邀生 壁 年９月第３卷第３期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｉｃｍｈｅｓ．衄ｄ ｈ ６ｏｎ “纳米细菌＂与疾病的研究进展 区德明廖贵清 ２０世纪８０年代后期，芬兰科学家Ｋａｊａｎｄｅｒ等在 进行哺乳动物细胞培养时，用透射电子显微镜扫描 Ｎｉｌ的分离、培养与鉴定 通常采用纳米孔径滤膜法分离ＮＢ，采集血液、 检查时发现细胞内存在一种超微结构。１９９０年他 正式将这种原核微生物命名为“纳米细菌” （ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ，ＮＢ），并申请了专利，后来将其称为“钙 化性纳米颗粒”（ｃａｌｃｉｆｙｉｎｇ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，ＣＮＰ）。ＮＢ能 在菌体周围产生矿化外壳，作为结晶核心，导致被感 染组织或细胞发生病理性钙化。ＮＢ及其生物矿化 作用的发现，为人类多种病理性钙化疾病的研究提 供一个新的切入点，越来越受国内、外学者的关注。 由于体积显著低于理论上细菌的下限，其存在与否 引起了广泛争论，成为当前研究的一个热点问题。 本文对ＮＢ的生物学特征、与疾病的关系及存在的 争议等作一综述。 Ｎｉｌ的微生物学特征 ＮＢ属革兰阴性菌，呈球状或球杆状，无荚膜与 鞭毛，直径８０～５００ Ｂｉｎ，能通过０．２２ ｔａｎ的滤膜，菌 体周围有一层厚薄不一的矿化外壳。ＤＮＡ基因序 列分析表明，ＮＢ与蛋白细菌家族 亚群的布鲁菌、 巴尔通菌同属，具有相同的１６Ｓ ｒＲＮＡ片段。ＮＢ新 陈代谢率极慢，仅为大肠埃希菌的１／１０ ０００，在有血 清和无血清的细胞培养基中，ＮＢ平均倍增时间分别 为３ ｄ和６ ｄ。ＮＢ的矿化外壳使其在高温、强酸等 条件下仍能存活，高剂量７射线（２５～３５ ｋＧｙ）在室 温下照射１６ ｈ，能抑制其生长Ｌ１ Ｊ。许多抗生素治疗 对其无效或在超出生理浓度下才能起抗菌作用，但 四环素、呋喃妥英、甲氧苄啶等能在生理浓度下起灭 菌作用，而氨苄西林、氨基糖苷类及万古霉素能在生 理浓度下起抑菌作用，５．氟尿嘧啶能抑制其繁殖。 此外，氨基己酸、柠檬酸盐、乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）、 阿糖胞苷能抑制ＮＢ的矿化作用，而不影响其生长、 繁殖［２】。 作者单位：中山大学光华Ｉ：１腔医学院，广州５１００８０ 通讯作者：廖贵清，Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｒｌｉａｏｇｕｉｑｉｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｎ 尿液、唾液或去矿化结石的离心沉淀物，高温灭菌后 经０．２２ ｔａｎ滤膜过滤，生理盐水稀释５倍，１ ５００ ｒ／ ｍｉｎ离心４５ ｍｉｎ，取管底溶液，经０．２２ ｔａｎ滤膜过滤 至细胞培养基中，在３７℃、ｐＨ ７．４、５％Ｃ０２：９５％空 气条件下培养。培养状态下的ＮＢ可用４Ｏ０倍相差 显微镜观察其生长情况；用ＤＮＡ荧光染料（Ｄａｐｉ或 Ｈｏｅｃｈｓｔ）按普通细菌ＤＮＡ染色的条件对ＮＢ的ＤＮＡ 进行染色均不成功，而当按照线粒体ＤＮＡ以及病毒 ＤＮＡ染色条件对ＮＢ的ＤＮＡ进行染色时，可观察到 特征性荧光；用ＮＢ特异性抗体进行荧光染色也可 清晰地显示ＮＢ的存在；利用电子显微镜对经负染 的ＮＢ进行观察，可以清晰地显示单独或聚集成簇 的ＮＢ以及其表面的生物被膜结构；而用透射电子 显微镜对ＮＢ的超薄切片进行观察，可以清晰地显 示其内部结构 Ｊ。 ＮＢ的生物矿化作用 在不含血清的培养基中培养ＮＢ，１周内可见 ＮＢ周围形成几微米厚的生物被膜，且紧紧贴附于培 养瓶底部，２ ３周后生物被膜明显增厚。用能量色 散型ｘ线分析（ｅｎｅｒｇｙ ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅ Ｘ．