第３３卷２００９年第６期黑龙江医学ＨＥＩＬＯＮＧＪ－ＩＡＮＧＭＥＤＩＣＡＬＪＯＵＲＮＡＬＶ０１．３３。Ｎｏ．６Ｊｕｎ．２００９４５ｌ梅毒螺旋体的实验室检测技术及临床应用欧春怡，苗岩（哈尔滨市红十字中心医院检验科，黑龙江哈尔滨１５（Ｘ）７６）摘要：梅毒螺旋体的实验室检测方法主要为血清学试验，分为特异性和非特异性梅毒抗体检测。这些方法对于各期梅毒的诊断具有极其重要的价值。本文对当前梅毒螺旋体的检测状况及其临床应用作一综述。关键词：梅毒螺旋体；诊断；临床应用中图分类号：Ｒ４４６学科分类代码：３２０．１１６０文章编号：１００４—５７７５（２００９）０６—０４５１—０３ＴｈｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｉｑｕｅｔｏＴｒｅｐｏｎｅｍａ文献标识码：ＢＰａｉｌｉｄｕｍｉｎｔｈｅＬａｂｏｒａｔｏｒｙａｎｄｉｔｓＣｌｉｎｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＯＵＣｈｕｎ—ｙｉ，ＭＩＡＯＹａｎ（ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＨａｒｂｉｎＲｅｄ—ＣｒｏｓｓＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｈａｒｂｉｎ１５００７６，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｔｏｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃＴｒｅｐｅｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍｉｎｔｈｅｌａｂｏｒａｔｏｒｙｉｓｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌｔｅｓｔ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｙｔｅｓｔｏｆｃａｎｒｅａｇｉｎａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｇｅｎｔｅｓｔ，ｗｈｉｃｈｂｅａｐｐｌｉｅｄｉｎｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｓｙｐｈｉｌｉｓｉｎｖａｒｉｏｕｓｐｅｒｉｏｄｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ；Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；Ｃｈｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ梅毒（Ｓｙｐｈｉｌｉｓ），是由梅毒螺旋体（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ，ＴＰ）引起的一种性传播疾病。早期侵犯皮肤黏膜，传染性强；晚期以侵犯心血管和神经系统为主，破坏性强。不仅引起全身性损害，同时还可能通过胎盘传给胎儿，引起先天性梅毒。近年来，梅毒在我国的发病率呈逐年增加的趋势…，选择敏感性及特异性高的诊断方法，对该病的防治具有重要意义。检测梅毒螺旋体的方法很多，直接观察梅毒螺旋体，可准确诊断梅毒。人体感染梅毒螺旋体后，可产生两类抗体：一类主要有ＩｇＭ、ＩｇＧ类两种特异性抗螺旋体抗体；另一类非特异性抗体是受损的宿主细胞释放出的具有抗原性的类脂质，它能刺激机体产生抗类脂质的抗体，又称反应素。目前，用于梅毒辅助诊断的检验方法就是基于检测这两类抗体而设计的，包括梅毒螺旋体非特异性试验和梅毒螺旋体特异性试验。１抗原颗粒。当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集。为了能肉眼观察到这种凝集，把抗原结合到各种有色物质上，如ＲＰＲ用活性炭，使凝集颗粒呈黑色；ＴＲＵＳＴ用特制的甲苯胺红，使凝集颗粒呈红色反应。这些试验具有相同的标准化抗原，敏感性相似，其操作简易，费用低廉，目前多数医院将此类试验列为梅毒的常规筛查试验。１．