山东医药２０１４年第５４卷第１期 子宫内膜、卵巢原发双癌组织中端粒酶 及ＥＲ、ｃ—ｍｙｃ的 表达 信聪伶，焦今文，王黎明，姚如勇，孙显路 （青岛大学医学院附属医院，山东青岛２６６００３） 摘要：目的探讨宫腔子宫内膜样腺癌和卵巢子宫内膜样腺癌（原发双癌）组织中端粒酶及雌激素受体（ＥＲ）、 Ｃ－ｍｙｅ蛋白的表达。方法收集１６例子宫内膜和卵巢原发双癌患者的癌组织切除标本，临床病理分期均为Ｉ期。 采用免疫组织化学ＰＶ一６０００二步法分别检测免疫表型端粒酶、ＥＲ及ｃ—ｍｙｅ在同一患者子宫内膜癌组织和卵巢癌组 织中的表达。结果 子宫内膜和卵巢两部位癌组织端粒酶蛋白表达相同１１例（６８．７５％），表达不同５例 （３１．２５％）；ＥＲ蛋白表达相同１０例（６２．５％），表达不同６例（３７．５％）；ｃ—ｍｙｃ蛋白表达相同ｌＯ例（６２．５％），表达 同６例（３７．５％）；子宫内膜癌和卵巢癌组织中端粒酶、ＥＲ及ｃ—ｍｙｃ表达均差异无统计学意义（Ｐ均＞０．０５）。子 宫内膜和卵巢两部位原发双癌中均有ＥＲ、ｃ—ｍｙｃ及端粒酶蛋白表达７例（４３．７５％）。结论端粒酶、ＥＲ及ｃ ｍｙｅ 子宫内膜和卵巢两部位原发双癌中的表达可能相同，两部位癌组织可能存在同源性。 关键词：卵巢肿瘤；子宫内膜肿瘤；原发双癌；免疫组织化学 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２—２６６Ｘ．２０１４．０１．００７ 中图分类号：Ｒ７３０．７ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１４）０１－００２０－０４ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ，ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｄ ｃ－ｍｙｃ ｉｎ ｓｙｎｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａＩ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ＸＩＮ Ｃｏｎｇ—ｌｉｎｇ，ＪＩＡＯ Ｊｉｎ—ｗｅｎ，ＷＡＮＧ Ｌｉ—ｍｉｎｇ，ＹＡＯ Ｒｕ—ｙｏｎｇ，ＳＵＮＸｉａｎ—ｌｕ （Ｔｈｅ Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＭｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｑｉｎｇｄａｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６００３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ，ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＥＲ）ａｎｄ ｃ—ｍｙｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｓｙｎ— ｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｄ ａｄｅｎｏｅａｒｃｉｎｏｍａｓ ｏｆ ｔｈｅ ｕｔｅｒｕｓ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １６ ｓｙｎｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎ— ｄｏｍｅｔｒｉａｌ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．Ａｌｌ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ—ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔａｇｅ ｗａｓ Ｉ ｓｔａｇｅ． ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ＰＶ一６０００ ｔｗｏ—ｓｔｅｐ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ（ｈＴＥＲＴ），ＥＲ ａｎｄ ｃ—ｍｙｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｕｔｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ ｅ￣ｃｉｎｏｍａｓ ａｔ ｏｎｅ ｐａｔｉｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｅｌｅｖｅｎ ｃａｓｅｓ（６８．