ｍｙ ｍｉｅｍａｎａｌｙｓｉｓ， ＥＤＸ）法对生物被膜的化学组分进行分析，显示钙磷 峰值与羟基磷灰石极其相似，电子显微镜观察以及 傅立叶转换红外频谱（Ｆｏｕｒｉｅｒ ｔｒａｎｓｆｏｒｍ ｉｎｆｒａｒｅｄ ｓｐｅｃｔｏｒｓｃｏｐｙ，丌ｍ）分析显示，其主要成分为碳酸羟 基磷灰石（ｃａｒｂｏｎａｔｅ ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ）。ＮＢ并不产生尿 激酶和碱性磷酸酶，而且即便经过长达数周的培养， 培养基的ｐＨ值也不会出现明显变化，一直稳定在 ７．４左右。这表明在ＮＢ周围的羟基磷灰石结晶源 自生物大分子，即生物矿化现象并非是由ｐＨ值改 变所导致的简单的物理结晶现象。而在含血清的培 养基中，由于存在骨桥蛋白（ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ）、骨钙素 （ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ）、胎球蛋白（ｆｅｔｕｉｎ）等抑制蛋白，能明显 抑制ＮＢ这种生物矿化现象＿２ｊ。 生物与感染２００８年９月第３卷第３ｆＭｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄＩｎｆｅｃｔｉｏｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ—ＮＢ与疾病的研究状况 ＮＢ具有如此独特的生物矿化能力，已引起国 内、外学者的关注。业已发现，ＮＢ与多种组织内病 理性钙化或硬化的发生、发展密切相关。 １．ＮＢ与泌尿系统疾病 ＮＢ与疾病的研究始于 泌尿系统结石。早期研究中，有学者将有放射活性 标记的ＮＢ注人兔体内，发现肾脏具有较高的放射 活性，电子显微镜下亦发现肾小管上皮细胞内及表 面存在ＮＢ，推测ＮＢ可能诱发肾结石。而在对肾结 石进行ＮＢ的检测中，大多实验获得较高的检出率。 随后有学者将培养的ＮＢ经皮穿刺肾内注射，成功 建立了ＮＢ致大鼠肾结石动物模型，提出ＮＢ作为结 石核心致人类。肾结石形成的设想。近年学者们继续 重复并拓展前人的研究。Ｋｈｕｌｌａｒ等 ３从１例北印度 种群６５岁患者的肾结石中分离出ＮＢ，并以常规浓 度的碘化丙啶检测到ＮＢ ＤＮＡ，指出该活的微生物 与Ｋａｊａｎｄｅｒ研究的不同之处是他发现这些ＮＢ对温 度敏感。Ｃｉｌｆｑｉｏｇｌｕ等＿４ Ｊ实验证明，在微重力条件下 ＮＢ的增殖速率高于常规条件下培养，从而解释了航 天员较易患肾结石的现象。Ｓｈｉｅｋｈ等ｌ５ Ｊ将ＮＢ经静 脉注入鼠体内，８周后肾皮质和髓质出现局灶性慢 性炎症细胞浸润，肾小管上皮出现退行性改变，其表 面有钙化结节，电子显微镜下发现ＮＢ附于肾小管 上皮表面，并侵入上皮细胞，此研究展示了ＮＢ所致 的病理改变。 除结石以外，ＮＢ也与其他一些泌尿系疾病相 关。有学者在多囊肾患者的囊液中发现ＮＢ抗原， 并从中培养出ＮＢ，认为其发病机制可能为ＮＢ以其 周围的矿化外壳为载体，吸附尿液中各种毒素，并使 细菌溶酶体破裂释放出毒素和自由基，损害肾小管 上皮细胞，使其脱落至尿液中，久之造成肾小管梗阻 和肾组织不可复性损害，形成肾囊肿。还有学者猜 测ＮＢ与慢性前列腺炎、前列腺钙化或结石、慢性盆 腔疼痛综合征的发生相关，对患有慢性盆腔疼痛综 合征的患者进行抗ＮＢ治疗，患者症状都有明显 好转。 ２．ＮＢ与心血管系疾病感染因素与心血管疾 病相关早已被提出，然而常规致病原感染无法解释 为何病变组织发生钙化。近年的ＮＢ矿化能力被揭 示后，许多研究发现ＮＢ感染与多种钙化性心血管 病变相关。学者们先后报道从动脉粥样硬化斑块、 钙化动脉瘤、钙化心脏瓣膜、左心房室间瓣膜赘生物 以及硬化性颈动脉或主动脉病变组织中鉴定出ＮＢ 样结构，从而推测ＮＢ在这些病变形成中起重要作 用Ｅ６－９］。此外，抗ＮＢ治疗亦被引入治疗钙化性心血 管疾病的研究。有学者对血清学检查ＮＢ阳性的冠 状动脉硬化患者进行抗ＮＢ治疗４个月，患者冠脉 狭窄程度有不同程度的改善，患者的心绞痛症状亦 有缓解。 ３．ＮＢ与肿瘤 早期有学者发现部分肿瘤细胞 表面有ＮＢ黏附的受体，可能介导ＮＢ进入瘤体内产 生钙化，在一些肿瘤钙化灶或细胞内也发现存在 ＮＢ。例如，有学者从卵巢腺癌的沙砾体和腹水中检 测到ＮＢ抗原，电子显微镜观察发现ＮＢ，推测ＮＢ在 卵巢癌中对微钙化灶的形成起作用。近年来， Ｈｕｄｅｌｉｓｔ等 采用免疫组织化学检测卵巢腺癌沙砾 体抗原，并首次采用反转录一聚合酶链反应（ＲＴ．ＰＣＲ） 方法检测ＮＢ基因，阳性率达１００％，而无沙砾体卵 巢腺癌的阳性率为０，从而推断ＮＢ在沙砾体的形成 中起重要作用。 ４．ＮＢ与人类免疫缺陷病毒 有学者提出，ＮＢ 与人类免疫缺陷病毒（ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ， ＨＩＶ）阳性机体竞争常引起共同感染，ＨＩＶ阳性机体 竞争钙磷，使骨密度降低；ＮＢ还能通过黏合神经束 膜而引起ＨＩＶ阳性患者周围神经病变。近年研究 中，Ｐｒｅｔｏｆｉｕｓ等ｌｌｌｌ对Ｈ１Ｖ阳性母亲及其子女的血液 样品进行ＮＢ抗原检测，阳性率分别为８５％和４６％， 提示ＮＢ为Ｈ１Ｖ阳性患者常见的机会感染因子，并 能通过垂直传播给子代。Ｓｏｍｍｅｒ等 认为ＮＢ能 促进ＨＩＶ的基因多样性。 ５．ＮＢ与其他疾病 由于ＮＢ在生物体内的广 泛分布，科学家还发现ＮＢ与胆结石、硬皮病、睾丸 结石、软化斑、白内障、关节炎、老年痴呆症、松果体 钙化、胎盘结石和牙髓结石等疾病或病理性矿化的 发生、发展密切相关。研究ＮＢ与这些疾病的关系 还在不断深入之中。 关于ＮＢ存在与否的争议 ＮＢ以其极其微小的体积而被命名，由于大大低 于理论上细菌体积的下限，因而其存在性受到许多 科学家的质疑。自ＮＢ提出以来，关于其存在与否 的争议从未停止。Ｋａｊａｎｄｅｒ的反对者认为其发现ＮＢ 的实验存在污染，或者实验设计有错误，鉴定ＤＮＡ 时提高染料浓度及延长反应时间造成非特异性染 色，因此ＮＢ存在的证据不可靠。而Ｋａｊａｎｄｅｒ及其支 持者认为ＮＢ是不能用标准的微生物培养基进行培 养的，也不能用传统的方法进行检测。Ｃｉｓａｒ等㈣虽 ・ｌ８４・ 生 与感染２００８年９月第３卷第３期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｉｃｍｂｅｓＩ皿ｄＩｎ ｄ０盯，ｓｅＤｔ ２０Ｏ８．ｖ０ｌ ３．Ｎｏ．３ 从胎牛血清、唾液、牙菌斑和牙髓结石等培养出疑似 ｆｏｒ ｋｉｄｎｅｙ ｓｔｏｎｅ ｆｏｎｎａｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｓｐａｃｅ ｎｉｇｈｔｓ：ｅｎｈａｎｃｅｄ ｇｒｏ￣ｄａ ｏｆ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａ ｉｎ ｍｉｅｒｏｇｒａｖｉｔｙ．Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ，２００６，６７： ４８３～４９１ ＮＢ样物质，能作为矿化中心形成矿物质，这种生物 矿化能力在多次传代后仍能保持，但从分子水平上 未能检出有生命活性的核酸或蛋白质，认为这些矿 化现象为无生命生物大分子引发，不支持ＮＢ的存 在。Ｍｏｒｇａｎ等¨ ｊ对一系列疾病包括伴有钙化的基 底细胞癌、皮下钙化结节、肿瘤性钙盐沉积及毛母质 瘤进行ＮＢ检测，检测结果均为阴性。Ｄｒａｎｃｏｕｒｔ ５．Ｓｈｉｅｋｈ ＦＡ，Ｋｈｕｌｌａｒ Ｍ，Ｓｉｎｇｈ ＳＫ．Ｌｉｈｏｇｅｎｔｃｓｉｓ：ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｎａｌ ｃａｌｃｉｉｆｃａｔｉｏｎｓ ｂｙ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａ．Ｕｍｌ Ｒｅｓ，２００６，３４：５３— ５７ ’ ６．Ｍｉｌｌｅｒ ＶＩＭ，Ｒｏｄｇｅｒｓ Ｇ，Ｃｈａｒｌｅｓｗｏｒｔｈ ＪＡ，ｅｔ ａ１．