２梅毒螺旋体特异性抗体血清学试验主要包括荧光密螺旋体抗体吸收试验（ＦｒＡ—ＡＢＳ）、梅毒螺旋体血细胞凝集试验（１１ＰＨＡ）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（ＴＰＰＡ）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ｒＩＰ—ＥＬＩＳＡ）、胶体金免疫层析法（ＧＩｃＡ）、梅毒螺旋体免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｅｒｎｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，咖）。此类试验采用活的或死的梅毒螺旋体或它的某些特异肽段作抗原，检测血清中的梅毒螺旋体的特异性ｔｓＧ和ＩｓＭ抗体，其特异性和灵敏度都比非特异性抗体高，一般用作确认试验。２梅毒螺旋体实验室检测的临床应用２．１筛查试验的应用常用的梅毒螺旋体检测方法主要检测方法有性病研究实验室（ＶＤＲＬ）玻片１．１梅毒螺旋体非特异性抗体血清学试验试验、不加热血清反应素试验（ＵＳＲ）、甲苯胺红不加热血清反应素试验（ＴＲｕｓＴ）和快速血浆反应素环状卡片试验（ＲＰＲ）。这些非特异性试验的抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成ＶＤＲＬ目前，对反应素的来源尚有争议。多数人认为【２］，它是人体感染梅毒螺旋体后组织受到破坏裂解出来的一种类脂成分，这种成分与梅毒螺旋体的蛋白质结合，成为抗原，刺激机体产生抗类脂质抗体，即反应素。梅毒螺旋体破坏组织可使机体产生万方数据４５２第３３卷２００９年第６期黑龙江医学ＨＥＩＬＯＮＧＪＩＡＮＧＭＥＤＩＣＡＬＪＯＵＲＮＡＬＶ０１．３３，Ｎ０．６Ｊｕｎ．２００９反应素，而其他破坏机体的过程也可产生反应素，所以梅毒患者梅毒螺旋体非特异性试验呈阳性，但阳性者并不一定就是感染了梅毒螺旋体。人体某些生理状态（如怀孕）；患有急性传染病（如风疹、水痘、病毒性肝炎、系统性红斑狼疮、上呼吸道感染、肺结核等）；许多慢性病（如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、风湿性心脏病、肝硬化、慢性肾炎和海洛因成瘾等）梅毒螺旋体非特异性试验结果也可以呈阳性。因此，筛查试验具有假阳性。但由于反应素的量可反映组织的损伤程度，该方法可半定量血清中的反应素，而且抗体滴度与梅毒活动度有关。早期梅毒经过治疗后，非特异性的反应素滴度一般很快下降甚至转阴。用ＴＲＵＳＴ检测梅毒在治疗过程中的非特异性抗体的滴度变化，可以进行病情及治疗效果的监测以及复发及再感染的判断，这是其他方法不可替代的【３Ｊ。２．２确认试验的应用ＴＰＰＡ、ＴＰＨＡ、ＥＬＩＳＡ、ＧＩＣＡ等方法用于梅毒的确认试验，检测的是抗梅毒螺旋体特异性抗体ｔｇＧ或ｔｓＭ。ＩｇＧ抗体即使经足够的抗梅毒治疗后，血清检测仍可保持阳性，因而这类试验不能作为判定是否需要治疗和监测疗效的手段。２．２．１ＴＰＨＡ：用经过醛化和鞣酸化的鸡红细胞做抗原载体，吸附从兔睾丸中提取的粗制梅毒螺旋体粉碎物抗原，检测血清中特异性梅毒螺旋体抗体，该方法抗体滴度ｌ：８０阳性才有诊断意义。试剂制备过程排除了各种非特异性反应。因此，ＴＰＨＡ的敏感性和特异性较高。但检测时间较长，不适于大批量的筛选实验，价格昂贵，且判断结果难以自动化，试验结果判定常带有主观性。２．２．２ＴＰＰＡ：在ＴＰＨＡ的基础上，以明胶颗粒作为抗原载体代替绵羊红细胞，检测血清中特异性梅毒螺旋体抗体，敏感性高于ＴＰＨＡ的１—３个稀释度［４］，是目前临床上常用的梅毒血清试验。，ＩＰ队操作较简便，结果清晰易判断，但价格昂贵，且结果判断难以自动化。２．２．３ＴＰ—ＥＬＩＳＡ：采用基因工程体外表达得到的梅毒螺旋体特异抗原包被微孔滴定板，检测血清中的抗ＴＰ—ＩｇＭ和抗ＴＰ—ＩｓＧ抗体，利用酶的放大效应，提高检测的灵敏度，且采用纯化的基因重组抗原，提高了其检测的特异性。此方法操作简便，不受样本纤维蛋白和溶血等影响，一次可完成多份标本的检测，试验结果由仪器分析，客观而准确，被公认为梅毒血清学实验诊断的首选方法【５Ｊ。２．２．４ＧＩＣＡ：采用纯化的基因重组，ＩＰ抗原，以胶体金作为标记物，于硝酸纤维素膜上进行反应，以万方数据双抗原夹心法原理快速定性检测人血清中的ＴＰ特异性ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体。