７５％）ｈａｄ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅ— ｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｕｔｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ，ａｎｄ ５ ｐａｔｉｅｎｔｓ（３１．２５％）ｈａｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ；ｔｅｎ ｃａｓｅｓ（６２．５％）ｈａｄ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎ０ｔｙｐｅ ｏｆ ＥＲ ｃｏｍｍｏｎ ｔｏ ｕｔｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ，ａｎｄ ６ ｅａｓｅｓ（３７．５％）ｈａｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ＥＲ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ；ｔｅｎ ｃａｓｅｓ（６２．５％）ｈａｄ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｃ—ｉｎｙｃ，ａｎｄ ６ ｃａｓｅｓ ｆ ３７．５％１ ｈａｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃ—ｍｙｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒ— ａｓｅ，ＥＲ ａｎｄ（３－ｍｙｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｓｙｎｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｄ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ｏｆ ｔｈｅ ｕｔｅｒｕｓ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ（ａｌｌ Ｐ＞０．０５）． Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ７ ｃａｓｅｓ（４３．７５％）ｏｆ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＥＲ，ｃ—ｍｙｃ ａｎｄ ｔｅｌｏｍｅｒｅ ｉｎ ｂｏｔｈ ｕｔｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｄ ａｄｅｎｏｅａｒｅｉｎｏｍａｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ．ＥＲ ａｎｄ ｃ—ｍｙｃ ｍａｙ ｂｅ ｓｉｍｉｌａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｎｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ｏｆ ｕｔｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｏｖａｒｉａｎ，ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｍａｙ ｂｅ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｓｉｔｅｓ ｃａｎｃｅｒｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｖａｒｉａｎ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；ｓｙｎｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｃａｒｃｉｎｏｍａ；ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 卵巢癌之所以成为女性生殖系统中病死率最高 的恶性肿瘤，除了因为缺乏早期特异性诊断方法和 无疗效持久的治疗方案外，根本原因在于卵巢癌的 病因及发病机制尚不清楚。近年来，随着卵巢癌外 起源学说的提出，高级别卵巢浆液性癌多为输卵管 起源已被国际上多数学者认同 。亦有形态学和 分子遗传学的证据提示卵巢子宫内膜样腺癌可能与 子宫内膜异位有关 ，因其组织学类型相似于宫腔 作者简介：信聪伶（１９８７一），女，在读研究生，研究方向为妇科肿瘤。