食品中NO2-含量的测定

一、实验目的

1.了解食品中NO2-含量的测定方法；

2.进一步熟悉722S可见分光光度计的使用；

二、实验原理

1. 亚硝酸盐作为一种食品添加剂，能够保持腌肉制品等的色、香、味，并具有一定的防腐性，但同

时具有较强的致癌作用，过量食用对人体有害。2. 在弱酸性溶液中，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成的重氮化合物与盐酸萘乙二胺偶

联成紫红色的偶氮染料，可用分光光度法测定。反应：

在3.方法：标准曲线法；二、仪器与试剂1. 仪器：2. 试剂：（1（2（3（4（5（6三、实验步骤1. 试样预处理（1（2（3（4

1）H2N－

－SO3H→ N≡N+－－SO3H +2H2O

2）N≡N+－－SO3H＋ －NHCH2CH2NH2•HCl

→ HO3S－

－N＝N－ －NHCH2CH2NH2•HCl （紫红色偶氮染料，max=540nm处有最大吸收。）

722S型可见分光光度计。

饱和硼砂溶液 称取25g硼砂（Na2B4O7•10H2O）溶于500mL热水中。1.0mol•L-1硫酸锌溶液 称取150gZnSO4•7H2O溶于500mL水中。4g•L-1对氨基苯磺酸溶液 称取0.4g对氨基苯磺酸溶于200 g•L-1盐酸中配成避光保存。

2g•L-1盐酸萘乙二胺溶液 称取0.2g盐酸萘乙二胺溶于100mL水中，避光保存。NaNO2标准溶液 准确称取0.1000g干燥24h的分析纯NaNO2500mL容量瓶中，加水稀释至刻度并摇匀。临用时准确移取上述贮备液于100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为操作液（10g•mL试样，肉制香肠；

肉制香肠，称取5g经绞碎无效均匀的试样置于50mL烧杯中； 加入12.5mL硼砂饱和溶液搅拌均匀，然后用150～200mL左右70的试样全部洗入250mL容量瓶中，并置于沸水浴中加热15min，取出；在轻轻摇动下滴加2.5mL ZnSO4溶液以沉淀蛋白质。冷却至室温后，加水稀释至刻度，

摇匀。放置10min，撇去上层脂肪；

清液用滤纸或脱脂棉过滤，弃去最初10mL滤液，测定用滤液应为无色透明。

100mL溶液，

（0.2g•L-1）5.0mL-1）。

（

（） ）

） ） ） ，用水溶解后定量转入

） ） ） ℃以上的热水将烧杯中

） ） 2. 测定

（1） 标准曲线的绘制

1) 准确移取NaNO2操作液（10g•mL-1）0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0于6支50mL容量瓶

中；

2) 上述6支50mL容量瓶中加水30mL，2mL对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置3min。 3) 分别加入盐酸萘乙二胺溶液1mL，定容，摇匀，静置15min。

4) 在722S可见分光光度计上，用1cm吸收池，以试剂空白为参比，于波长max=540nm处

测定各溶液的吸光度A； 5) 绘制A～CNO2-的工作曲线。 （2）试样的测定1) 2）在测定各溶液的吸光度2) 四、思考题1. 亚硝酸盐作为一种食品添加剂，具有哪些特点？你能否找到一种优于亚硝酸盐的替代品？2. 承接滤液时，为什么要弃去最初的

5mL，定容，配制试样溶液；722S可见分光光度计上，用A；

。

40mL，于1cm吸收池，以试剂空白为参比，于波长NO2-的浓度，计算试样中滤液？50mL容量瓶中，加5mL对氨基苯磺酸溶液和

NaNO2的质量分数（以max=540nm处mg•kg-1

准确移取经过处理的试样滤液盐酸萘乙二胺溶液在工作曲线上求出试样溶液中表示）

10mL