砖 轴 融ｏｄ． ｛ ｎ・ 篷产 腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵的影响 刘 娜 ，安晓萍 ，齐景伟 ，仝宝生 ，陈大勇 ，于长青。 （１．内蒙古农业大学动物科学学院，内蒙古呼和浩特０１００１８； ２．内蒙古斯隆生物技术有限责任公司，内蒙古呼和浩特０１ｌ５１７） 摘 要：试验旨在研究在发酵底物和种子液中分别添加２％腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵产物中活菌数、有 机酸含量、还原糖含量以及合成胞外多糖的影响。结果表明：在底物和种子液中分别添加２％的腐植酸钠在植物 乳杆菌固态发酵前期（２４ ｈ）刺激了植物乳杆菌的生长，其活茵数显著高于对照组（Ｐ＜Ｏ．０５），进而提高了代谢产 物中乳酸和乙酸的产量，对还原糖的利用和胞外多糖的合成无影响；在发酵后期（３６ ｈ），底物和种子液中分别 添加腐植酸钠对发酵产物中的活菌数、还原糖的利用情况以及胞外多糖的合成均无影响。腐植酸钠的具体作 用机理还有待于进一步研究。 关键词：腐植酸钠：植物乳杆菌：固态发酵 中图分类号：Ｓ８１６ 文献标识码：Ａ 文章编号：０２５８—７０３３（２０１４）０５—００７９—０４ 固态发酵是在没有或几乎没有自由流动水的湿 饲料转化率等功能＿５＿。同时，大量研究也表明，植物 乳杆菌可以通过胃定植于肠道，调节正常菌群＿６＿，抑 制腐败菌的生长和繁殖，其发酵产物对动物机体的 生理功能和应激反应等也起到积极的促进作用。然 而，把腐植酸钠作为底物或在种子液中添加对植物 乳杆菌固态发酵的影响研究却很少有报道。故本研 究在植物乳杆菌固态发酵的底物和种子液中分别添 加一定量的腐植酸钠，通过测定发酵产物中活菌数、 固态基质上所进行的微生物发酵过程【ｌ＿ １，它不仅可 以起到提供碳源、氮源、水分、无机物和其他营养物 的作用，同时还为微生物的生长提供了一个固定的 位置ｒ ３ｌ。利用固态发酵生产的生物饲料添加剂简化 了生产工艺，具有高产、简易、低能耗、低投资和无 三废污染等优点，同时其产品还增加了多种维生素、 酶类物质及未知生长因子。 腐植酸类物质是一类广泛存在于自然界中的天 然弱酸性有机混合物【４１。腐植酸作为饲料添加剂应 用在生产养殖上，具有能使饲料中的油脂不易变质， 减少不良气味的产生，促进饲料在消化器官中的迅 速分散，提高消化酶的活性，增强畜禽免疫力，提高 收稿日期：２０１３－０８—２１：修回日期：２０１３—０９—１８ 资助项目：农业科技成果转化资金项目（２０１１ＧＢ２Ａ４００００１） 作者简介：刘娜（１９８８一），女，在读硕士研究生，主要从事生物饲 料的研究．Ｅ—ｍａｉｌ：３８２６９７５７８＠ｑｑ．ｃｏｎ 通讯作者：齐景伟（１９６６一），男，教授，主要从事反刍动物生物饲 料研究．Ｅ—ｍａｉｌ：ｑｉｊｉｎｇｗｅｉ一６６＠１２６．ｔｏｍ 有机酸含量、还原糖含量以及胞外多糖的合成量来 判定腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵产物品质的影 响。以期通过添加腐植酸钠来更好地改善植物乳杆 菌固态发酵的品质，并为腐植酸钠在固态发酵领域 的有效利用提供理论依据。 １材料与方法 １．１材料 １．１．１菌种植物乳杆菌Ｐ８（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ Ｐ８），由北京和美科盛生物技术有限公司保存并提 供。 ｓｈｅｅｐ（Ｐ＜０．０５）；Ｈａｎｐｅｒ＇ｓ ｂｏｄｙ ｈｅｉｇｈｔ ｗａｓ ｓｈｏｒｔｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ（Ｐ＜０．