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｏｎｇｌｉｎｇｏ８２８＠１２６．ｃｏｎ 通信作者：王黎明（１９６９一），男，副主任医师，研究方向为妇科肿瘤，承担省市级课题研究多项 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｌｍｑｉｎｇｙｉ＠Ｉ６３．ｃｏｒｎ ２０ 山东医药２０１４年第５４卷第１期 子宫内膜样腺癌，其发生发展是否同宫腔子宫内膜 样腺癌一样与雌激素过度刺激有关尚待证实。端粒 酶的活化是肿瘤发生病理改变的关键步骤。雌激素 受体（ＥＲ）可作为一种反式激活因子增强ｃ．ｍｙｃ癌 基因表达，促进细胞增殖；ＥＲ、ｃ．ｍｙｃ过表达都可激 活ｈＴＥＲＴ基因，导致端粒酶表达水平增高。本研究 通过对官腔子宫内膜样腺癌和卵巢子宫内膜样腺癌 （原发性双癌）中端粒酶及相关蛋白ＥＲ、ｃ—ｍｙｃ表达 情况分析，探讨卵巢子宫内膜样腺癌与子宫腔宫内 膜样腺癌发生的同源性。 １资料与方法 １．１ 临床资料 收集青岛大学医学院附属医院 ２００５年１月～２０１３年１月收治的子宫内膜和卵巢 原发双癌１６例患者的癌组织切除标本（其中新鲜 标本１例，固定蜡块包埋标本１５例），患者年龄３７ —５７岁，中位年龄４７岁。子宫内膜和卵巢原发性 双癌的诊断标准 为：①两个癌灶没有直接联系； ②无子宫肌层浸润或只有浅肌层浸润；③无淋巴和 血管浸润；④肿瘤主要存在于卵巢实质和子宫内膜； ⑤两个肿瘤常局限于原发部位或仅伴微小转移；⑥ 子宫内膜肿瘤常伴有内膜不典型增生；⑦卵巢肿瘤 常为单侧，卵巢内可有子宫内膜异位。标本均经病 理医师再次核实，两部位癌组织病理类型均为子宫 内膜样腺癌，临床病理分期均为Ｉ期。患者均有完 整的临床资料，术前均未接受任何治疗。 １．２方法 １．２．１ 检测方法免疫表型端粒酶、ＥＲ及ｃ—ｍｙｃ 的检测均采用免疫组化染色ＰＶ－６０００二步法，严格 按试剂盒说明操作；每批切片中均设阳性对照和阴 性对照，用已知乳腺癌阳性切片作为阳性对照，ＰＢＳ 代替一抗作为阴性对照。免疫组化ＰＶ－６０００试剂 盒、ＤＡＢ显色剂、兔抗人端粒酶（催化亚单位）多克 隆抗体（ＺＡ－０２３９，工作液）、兔抗人雌激素受体 （ＥＲ）单克隆抗体（ＺＡ－０２３９，工作液）及兔抗人ｅ— ｍｙｃ单克隆抗体（ＺＡ－０５５５，工作液）均购自北京中 杉金桥生物技术有限公司。 １．２．２结果判定 细胞核或细胞质棕黄色染色为 端粒酶和ｃ．ｍｙｃ阳性，细胞核棕黄色染色为ＥＲ阳 性。端粒酶免疫组化结果判定参照文献 ，在２００ 倍视野下，每张切片随机观察５个视野，每个视野 计数１００个细胞，根据染色阳性细胞所占百分比进 行评分。阳性细胞占计数细胞比例＜１０％为０分， １０％～２５％为１分，２６％～７５％为２分，＞７５％为 ３分。ＥＲ及ｃ—ｍｙｃ阳性判定标准参照文献 ’ 采用 两级评分法进行判定，在２００倍视野下，每例标本随 机选取５个视野，每个视野观察１００个细胞计数，根 据阳性率和染色强度作为结果判定的标准。细胞染 色强度评分：阴性为０分，淡黄色为１分，棕黄色 为２分，棕褐色为３分；ＥＲ阳性细胞平均百分数计 算方法为：阳性细胞占计数细胞比例＜１０％为０ 分，１０％～２５％为１分，２６％～５０％为２分，＞ ５０％为３分；用阳性强度评分乘以阳性细胞评分结 果评定蛋白表达强度：０分为阴性，１～３分为（＋）， ４—６分为（＋＋），６～９分为（＋＋＋）。ｃ—ｍｙｃ阳性 细胞平均百分数计算方法为：ｃ－ｍｙｃ阳性细胞计数 ＜５０％为０分，５０％～７５％为１分，７５％＞为２分。 用阳性强度评分乘以阳性细胞评分结果≥２分为阳 性表达病例。 １．２．３统计学方法采用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行 统计学分析，计数资料以百分比表示，比较采用配对 检验。Ｐ≤０．０５为差异有统计学意义。 ２ 结果 ２．１端粒酶、ｃ—ｍｙｃ、ＥＲ在子宫内膜和卵巢原发双 癌的免疫组化染色镜像 免疫组化染色下，端粒酶 和ｃ．ｍｙｃ阳性细胞为细胞核或细胞质呈棕黄色，ＥＲ 阳性细胞为细胞核呈棕黄色。 ２．２端粒酶、ＥＲ、Ｃ—ｍｙｅ在子宫内膜和卵巢原发双 癌中的表达１６例子宫内膜和卵巢原发双癌中，１１ 例（６８．７５％）两部位癌组织端粒酶蛋白表达相同 （其中８例两部位癌组织中同时有端粒酶阳性表 达，３例两部位癌组织中同时无端粒酶表达），５例 （３１．２５％）两部位癌组织端粒酶蛋白表达不同，两 者比较差异无统计学意义（Ｐ＝０．７２１）；１０例 （６２．５％）两部位癌组织ＥＲ蛋白表达相同（其中９ 例两部位癌组织中同时有ＥＲ蛋白表达，１例两部位 癌组织中同时无ＥＲ蛋白表达），６例（３７．５％）ＥＲ 表达不同，两者比较差异无统计学意义（Ｐ＝ ０．４３１）；１０例（６２．５％）两部位癌组织ｃ－ｍｙｅ蛋白表 达相同（其中７例两部位癌组织中同时有ｃ—ｍｙｃ蛋 白阳性表达，３例两部位癌组织中同时无ｃ—ｍｙｅ蛋 白表达），６例（３７．