍＬ、５ ｍＬ进行试验。结果 ５ ４ ４ ３ ３ ２ ２ 分析与检测 如 ∞ 如 加 中 国 酿ｍ 造 ２０１７年第３６卷第８期 总第３０６期 ・１６３・ 表明，进样量不低于２ ｍＬ时甲醇峰峰面积几乎无变化，确 定标准溶液及样品取样量为２ ｍＬ。在此优化条件下，测得 白酒样品中甲醇峰分离度为２．８２，顶空进样法甲醇标准溶 表２直接进样法与顶空进样法的精密度比较 Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｏｆ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ 液色谱图及白酒样品色谱图见图２。 晷 ８ ９ １０ ｌ１ 保留时间／ａｒｉｎ １８０ １６０ １４０ ｌ２０ 撂ｔＯ０ — ８０ ６０ ４０ ２０ ．笺．ｊ＾ 鳖． Ｕ溘＋ 藿 ｉ ｌ ５ １０ １５ ２Ｏ 保留时间／ｒａｉｎ 图２顶空进样法甲醇标准溶液（Ａ）及白酒样品（Ｂ）色谱图 Ｆｉｇ．２ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ａ）ａｎｄ ｅａｉｊｉｕ ｓａｍｐｌｅ（Ｂ）ｂｙ ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ２．３线性范围、相关系数及检出限的比较 分别用两种方法测定配制的甲醇标准使用液系列浓 度，两种方法的标准曲线线性范围、相关系数及检出限 结果见表ｌ。 表１ 直接进样法与顶空进样法的线性范围、相关系数及检出限 Ｔａｂｌｅ １ Ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ．ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ Ｏｆ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｍ￣ｈｏｄ 由表１可知，两种方法得到线性范围０．０３２ ２～１．２８８ ｇｍ， 以甲醇含量（ｘ，ｇｍ）为横坐标，峰面积（ｙ）为纵坐标的甲 醇标准曲线回归方程相关系数Ｒ均０．９９９。表明两种方法均 有良好的线性关系，优化后的直接进样法检出限（０．０４ ｇ／Ｌ） 高于顶空进样法检出限（０．０２ ｇ／Ｌ）。 ２．４精密度实验 取１６．１ ｇ门Ｌ甲醇标准储备液０．２５ ｍＬ用阴性样品定容 至２５ ｍＬ，混匀后分别用两种方法进行精密度考察（平行 实验６次），结果见表２。 由表２可知，直接进样法相对标准偏差（ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ，ＲＳＤ）＜ｌ％，顶空进样法ＲＳＤ＜３％，项空进样法 更接近真值，精密度符合ＧＢ／Ｔ ２７４０４－－２００８《实验室质量 控制规范食品理化检测》的技术要求［ 。 ２．５回收率实验 选择加标质量浓度０．０４８ ｇｍ、０．１６１ ｇ／Ｌ、０．４８３ ｇｍ－个 不同质量浓度水平对３个不同酒样进行加标实验，考察两种方 法的准确度，结果见表３。 表３两种方法加标回收率结果 Ｔａｂｌｅ ３ Ａｄｄｉｎｇ ｓｔａｎｄａ￣ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｗｏ ｍ￣ｈｏｄｓ 由表３可知，两种方法的加标回收率为９０％～１ １０％，表 明两种方法准确度较好。 ２．６样品测定 取２０种市售白酒分别用两种方法进行测定，结果见表４。 表４两种方法测定２Ｏ种白酒中甲醇结果比较 Ｔａｂｌｅ ４ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｂｙ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ２０１ ７ Ｖｏ１．３６ ＮＯ．８ ・１ ６４． Ｓｅｒｉａｌ Ｎｏ．３０６ Ｃｈｉｎａ Ｂｒｅｗｉｎｇ Ａ由表４可知，两种方法测定结果经配对ｔ检验，ｔ＝１．０６８， 两种方法测定白酒中甲醇无显著性差异ｆｌ５］（Ｐ＞０．０５）。 ２．７不确定度比较 按标准曲线外标法计算白酒试样中甲醇含量，计算公 式如下： 甲醇按１００％酒精度折算值Ｘ（ｇ／Ｌ）＝ ×１００ 式中：ｘ为白酒中甲醇含量，按１００％酒精度折算，ｇ／Ｌ；Ｃ为由 标准曲线计算出进样液中甲醇含量，ｇ门Ｌ；Ｂ为实测酒 精度，％ｖｏｌ；１００为按１００％酒精度换算 。 通过计算公式建立数学模型，不确定度评定步骤如下： ①根据６次平行测定结果计算Ａ类相对标准不确定度②Ｂ类 不确定度由甲醇色谱标样、实测酒精度、仪器引入相对标 准不确定度『】７＿ 。通过合成计算得到不确定度结果见表５。 表５两种方法的不确定度结果 Ｔａｂｌｅ ５ Ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ Ｌ 方法 测定结果 ＝６） 不确定度 直接进样法０．１６５２ ０．１６５ ８ Ｏ．１６５４ ０．１６４６ ０．１６６７ Ｏ．１６５７（０．１６６￣０．０１２） 顶空进样法０．１６３ ６ ０．１６４ １ Ｏ．１５７ ３ ０．１５６ １ ０．１５５ ７ ０．１６５ ３（Ｏ．１６０￣０．０１２） 由表５可知，直接进样法的方法不确定度结果为 （０．