０１）；ｔｈｅ ｍｅａｔ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ（ｎｅｔ ｍｅａｔ ｗｅｉｇｈｔ，ｎｅｔ ｍｅａｔ ｒａｔｉｏ，ｅｙｅ ｍｕｓｃｌｅ ａｒｅａ）ａｎｄ ＧＲ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｈａｎｐｅｒ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｓｍａｌｌ－ｔａｉｌ ｓｈｅｅｐ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅ ｈｉｎｄ ｌｅｇ Ｓ ｎｅｔ ｍｅａｔ ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ ｂｒｉｓｋｅｔ Ｓ ｔｏｔａｌ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ｈａｎｐｅｒ ｓｈｅｅｐ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ３６．５２％ａｎｄ ５８．４４％ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈａｔ ｏｆ ｓｍａｌｌ－ｔａｉｌ ｈａｎ ｓｈｅｅｐ；ｍｅａｔ ｑｕａｌｉｔｉｅｓ（ｍｅａｔ ｃｏｌｏｕｒ，ｍａｒｂｌｉｎｇ ａｎｄ ｓｈｅａｒ ｆｏｒｃｅ） ｏｆ ｈａｎｐｅｒ ｓｈｅｅｐ ｗｅｒｅ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ｔｈａｔ ｏｆ ｓｍａｌｌ－ｔａｉｌ ｈａｎ ｓｈｅｅｐ（Ｐ＜０．０５），ｙｅｔ ｔｈｅ ｃｏｏｋｅｄ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｐＨ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅｍ（Ｐ＞０．０５）．Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｈａｎｐｅｒ ｓｈｅｅｐ Ｓ ｆａｔｔｅｎｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｍｅａｔ ｑｕａｌｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ｔｈａｔ ｏｆ ｓｍａｌｌ－ｔａｉｌ Ｈａｎ ｓｈｅｅｐ，ａｎｄ ｉｔ ｉｓ ｓｕｉｔ ｔｏ ｐｒｏｄｕｃｅ ｌａｍｂ ｍｅａｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｆａｔｔｅｎ；ｍｅａｔ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ；ｂｏｄｙ ｓｉｚｅ ｉｎｄｅｘｅｓ；ｍｅａｔ ｑｕａｌｉｔｙ；ｍｕｔｔｏｎ ｓｈｅｅｐ 中围嘉教鸯 是 １．１．２原料豆粕、麸皮和糖蜜由内蒙古斯隆生物 技术有限责任公司提供。 １．１．３ 培养基 ＭＲＳ肉汤（１Ｌ）：蛋白胨１０ ｇ，牛肉 膏５ ｇ，酵母粉４ ｇ，葡萄糖２０ ｇ，吐温一８０ １ ｇ，磷酸 氢二钾２ ｇ，柠檬酸氢二氨２ ｇ，乙酸钠５ ｇ，硫酸镁 ０．２ ｇ，硫酸锰０．０５ ｇ，蒸馏水１０００ ｍＬ，固体培养基 加２％琼脂粉，１２１℃灭菌１５ ｍｉｎ。同态发酵培养基 由豆粕与麸皮４：１的比例组成，并添加糖蜜０．３％。 １．１．４ 试剂 腐植酸钠由天津市光复精细化工研 究所购置，可溶性腐植酸含量≥７９％。氢氧化钠、盐 酸、ｊ氯乙酸、葡萄糖、苯酚、亚硫酸钠、浓硫酸、酒 石酸钠等，均为分析纯。 １．１．５仪器恒温培养箱分光光度计超净工作台 离心机分析天平（感量０．０００１ ｇ）粉碎机离心机高 效液相色谱分析仪 １．２方法 １．２．１ 菌种的活化及种子液的制备将冷冻保存 的菌种接种于ＭＲＳ斜面培养基中，３７￣Ｃ静置培养４８ ｈ， 待形成菌落后挑取单个菌落接种于ＭＲＳ液体培养基 ３７℃、培养２４ ｈ，即得种子液。 １．２．２试验设计试验共分为３组，Ａ组为对照组， 底物和种子液中均不加腐植酸钠；Ｂ组在种子液中 添加２％的腐植酸钠（ｍ／Ｖ）；Ｃ组在底物中添加２％的 腐植酸钠（ｍ／ｍ）。３组的料水比均为１：１（ｍ／Ｖ），自然 ｐＨ，将植物乳杆菌按１０％的接种比例接种到固态培 养基中，置于３５℃恒温培养箱中培养３６ ｈ，发酵２４ ｈ 为发酵前期，发酵３６ ｈ为发酵后期，分别于发酵前期 和发酵后期测定发酵产物中的活菌数、有机酸含量、 还原糖含量以及胞外多糖含量。 １．２．３ 活菌数测定称取５ ｇ发酵产物溶于４５ ｍＬ灭 菌的生理盐水中，震荡混匀，于３７℃１２０ ｒ／ｍｉｎ振荡 ３０ ｒａｉｎ，静置后上清液为发酵液，取发酵液进行活菌 数的测定，采用平皿稀释倾倒计数法Ｉ １。 １．２．４有机酸含量测定发酵滤液离心（４ ５００ｘｇ， １０ ｒａｉｎ），上清液与２５％偏磷酸等体积｝昆匀以除去可 溶性蛋白质，静置３０ ｍｉｎ，离心（１２ Ｏ００ｘｇ，１０ ｒａｉｎ）， 上清液经过滤（０．４５ ｍ）供高效液相色谱测定 。 １．２．５还原糖含量测定将发酵液与浓度为１６％ 的二氯乙酸等体积混匀，离心（４ ５００ｘｇ，１０ ｒａｉｎ），上 清液采用３，５一二硝基水杨酸（ＤＮＳ）比色法进行 测定ｌｌＵ ，通过查标准曲线得出植物乳杆菌发酵物 中还原糖的含量，从而间接反映出还原糖被利用情 馥麓 誊０磐０ 况。 １．２．６胞外多糖含量测定取发酵液与１６％■氯 乙酸等体积混匀，离心（４ ５００ｘｇ，１０ ｍｉｎ），弃掉沉 淀。将上清液用４０％ＮａＯＨ调节ｐＨ到６．５～７．０，然 后９０℃水浴热处理１ ０ ｒａｉｎ，使残余蛋白变性、沉淀。 离心（４ ５００ｘｇ，１０ ｒａｉｎ），以除去残余蛋白。向离心后 的上清液中加入３倍体积的９５％乙醇，充分振荡，多 糖呈絮状沉淀析出，静置过夜，离 ｂ（４ ５００ｘｇ，１０ ａｒｉｎ）。 离心所得沉淀用７５％乙醇洗涤，至ＤＮＳ法检验无还 原糖反应为止，经洗涤后的沉淀用蒸馏水复溶，即得 多糖溶液。将制备好的多糖液采用苯酚一硫酸法进 行测定『１２－１３］，将测得的吸光值代入标准曲线，得 相 当于葡萄糖的多糖含量。 １．２．７ 统计分析 采用ＳＡＳ ９．０进行单因子方差分 析（ＡＮＯＶＡ）。差异显著时采用Ｄｕｎｃａｎ ｓ方法对各组 问平均数进行多重比较，结果均以平均值－４－标准差 表示 ２结果与分析 ２．１ 腐植酸钠对固态发酵产物中活菌数的影响 由 表１可见，Ｂ组（种子液中添加腐植酸钠）和Ｃ组（发酵 底物中添加腐植酸钠）的发酵产物在２４ ｈ的活菌数 都显著高于对照组Ａ（Ｐ＜０．０５），发酵３６ ｈ的产物中３ 组的活菌数差异不显著（Ｐ＞０．０５），说明腐植酸钠在 发酵底物和种子液中添加在发酵初期均可以促进植 物乳杆菌的生长，发酵后期也并不影响发酵产物中 活菌数的数量。 表１ 腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵中活菌数的影响ｘｌ０ 注：Ｉ司列数据肩标相同字母表乐差异不显著（Ｐ＞０．０５），相邻小写 字母不同表示差异显著（Ｐ＜０．０５） ２．２腐植酸钠对固态发酵中有机酸的影响 由表２ 可以看出，发酵２４ ｈ时试验组Ｂ和Ｃ即底物和种子液 中加腐植酸钠组的乳酸含量均显著高于对照组（Ｐ＜ ０．Ｏ１），而发酵３６ ｈ的Ｂ组与对照组差异不显著（Ｐ＞ ０．０５），但Ｂ组和对照组Ａ都显著高于ｃ组（Ｐ＜０．０１）。 说明在发酵前期底物和种子液中添加腐植酸钠都可 以促进植物乳杆菌代谢产乳酸，但在发酵后期底物 中添加腐植酸钠组代谢产乳酸降低，低于对照组和 如㈦ ０《 《 ・ 薹 表２ 腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵中有机酸含量的影响 ｍｇ・１００ ｇ 注：同行数据肩标相同字母表示差异不显著（Ｐ＞Ｏ．０５），相邻大写字母不同表示差异显著（Ｐ＜Ｏ．０１） 种子液中添加的效果。发酵２４ ｈｆｌ＇￣乙酸产量ｃ组显著 高于Ｂ组（Ｐ＜Ｏ．０１），Ｂ组显著高于Ａ组（Ｐ＜Ｏ．０１），说明 在发酵前期底物中的乙酸产量依次为底物添加腐植 酸钠组＞种子液添加腐植酸钠组＞对照组。发酵３６ ｈ 的乙酸产量Ａ组与Ｂ组差异不显著（Ｐ＞Ｏ．０５），但都显 著高于Ｃ组（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），说明在发酵后期底物中添加 腐植酸钠组的乙酸产量较低，低于对照组和种子液 添加腐植酸钠组。 ２．３腐植酸钠对固态发酵中还原糖含量的影响还 原糖含量以葡萄糖计，腐植酸钠对固态发酵产物中 还原糖含量的影响见表３。