５％）ｃ—ｍｙｅ蛋白表达不同，两者 比较差异无统计学意义（Ｐ＝０．４８１）。端粒酶与 ＥＲ、Ｏ—ｍｙｅ在两部位癌组织中免疫表型均相同者８ 例（５０％），其中７例（４３．７５％）子宫内膜和卵巢两 部位癌组织同时有端粒酶、ＥＲ及ｃ－ｍｙｅ的阳性表 达，１例（６．２５％）两部位癌组织中同时无端粒酶、 ＥＲ及ｃ—ｍｙｅ蛋白的表达。 ３讨论 雌激素可单独作为子宫内膜癌、乳腺癌、前列腺 癌等激素依赖性肿瘤发生发展的重要因素之一，与 ２１ 广泛存在于女性生殖细胞表面的ＥＲ特异性结合， 激活受体信号转导通路，通过不同的基因组或非基 因组信号通路直接导致肿瘤的发生 。正常子宫 内膜组织在雌激素的过度刺激下可发生癌变。 Ｔａｍａｙａ等 ＇ 研究结果显示，异位于卵巢的子宫内 膜也存在雌激素受体，故子宫内膜异位组织也存在 激素依赖性。但卵巢子宫内膜样腺癌是否源于异位 的子宫内膜组织，是否与过度的雌激素刺激相关尚 待进一步研究证实。本研究在子宫内膜和卵巢两部 位的子宫内膜样腺癌原发双癌中同时检测ＥＲ蛋白 的表达，以推测两部位癌组织发生癌变的分子机制 是否均与雌激素的过度刺激相关。结果表明，ＥＲ蛋 白在两部位癌组织中的表达差异无统计学意义，提 示两部位癌组织发生癌变的ＥＲ分子机制可能相 同，且大部分癌组织中均有ＥＲ蛋白阳性表达，表明 卵巢子宫内膜样腺癌的发生也可能与雌激素的过度 刺激相关。 雌激素可通过不同的基因作用机制调节子宫内 膜组织增生及恶性转化…，亦可通过相应的激素作 用元件调节ｃ—ｍｙｃ等靶基因的转录及蛋白表达¨ ， 共同促进肿瘤的发生发展。ｃ—ｍｙｃ基因是一种与细 胞周期密切相关的原癌基因，ｃ．ｍｙｃ基因的正常表 达与正常细胞的发育、生长、分化相关，其表达量的 变化会导致细胞性质的变化，因此ｃ—ｍｙｃ与肿瘤细 胞的发生、增殖、分化也密切相关。研究表明，ｃ—ｍｙｃ 与雌激素依赖性子宫内膜癌的发生密切相关；ｃ—ｍｙｃ 与卵巢子宫内膜异位组织的恶性转化亦密切相 关¨卜 Ｊ。这提示我们在子宫内膜和卵巢两部位的 子宫内膜样腺癌原发双癌中同时检测ｃ．ｍｙｃ蛋白的 表达。本结果显示，两部位癌组织中ｃ—ｍｙｃ蛋白免 疫表 差异无统计学意义，即两部位癌组织中ｃ— ｍｙｃ蛋白表达相同，并且可能与ｃ—ｍｙｃ基因突变相 关。 端粒酶是由ＲＮＡ和蛋白质组成的一种核糖核 蛋白嗨，其作为一种特殊的逆转录酶，通过识别并结 合于富含Ｇ的端粒末端，以自身为模板，逆转录合 成端粒¨ 。近年来，随着人们对端粒酶结构与功能 的认识，端粒酶与肿瘤发生、发展的关系逐渐成为研 究的热点。Ｇｏｒｈａｍ等 的研究结果显示端粒酶表 达于大多数的妇科恶性肿瘤中，提示端粒酶活化亦 是妇科恶性肿瘤病理改变的关键步骤。但是端粒酶 的活性调节机理错综复杂，端粒酶的激活是一个多 因子参与的调节过程，不仅涉及转录水平还涉 及蛋白质之间的相互作用以及蛋白质的磷酸化等。 已有研究发现，ＥＲ、ｃ．ｍｙｃ都可结合到３３０ ｂｐ的小 ２２ 山东医药２０１４年第５４卷第１期 ＴＥＲＴ启动子上转录，进而促进端粒酶的活化。 Ｋｙｏ等 研究发现雌激素不仅通过ＥＲ依赖机制转 录调节ｈＴＥＲＴ而活化端粒酶，也可通过上调ｃ－ｍｙｃ 基因表达，促进ｃ—ｍｙｃ与ｈＴＥＲＴ启动子Ｅ—ｂｏｘ结合 而活化端粒酶。因此，雌激素能激活内源性ｈＴＥＲＴ 基因表达，产生端粒酶活性，而ｃ—ｍｙｃ还可通过其表 达产物直接激活端粒酶。故ＥＲ、ｃ．ｍｙｃ、端粒酶激活 通路是激素依赖性肿瘤发生的重要分子通路。而本 研究中选取宫腔内膜子宫内膜样腺癌和卵巢子宫内 膜样腺癌为研究对象，分析端粒酶在原发双癌中的 表达，结果显示，端粒酶在两部位癌组织中的表达差 异无统计学意义，表明两部位癌组织中端粒酶蛋白 表达相同。并且有７例（４３．７５％）患者两部位癌组 织均有ＥＲ、ｃ—ｍｙｃ及端粒酶蛋白表达，提示ＥＲ、ｃ． ｍｙｃ及端粒酶均参与了部分双癌患者两部位组织的 癌变，故两部位组织发生癌变的分子机制可能相似。 本研究显示，子宫内膜和卵巢原发双癌患者中， 两部位癌组织中端粒酶、ＥＲ及ｃ．ｍｙｃ蛋白表达可能 相同，且ＥＲ、ｃ—ｒｎｙｃ及端粒酶均参与了部分双癌患 者两部位组织的癌变，两部位癌组织可能有同源性。 但是，本研究样本量相对较少，两部位癌组织是否确 实存在同源性尚需进一步研究证实。 参考文献： ［１］Ｃｒｕｍ ＣＰ，Ｄｒａｐｋｉｎ Ｒ，Ｍｉｒｏｎ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｄｉｓｔａｌ ｆａｌｌｏｐｉａｎ ｔｕｂｅ：ａ ｎｅｗ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｐｅｌｖｉｃ ｓｅｒｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＣＵｌＴ Ｏｐｉｎ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ，２００７，１９（１）：３ ． ［２］Ｌｅｖａｎｏｎ Ｋ，Ｃｒｕｍ Ｃ，Ｄｒａｐｋｉｎ Ｒ．