１６６＋０．０１２） ；顶空进样法的方法不确定度结果为 （０．１６０＿＋０．０１２）ｇ／Ｌ。 ２．８再现性实验 实验室内不同时间不同人员进行再现性实验，选择 ０．０３ ｇ门Ｌ、０．０９ ｒｄＬ两个质量浓度进行６次加标实验，结果见 表６。 表６再现性实验结果 Ｔａｂｌｅ ６ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ 由表６可知，精密度和回收率范围均能满足ＧＢ／Ｔ２７４０４－－ ２００８《实验室质量控制规范食品理化检测》中的技术要求， 说明两种方法再现性好。 ３结论 本实验通过气相色谱直接进样法和顶空进样法分别从 条件优化到方法学验证比较，结果表明，两种方法各项指标 都能满足实验室要求。两种方法的线性范围为０．０３２ ２～ １．２８８ ０ ｇｍ，线性相关系数Ｒ均＞０．９９９。直接进样法的检出 ｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ 限为０．０４ ｇ／Ｌ，加标回收率为９０％ １１０％，相对标准偏差 （ＲＳＤ）＜１％，方法不确定度结果为（０．１６６±Ｏ．０１２）ｇｍ； 顶空进样法的检出限为０．０２ ｇ／Ｌ，加标回收率范围为９０％－－ １ １０％，相对标准偏差（ＲＳＤ）＜３％，方法不确定度结果为 （０．１６０＿＋０．０１２）ｇ／Ｌ。以两种方法测定市售２０种白酒样品， 测定结果经配对ｆｊ佥验，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。直接进样 法无前处理过程，简单快速精密度高；顶空进样法检出限 更低，灵敏度更高。两种方法各有优点，可灵活运用于白酒 中甲醇含量的测定。 参考文献： ［１］申科敏，胡晓琴．顶空进ｒ４－毛细管柱气相色谱法测定酒中甲醇的含量 ．食品与药品，２０１６，１ ８（５）：３５８—３６０． ［２］黄鸣，刘江勋，黎锡流．项空气相色谱法测深色酒中微量甲醇Ⅲ食 品科学，２００２，２３（２）：１０６—１０８． ［３］陈捷敏．甲醇中毒视网膜功能结构和蛋白质组学研究［Ｄ］．上海：复旦 大学，２０１２． ［４］李莹．白酒中甲醇分析方法的研究 ．酿酒，２０１０，３７（２）：７７．７８． ［５］张明赞，何腊平，张义明．白酒中甲醇、甲醛、氰化物和金属离子的研 究进展『Ｊ】．食品安全质量检测，２０１５，６（９）：３５６３—３５６８． 【６］ＷＡＮＧ Ｍ Ｌ，ＷＡＮＧ Ｊ Ｔ，ＣＨＯＯＮＧ Ｙ Ｍ．Ａ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｉｎ ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｂｅｖｅｒａｇｅ ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｃａｐｉｌｌａｒｙｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］ｌ Ｊ Ｆｏｏｄ Ｃｏｍｐｏｓ Ａｎａｌ，２００４，１７：１ ８７— １９６． 【７］中华人民共和国卫生部．ＧＢ／Ｔ ５００９．４８－－２００３蒸馏酒与配制酒卫生 标准的方法分析［ｓ】．北京：中国标准出版社，２００３． ［８］张钟，陈海蓉．影响荔枝酒甲醇含量的因素［Ｊ］．中国酿造，２０１４，３３ （３）：１２５一ｌ２７． ［９］彭黎旭，刘洪升，王明月．气相色谱高温法快速测定酒中甲醇、杂醇 油、乙酸乙醋和酒度【ＪＪ．热带农业科学，１９９７（３）：４ｌ一４５ ［１Ｏ］徐万秀．毛细管白酒专用柱气相色谱法测定白酒中甲醇含量［Ｊ］．上海 计量测试，２０１４（５）：２７—２９． ［１１］李超豪，胡强，吴蔚，等．气相色谱法同时测定白酒中甲醇和乙 （己）酸乙酯［ＪＪ．食品与机械，２０１３，２９（１）：８ｌ－８７． ［１２］亓学奎，王欣欣，杨华．毛细管色谱法测定白酒中的甲醇、乙酸乙 酯、乳酸乙酯和正丙醇…．食品科技，２０１４，３９（２）：２７６。２７８． ［１３］莫国荣．程序升温毛细管气相色谱法测定白酒中甲醇和杂醇油Ⅲ． 中国卫生检验杂志，２０１２，２２（２）：２２９—２３０． ［１４］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局．ＧＢ／Ｔ ２７４０４－－２００８实 验室质量控制规范食品理化检测【ｓ］．北京：中国标准出版社，２００８． ［１５］郭爱华，袁佗，王玮，等．气相色谱法和离子色谱法测定饮料中 甜蜜素的方法比较［Ｊ］．现代预防医学，２０１５，４２（１１）：１９７５．１９７８ 【１６］中华人民共和国卫生部．ＧＢ ２７５７—２０１２，食品安全国家标准蒸馏酒 及其配制酒［Ｓ］．北京：中国标准出版社，２０１３． ［１７］刘忠，陈涛．蒸馏酒中甲醇测量结果不确定度分析［Ｊ１．医学信息， ２０１０，２３（５）：１４９８—１４９９． ［１８］侯凤仙，宁霞，黄爱华．气相色谱法测定白酒中甲醇的不确定度评 估『Ｊ］．预防医学，２０１４，１０（５）：３８—３９． ［１９］黄丽金，童优芸，袁勇军．气相色谱法测定白酒中甲醇含量测量结果 不确定度的评定［Ｊ］．安徽农业科学，２０１３，４１（１３）：５９５２．５９５３．