在发酵前测得的发酵底 物中还原糖的含量为０．５５ ｍｇ／ｍＬ，发酵２４ ｈ和３６ ｈ 的各组产物中还原糖含量均有剩余，说明植物乳杆 菌生长所需的碳源是足够的。由表３可以看出，发酵 ２４ ｈ和３６ ｈ的产物中Ｂ组、ｃ组与对照组Ａ无显著差异 （Ｐ＞Ｏ．０５），即种子液和底物中添加腐植酸钠与对照 组还原糖的利用情况是相似的，说明腐植酸钠对植 物乳杆菌同态发酵中还原糖的利用情况没有影响。 表３ 腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵中还原糖含量的影响 ｍｇ・ｍＬ一 注：『司列数据肩标相同字母表不差异不显著（Ｐ＞Ｏ．０５），市Ｈ邻小写 字母不同表示差异显著（Ｐ＜Ｏ．０５）。下表同 ２．４腐植酸钠对固态发酵中胞外多糖含量的影响 由 表４可以看出，Ａ、Ｂ、Ｃ ３组在发酵２４ ｈ和３６ ｈ测得的 胞外多糖均在０．０５的显著水平上差异不显著。扣除０ ｈ对照样品中的多糖量，即为实际合成的多糖。实际 合成的多糖含量见表５，不同时问段３组间的多糖产 量也差异不显著（Ｐ＞Ｏ．０５），说明在底物和种子液中 添加腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵合成多糖含量 无影响。 ３ 讨 论 在植物乳杆菌固态发酵的底物和种子液中各添 表４腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵中胞外多糖含量的影响 ｍｇ・Ｌ一 表５ 腐植酸钠对植物乳杆菌固态发酵中胞外多糖产噩的影响 ｍｇ・Ｌ一 加２％的腐植酸钠在发酵前期（２４ ｈ）促进了植物乳 杆菌的生长，其原因可能是腐植酸钠吸附了固态基 质中的碳源、氮源等营养物质，营养物质黏合在了一 起，从而使得植物乳杆菌能更好和更快地利用营养 物质，所以在发酵前期表现出了刺激生长的作用。 而在发酵后期，随着时间的增加，可利用的营养基质 是有限的，故３６ ｈ各组的活菌数差异不显著，同时说 明了腐植酸钠在固态基质中对植物乳杆菌是有促进 生长的作用。 乳酸菌为化能异养型微生物，需要单糖进行代 谢活动，尤其是以葡萄糖作为碳源和能源，经发酵 作用后将单糖转变为低分子的乳酸和其他有机酸， 从而获取生命代谢所需要的能量。依据微生物发酵 糖类物质的代谢途径和产物的差异，将乳酸菌的发 酵作用划分为同型乳酸发酵和异型乳酸发酵２种类 型。发酵乳杆菌主要进行异型乳酸发酵ｌｌ４１，异型乳 酸发酵依赖磷酸戊糖途径将葡萄糖分解为等摩尔的 乳酸、二氧化碳和乙酸（或乙醇）。在发酵初期，底物 和种子液中添加腐植酸钠促进植物乳杆菌的生长， 植物乳杆菌生长的越多，则代谢产生的乳酸就越多， 因此在发酵２４ ｈＨ＋试验组的乳酸含量显著高于对照 组。发酵后期，对照组随着营养物质的利用也产生 了大量的植物乳杆菌，这些菌经过代谢产生的乳酸 也越来越多，最终与种子液添加腐植酸钠组的乳酸 产量不相上下。但底物中添加腐植酸钠组的乳酸产 固鸯教东蠡 露煎 誊 ・ ∽ 量在发酵后期却低于其他２组，可能是由于在发酵前 ［４］ 田晓．生化黄腐酸菌肥复配Ｔ艺优化及应用研究［Ｄ】．西安： 西北大学 ２００８． 期，底物中添加腐植酸钠促进植物乳杆菌的生长，使 其代谢产生大量乳酸，随着时间的推移乳酸越来越 多，发酵产物中的ｐＨ越来越低，抑制了植物乳杆菌 的生长，从而使发酵后期的乳酸产量显著低于其他 两组。 ４ 结 论 １５］ 王琦，曾宪成，孙树梅，等．腐植酸与生物肥料Ｉ ＪＩ．腐檀酸，２００２， （１）：４—６． ［６］ｄｅ Ｖｒｉｅｓ Ｍ Ｃ，Ｖａｕｇｈａｎ Ｅ Ｅ，Ｋｌｅｅｒｅｂｅｚｅｍ Ｍ，ｅｔ ．Ｌａｃｔｏｂａｅｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ－ｓｕｒｖｉｖａｌ，ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｄａｉｒｙ Ｊ，２００６，１６（９）： １０１８—１０２８． ［７］Ｐｒｏｕｌｘ Ｍ，Ｗａｒｄ Ｐ，Ｇａｕｔｈｉｅｒ Ｓ Ｆ，ｅｔ ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｕｌｔｒａｆｉｈｅｒｅｄ ｃａｓｅｉｎ ｈｙｄｒｏｌｙｚａｔｅ 发酵底物中添加腐植酸钠与种子液中添加腐 植酸钠在固态发酵前期（２４ ｈ）均可以促进植物乳 杆菌的生长，进而促进其代谢产乳酸和乙酸。