Ｎｅｗ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅ— ｓｉｓ ｏｆ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐａｃｔ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎ— ｃｏｌ，２００８，２６（３２）：５２８４－５２９３． ［３］Ｗｉｅｇａｎｄ Ｋｃ，Ｓｈａｈ ＳＰ，ＡＩ—Ａｇｈａ ＯＭ，ｅｔ ａ１．ＡＲＩＤ１Ａ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｅｎｄｏｏｓｉｓｍｅｔｒｉ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ［Ｊ］．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ， ２０１０，３６３（１６）：１５３２—１５４３． ［４］Ｙｏｕｎｇ ＲＨ，Ｓｃｕｌｌｙ ＲＥ Ｍｅｔａｓｔｅｔｉｃ ｔｕｍｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ｏｖａｒｙ『Ｍ］／／Ｋｕｒ ｍａｎ ＩＬ１．Ｂｌｕｍｓｔｅｉｎ ｓ ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ０ｆ ｔｈｅ ｔ￣ｍａｌ ｇｅｎｉｔａｌ ｔｒａｃｔ．５ｔｈ ｅｄ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２００２：１０６３—１１０１． ［５］Ｍａｒａｅｉ ＡＡ，Ｈａｔｔａ ＡＺ，Ｓｈｉｒａｎ ＭＳ，ｅｔ ａ１．１ｔｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅ． ｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｏｖａｒｉａｎ ｔｕｎｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｉｎｄｉａｎ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，５５（２）：１８７—１９１． ［６１ Ｖａｎｄｅｎｐｕｔ Ｉ，Ｔｒｏｖｉｋ Ｊ，Ｌｅｕｎｅｎ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｉｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｃａｎｃｅｒ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｒｏｍ ａｎ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ［Ｊ ｊ ｌｎｔ Ｊ Ｇｙ— ｎｅｃｏｌ Ｃａｎｃｅｒ，２０１ １，２１（２）：３１６—３２２． ７］Ｌｉｕ Ｊ，Ｘｉａｏ Ｊ，Ｔａｏ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ（ 一ｍｙｃ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｅｉｎｏｎｌａ ｂｙ ｎｏｎｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｉｓ ｔｏ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙｌ Ｊｊ．Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ Ｊ（Ｅｎｇ１），１９９７，１１０ （３）：２２９－２３２． ８］Ｃｈｅｎ ＧＧ，Ｚｅｎｇ Ｑ， Ｆｓｅ ＧＭ．Ｅｓｔｒｏｇｅｎ ａｎｄ ｉｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ Ｊ］．Ｍｅｄ Ｒｅｓ Ｒｅｖ，２００８，２８（６）：９５４—９７４． 『９］Ｔａｍａｙａ Ｄ，Ｍｏｔｔ）ｙａｍａ Ｔ，Ｏｈｏｎｏ Ｙ，ｅｌ ａ１．Ｓｔｅｒｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｅｖｅｌｓ ａｌｌｄ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙｏｆ ｅｄｏｍｅｔｉｆｏｓｉｓ ８ｎｄ ａｄｅｎｏ，ｑｌｖｔ ；ｓ ．，ｊ 、ｅｉ＇ｌ；！ Ｓｔｅｒｉｌｅ． 