ＧＩＣＡ法的敏感性和特异性与ＥＬＩＳＡ法基本一致，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）｛６］，但其影响因素小，操作简单，耗时较短，抗体滴度低时更易观察结果【７］，适用于性病门诊的快速检测、街头无偿血者的筛查以及紧急用血，特别是成分血（如血小板）的筛检。２．２．５唧：用聚丙烯凝胶电泳将梅毒螺旋体上的各种抗原分子分开，再转移到硝酸纤维膜上作为抗原检测病人血清，如果出现梅毒螺旋体的特异性区带，即可确诊。免疫印迹技术用于血清中的抗体检测，特异性好，操作简便，判断结果客观准确。利用此技术检测抗梅毒螺旋体ＩｇＭ抗体，有利于作出以下判断：①早期梅毒；②先天梅毒；③梅毒螺旋体再感染。梅毒螺旋体进入机体后，首先产生的是ｔｇＭ抗体，然后是ＩｇＧ、ＩｇＡ抗体。因此，ＩｇＭ抗体检测可应用于梅毒的早期诊断。在先天性梅毒的检测方面，由于ＩｇＧ抗体是持续存在的，而且梅毒孕妇的ＩｓＧ抗体可以穿透胎盘滋养层，进入胎儿的血液循环中，因此对胎儿做梅毒血清学检测并不能确定血清反应的抗体是否来自胎儿本身。而ＩｓＭ分子量较大，一般不能够通过胎盘，所以当新生儿血清中检测到特异性的ＩｇＭ抗体时，说明胎儿在母体宫内时已经受到了梅毒的感染［８］。因此，ＩｇＭ的检测可以作为早期先天梅毒的确诊试验。经过抗梅毒治疗后，人体内的ｔｓＧ仍然持续存在，而Ｉ洲抗体水平下降并消失，当梅毒再次感染人体时，人体内的ＩｇＭ会再次升高，所以ＩｇＭ的检测还可以用于梅毒复发再感染的确诊指标。参考文献：［１］邵勇．梅毒流行病学特点及防治研究［Ｊ］．临床和实验医学杂志，２００８，７（２）：１５—１６．［２］孟冬娅，方秀菊．常用梅毒检测方法的临床诊断意义［Ｊ］．沈阳部队医药，２００８，２１（４）：２８５．［３］田绿波，陈肖潇，樊学军，等．３种梅毒筛查方法的比较（Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００８，１８（８）：１５６７一ｌ５６８．｛４３程文海，谢礼豪，黄澍杰，等．４种方法在Ｉ期梅毒实验诊断中的比较观察［Ｊ］．中国皮肤性病学杂志，１９９９，１３（１）：３０一３１．［５］ＷｏｚｎｉｃｏｖａＶ，ＶａｌｉｓｏｖａＺ．ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆＣＡＰ．ＴＩＡＳｅｌｅｃｔ—－Ｓｙｐｈ．．Ｇｅｎｚｙｉｌｌ屺．．１ｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙｉｎｓｙｐｈｉｌｉｓｔｅｓｔｉｎｇｏｆａｈｉｓｈｒｉｓｋｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ：ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｄｉｓｃｏｒｄａｎｔｒｅｓｕｈｓ［Ｊ］．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００７，４５（６）：１７９４。１７９ｒ７．第３３卷２００９年第６期黑龙江医学ＨＥＩＬＯＮＧＪＩＡＮＧＭＥＤＩＣＡＬＪＯＵＲＮＡＬＶ０１．３３．Ｎｏ．６Ｊｕｎ．２００９４５３联合用药治疗中重度高血压疗效观察金顺实（哈尔滨市南岗区大成医院，黑龙江哈尔滨１５０００１）摘要：１１的评价缬沙坦和氢氯噻嗪联合治疗中／重度高血压的临床价值。方法中／重度高血压病人１００例，随机分成２组。观察组每日晨起服用缬沙坦８０ｍｇ／放：，氢氯噻嗪１２．５。２５ＩＩｌｇ／次；对照组每日晨起服用缬沙坦８０ｎｌｇ／次，疗程为８周。疗效判定：显效：舒张压下降≥１．３ｋＰａ并且降至正常，或下降９２．６ｋＰａ，收缩压降至正常；有效：虽然舒张压下降＜１．３ｋＰａ，但已降至正常，或下降１．３．２．５２ｋＰａ，收缩压观察组显效率７２％，对照组显效率５０％，两组差异有下降≥３．９ｋＰａ；无效：血压下降未达上述标准。结果显著性；观察组总有效率９２％，对照组总有效率７２％，两组差异有显著性。结论缬沙坦和氢氯噻嗪联合治疗中重度高血压的临床疗效，明显优于缬沙坦单一用药。关键词：中／重度高血压；治疗；缬沙坦；氢氯噻嗪学科分类代码：３２０．２４１０中图分类号：Ｒ５４４．１文献标识码：Ｂ文章编号：１００４—５７７５（２００９）０６—０４５３—０２ＣｕｒａｔｉｖｅＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆＴｒｅａｔｍｅｎｔｏｎＭｉｄｄｌｅ—－ｈｅａｖｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ、订ｔｈＶａｌｓａｒｔａｎａｎｄＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅＩＩＮＳｈｕｎ一出ｏｆＨａｒｂｉｎＣｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ（ＴｈｅＤａｃｈｅｎｇＨｏｓｐｉｔａｌＮａｎｇａｎｇ１５０００１，Ｃｈｉｎａ）ｗｉｔｈＶａｌｓａｒｔａｎａｎｄｎｙ．ｑｄａｎｄＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈ．Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏａｓｓｅ鹪ｔｈｅｃｕｒａｔｉｖｅＶａｌｕｅｏｆＴｒｅａｔｍｅｎｔＯｉｌｍｉｄｄｌｅ—ｈｅａｖｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ５０ｃａ８∞ｏｆｍｉｄｄｌｅ—ｈｅａｖｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｗｉｔｈＶａｌｓａｒｔａｎ８０ｍｇｐｏｉａｚｉｄｅ１２．５～２５ｌＩｌｇｐｏｑｄ，ｆｏｒ８ｗｅｅｋｓ；ＣｏｎｔｒｏｌＴｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐ，５０ｅａ￥Ｇ粥ｏｆＴｈｅｔｏｌａｌｑｄ，ｆｏｒ８ｗｅｅｋｓ；Ｏｂｓｅｒｖｅｄｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓｏｎｍｉｄｄｌｅ—ｈｅａｖｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｗｉｔｈＶａｌｓａｒｔａｎ８０ｍｓｐｏｅｆｆｅｃｔｉｖｅｒａｔｅＷｒｉｔｓ９２％ｉｎｏｂｓｅｒｖｅｇｒｏｕｐａｎｄ７２％ｉｎｃｏｎ－ｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｍｉｄｄｌｅ—ｈｅａｖｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｗｉｔｈＶａｌｓａｒｔａｎａｎｄＨｙｄｍｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅｍｉｇｈｔｂｅｂｅｔｔｅｒｔｈａｎｗｉｔｈＶａｌｓａｒｔａｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｍｉｄｄｌｅ—・ｈｅａｖｙＨｙｐｅｒｔｅｍｉｏｎ；Ｔｗ＿ａｍ硷ｎｔ；Ｖａｌｓａｒｔａｎ；Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｍｔｈｉａｚｉｄｅ高血压是最常见的血管性疾病，也是导致心脑血管事件的最重要的危险因素。目前，在接受高血压治疗的患者中，血压控制效果很不理想，特别是对中重度高血压病人的控制率效果更欠佳。因此，中、重度高血压的联合用药，一直是医学工作者探讨的主要问题。２００７—１０—２００８—１１间，我院采用缬沙坦与氢氯噻嗪联合应用治疗中、重度高血压患者５０例，收到满意效果。现报告如下。［６］石安平，冯丽珍，陶敏，等．３种梅毒过筛检测方法的评价［Ｊ］．内蒙古医学杂志，２００８，４０（５）：６１８—６１８．１资料与方法１．１一般资料选择我院２００７—１０—２００８—１１间，门诊及住院的１００例中、重度高血压患者。其中，男６２例，女３８例。平均年龄４５～７８岁。中度高血压７２例，重度高血压２８例。病程１—２３年。１．２诊断标准全部病例均停用影响血压的药物２周以上，并［８］杨帆，张荣，周华，等．梅毒螺旋体ＩｇＭ抗体蛋白印迹试验诊断新生儿胎传梅毒的探讨（Ｊ］．中华皮肤科杂志，２００４，３７（６）：３２６—３２８．（编辑：薛凡）（收稿日期：２００９—０４—０７）［７］刘小平，邓岩．１３种梅毒血清学诊断方法在梅毒诊治中的应用价值［Ｊ］．检验医学，２００６。１９（４）：３１０．万方数据