在发 酵后期，添加腐植酸钠的２组对植物乳杆菌的活菌 数，还原糖的利用情况以及胞外多糖的产生均无 ｆｒａｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｌａｉｔ，１９９４，７４：１３９—１５２． ［８］ 林秋萍，李瑾，冯书惠，等．挥发性脂肪酸和乳酸的测定方 法研究［Ｊ］．饲料工业，２００６，（１５）：３６—３７． ［９］ 陈永福，王记成，云振宁．高效液相色谱法测定传统发酵乳 中的有机酸组成［Ｊ１．中围乳品Ｔ业，２００７，（１）：５６—６０． ［１０１黄洁，宋纪蓉，史红兵，等．苹果发酵液中残余还原糖的测 定方法比较ｌＪ】．１二业微生物，２００１，３１（３）：３８—４０． ［１１］齐香君，苟金霞，韩戌瑁，等．３，５－二硝基水杨酸比色法测定溶 影响。腐植酸钠的具体作用机理还有待于进一步 的研究。 参考文献： ［１］ 徐福建，陈洪章，李佐虎．固态发酵Ｔ程研究进展…．生物 液中还原糖的研究【ＪＪ＿纤维素科学与技术，２００４，１２（３）：１７—２０． ［１２］朱奇，郭善利，陈彦，等．酸乳中胞外多糖（ＥＰＳ）的提取及抑 瘤活性研究…．乳业科学与技术，２００５，（３）：１０３—１０５． ｆｌ３］王迎花，曹郁生，陈燕．产胞外多糖乳酸菌筛选及胞外多糖 丁程进展，２００２，２２（１）：４４—４８． 【２】 Ｓｔｕａｒｔ Ｄ Ｍ，Ｍｉｔｃｈｅｌｌ Ｄ Ａ，Ｊｏｈｎｓ Ｍ Ｔ，ｅｔ ．Ｓｏｌｉｄ—ｓｔａｔｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ｒｏｔａｔｉｎｇ ｄｒｕｍ Ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓ：Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｖａｒｉａｂｌｅｓ ａｆｆｅｃｔ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｐｈｅｎｏｍｅｎａ 提取方法［Ｊ『．乳业科学与技术，２００７，（４）：１６６—１６８． ［１４】Ｗｉｓｓｅｌｉｎｋ Ｈ Ｗ，Ｗｅｕｓｔｈｕｉｓ Ｒ Ａ，Ｅｇｇｉｎｋ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｍａｎｎｉｔｏｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ：ａ ｒｅｖｉｅｗ ｌＪ１．１ｎｔ Ｄａｉｒｙ Ｊ，２００２， ［Ｊ１．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ，１９９９，６３（４）：３８３—３９１． 【３］戚以政．影响固态发酵速率的因素及其动力学【Ｊ］．化学反应 Ｔ程与１一艺，１９９５，ｌ１（１）：１８－２４． １２（２—３１：１５１一ｌ６１． Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｕｍａｔｅ ｏｎ Ｓｏｌｉｄ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＬＩＵ Ｎａ ，ＡＮ Ｘｉａｏ—ｐｉｎｇ ，ＱＩ Ｊｉｎｇ－ｗｅｉ ，ＴＯＮＧ Ｂａｏ—ｓｈｅｎｇ ，ＣＨＥＮ Ｄａ—ｙｏｎｇ ，ＹＵ Ｃｈａｎｇ—ｑｉｎｇ （１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｈｕｈｈｏｔ ０１００１８，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｓｉ Ｌｏｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ，ｍｐａｎｙ，Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｈｕｈｈｏｔ ０１ １５１７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｗａ ｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ａｍｏｕｎｔ ｓｏｄｉｕｍ ｈｕｍａｔｅ ａｄｄｅｄ ｔｏ ｓｏｌｉｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｏｎ ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ，ｏｒｇａｎｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｅｘｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａ“ｄｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，ｗｈｉｃｈ ｕｓｅｄ ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ａｓ ａ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｔｒａｉｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ２％ｓｏｄｉｕｍ ｈｕｍａｔｅ ａｄｄｅｄ ｔｏ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｔｆｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｓｔａｇｅ ｏｆ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ（２４ ｈ），ａｎｄ ｔｈｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｍａｉｎ ｍｅｔａｈｏｌｉｔｅ ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｉｔ ｈａｄ ｎｏ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｅｘｏｐｏ１ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｎｅｖｅｒｔｈｅｌｅｓｓ，ｉｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｓｔａｇｅ ｏｆ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ（３６ ｈ），ｂｏｔｈ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ａｄｄｉｎｇ ｓｏｄｉｕｍ ｈｕｍａｔｅ ｈａｄ ｎｏ ｅｆｆｅｃｔ Ｏｉｌ ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｅｘｏｐｏ１ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ．（Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ）Ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｈｕｍｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｄｉｕｍ ｒｅｍａｉｎｓ ｔｏ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｓｏｄｉｕｍ ｈｕｍａｔｅ；Ｚａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ；ｓｏｌｉｄ ｓｔａｔｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ 事 象襞奢曩