山东医药２０１４年第５４卷第１ １９７９，３１（４）：３９６－４００． ［１４］Ｎｏａｃｋ Ｆ，Ｓｃｈｍｉｄｔ Ｈ，ｂｕｃｈｗｅｉｔｚ Ｏ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｏｍｉｃ ｉｍｂａｌｎｃｅ ａｎｄ ａｏｎｅｏ—ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｉｄ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ［１０］Ｊａｎｎｅ Ｏ，Ｋａｎｐｐｉｌａ Ａ，Ｋｏｋｋｏ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｅｓｔｒｏｇｅｎ ａｎｄ ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｓｉｓ ｌｅｓｉｏｎｓ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｍｅｔｉｒａｌ Ｔｉｓ— ａｒｉｓｅｎ ｉｎ ａｎ ｅｎｄｏｍｅｔｉｒｏｔｉｃ ｃｙｓｔ．．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｒｅｓ，２００４，２４（１）： １５１—１５４． ｓｕｅ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ，１９８１，１４１（５）：５６２－５６６． ［１ １］Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｓ，Ｔａｋａｙａｎａｇｉ Ａ，Ｓｈｉｍｉｚｕ Ｎ．Ｔｅｍｐｏｒａｌ ａｎｄ ｃｅｌｌ— ｔｙｐｅｓｐｅｃｉｉｆｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃ－ｆｏｓ ａｎｄ ｃ－ｊｕｎ ｐｒｏｔｏｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ［１５］Ｍｈａｗｅｃｈ Ｐ，Ｋｉｎｋｅｌ Ｋ，Ｖｌａｓｔｏｓ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ｉｎ ｅｎ— ｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ：ａｎ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｇｅｎｏｍｉｃ ｈｙ— ｍｏｕｓｅ ｕｔｅｍｓ ａｆｔｅｒ ｅｓｔｏｇｅｎ ｒｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１９９６， １３７（１２）：５４６８－５４７５． ｂｆｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｇｙｎｅｃｏｌ Ｐａｔｈｏｌ，２００２，２１（４）：４０１— ４０６． ［１２］Ｓｈｉｏｚａｗａ Ｔ，Ｍｉｙａｍｏｔｏ Ｔ，Ｋａｓｈｉｍａ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｅｓｔｒｏｇｅｎ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｒｍａｌ ｅｎｄｏｍｅｔｉａｌｒ ｇｌａｎｄｕｌａｒ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｉｎｉｔｉａｔｅｄ ｂｙ ［１６］Ｒｈｙｕ ＭＳ．Ｔｅｌｏｍｅｒｅｓ，ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ，ａｎｄ ｉｍｍｏｒｔｌｉａｔｙ［Ｊ］．Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ，１９９５，８７（１２）：８８４－８９４． ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｖｉａ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｃ－ｊｕｎ ｔｏ ａｎ ［１７］ＧｏｒｈａｍＨ，ＹｏｓｈｉｄａＫ，ＳｕｇｉｎｏＴ，ｅｔ ａ１．Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎ ｈｕ— ｍａｎ ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ，１９９７，５０ （６）：５０１－５０４． ＡＰ一１ ｓｅｑｕｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００４，２３（５３）：８６０３－８６１０． ［１３］Ｂｉｒｃａｎ Ｓ，Ｅｎｓａｒｉ Ａ，Ｏｚｔｕｒｋ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎａｌｙ－ ｓｉｓ ０ｆ ｃ—ｍｙｃ．ｃ－ｊｕｎ ａｎｄ ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ｎｏｒｍａ１．ｈｙｐｅｒｐｌａｓｔｉｅ ［１８］Ｋｙｏ ｓ，Ｔａｋａｋｕｒａ Ｍ，Ｋａｎａｙａ Ｔａｉｒａ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｅｓｔｒｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ｔｅ－ ｌｏｍｅｒａｓｅ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，１９９９，５９（２３）：５９１７－５９２１． （收稿日期：２０１３－０９－２０） ａｎｄ ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｕｍ［Ｊ］．Ｐａｔｈｏｌ Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｓ，２００５，１１（１）： ３２．３９． （上接第ｌ９页） 表３各组ｍｔｌｌ￣水平比较（ｍｍｏｌ／Ｌ。ｘ± ） 工Ｊ）Ｌ水平，升高ＨＤＬ水平，说明其具有调节脂代谢 作用；滋肾清肝方可显著降Ｔ２ＤＭ模型大鼠血糖水 平，改善胰岛素抵抗，与其能够增加胰岛素敏感性、 调节脂代谢有关。 糖尿病是一种常见的内分泌疾病，世界卫生组 织已将它和肿瘤、心脑血管病一起列为世界范围的 三大疾病，严重影响着人们的健康。滋肾清肝方能 注：与正常组比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１；与模型组比较，‘Ｐ＜ ０．０５ 有效地降低血糖，增加胰岛素敏感性，改善脂代谢紊 乱，调节血脂。加大对滋肾清肝方的相关研究，利用 现代技术将其开发为临床有效的降糖药物将有良好 的市场应用前景 Ｊ。 参考文献： ［１］邱昌龙，田春雨，李继安．２型糖尿病中医证候研究概况［Ｊ］．中 华中医药杂志，２０１０，２５（４）：５１７－５１９． 尿病模型以及化学物质诱导的实验性动物模型。由 于糖尿病症状的多样性和病因的复杂性，所有的模 型无法复制出完全与人相似的症状。针对Ｔ２ＤＭ在 临床上以胰岛素抵抗为主伴有胰岛素分泌不足的特 点，本实验通过高能量饮食诱导大鼠胰岛素抵抗后 引起血糖升高，再经腹腔注射ＳＴＺ ３０ ｍｇ／ｋｇ破坏一 ［２］刘志霞，张艳平，吴范武，等．双益方改善２型糖尿病大鼠糖、脂 代谢及作用机制的初步研究［Ｊ］．辽宁中医杂志，２０１２，３９（２）： ２２１． 部分胰岛Ｂ细胞功能，继续给予高热量饲料２周作 为Ｔ２ＤＭ模型大鼠。与正常组相比，入选的模型大 ［３］田春雨，薄海美，李继安．桑椹多糖对实验性２型糖尿病大鼠血 糖及血脂的影响［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１１，１７（１０）：１５８－ １６０． 鼠的ＦＰＧ显著升高，ＩＳＩ降低，并出现脂代谢紊乱， 与Ｔ２ＤＭ症状相似，表明造模成功。 人体内血浆脂质的成分较复杂，主要成分有 ＴＧ、ＴＣ、磷脂等，这些脂质中的一种或多种成分的含 量超过正常范围时称高脂血症。糖尿病患者常伴有 高脂血症，这与ＩＮＳ分泌异常引起的脂代谢紊乱有 关。相关研究结果表明，胰岛素抵抗是Ｔ２ＤＭ发病 ［４］吴范武，王雪，李继安，等．三清降糖方对实验性２型糖尿病大 鼠血糖和血脂的影响［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１１，１７（８）： １６５． ［５］田春雨，刘志霞，王亚，等．双益降糖方对２型糖尿病大鼠糖、脂 代谢影响的实验研究［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１３，１９（９）： １７７—１８Ｏ． 的重要因素，其表现为胰岛素敏感性减低，同时高血 脂的毒性作用可加速胰岛Ｂ细胞的凋亡，因此保护 胰岛Ｂ细胞和增加胰岛素敏感性成为治疗Ｔ２ＤＭ 的重要措施。本研究显示，模型组大鼠ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ ［６］崔鹏，田春雨，张艳萍，等．双益方对２型糖尿病大鼠ＳＯＤ、 ＭＤＡ、ＦＦＡ影响的实验研究［Ｊ］．时珍国医国药，２０１３，２４（８）： １８４０．１８４２． ［７］李世刚，陈燕．中药多糖防治２型糖尿病的研究进展［Ｊ］．山东 医药，２００９，４９（２７）：１１１－１１２． （收稿日期：２０１３．１０－２２） 水平明显升高，说明模型组大鼠存在明显的脂质代 谢紊乱。滋肾清肝方可降低糖尿病大鼠ＴＣ、ＴＧ、 ２３