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉｌａ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｉｎ ｃａｌｅｉｉｅｄ ｈｕｍａｎ ａｒｔｆｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｃａｒｄｉａｃ ｖａｌｖｅｓ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｈｅａｒｔ Ｃｉｒｃ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２Ｏ０４，２８７： ｌｌ１５～ｌ１２４ 等＿１ ｊ用扫描电子显微镜观察４例上尿路结石，均发 现纳米颗粒。另将１０例结石与３Ｔ６成纤维细胞共 ７．Ｐｕｓｋａｓ ＬＧ，Ｔｉｓｚｌａｖｉｅｚ Ｌ，Ｒａｚｇａ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａ－ｌｉｋｅ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ａｔｈｅｍｓｃｌｅｍｔｉｃ Ａｃｔａ Ｂｉｏｌ Ｈｕｎｇ，２００５，５６：２３３—２４５ 培养，其中３例出现细胞内空泡性变，然而Ｇｉｍｅｎｅｚ 染色、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色及特异性单克隆抗体检测未能发 现ＮＢ。随后，Ｋａｊａｎｄｅｒ￣ｌ６Ｊ也表示由于ＮＢ缺乏令人 ． ８．ＪｅｌｉｃＴＭ，Ｃｈａｎｇ ＨＩ－Ｉ，Ｒｏｑｕｅ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ 满意的１６Ｓ ｒＲＮＡ序列，“ＣＮＰ”的命名更为合适。 Ｐｉｐｅｒ等＿１７Ｊ采用透射电子显微镜观察３９２块退行性 主动脉瓣组织石蜡切片，未能发现ＮＢ；同时采用 ＰＣＲ，未能检测到ＮＢ ＤＮＡ。Ｒａｏｕｌｔ等ｌ＿１８Ｊ从生物化学 特性、蛋白组学、核酸等方面对ＮＢ进行分析后，提 出ＮＢ并非生物体，而是矿物．胎球蛋白复合物。 结 语 ｃａｌｃｉｉｃ ａｏｒｔｆｉｃ ｖａｌｖｅ ｓｔｅｎｏｓｉｓ．Ｊ Ｈｅａｒｔ Ｖａｌｖｅ Ｄｉｓ，２０Ｏ７，１６：１０１ ～１ｏ５ ９．Ｂｍｔｏｓ－Ｐ６ｒｅｚ￣Ｌ￣，Ｓ￣ｎｃｈｅｚ ＰＬ，Ｇａｒｃｉａ ｄｅ Ｃｒｕｚ Ｓ，ｅｔ ａ１． Ａｓｓｏｃｉａｉｔｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｒｆ－ｒｅｐｌｉｃａｔｉｇ ｃａｎｌｃ￣ｎｇ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｎｄ ａｏｒｔｉｃ ｓｔｅｎｏｓｉｓ：ａ ｐａｓｓｉｂｌｅ ｌｉｎｋ ｔｏ ｖａｌｖｅ ｃａｌｃｉｉｆｃａｔｉｏｎ．Ｅｕｒ Ｈｅａｒｔ Ｊ，２０ｏ８，２９：３７１—３７６ １０．Ｈｕｄｅｌｉｓｔ Ｇ，Ｓｉｎｇｅｒ ＣＦ，Ｋｕｂｉｓｔａ Ｅ，ｅｔ ａ１．ＰＩＬ：￣ｅｎｃｅ ｏｆ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａｉｎ ｐ￣ｉｎｍｏｍａ ｂｏｄｉｅｓ ｏｆ ｏｖａｒｉｎ ｃａｎｃｅｒ：ｅｖａｉｄｅｎｃｅ ｏｒ ｐｆａｔｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｒｏｌｅ ｉｎ ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ ｂｉｏｍｉｎｅｒｓｌｉ￣ａｔｉｏｎ． Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００４，４５：６３３～６３７ ｌ１．Ｐｒｅｔｏｒｉｕｓ ＡＭ．Ｓｏｍｍｅｒ ＡＰ，Ａｈｏ ｌ（Ｍ．卸［、，ａｎｄ ｎａｎｏｂａｃｌｅｒｉａ． ｝｛ＩＶ Ｍｅｄ，２００４，５：３９１～３９３ 目前，尚没用足够证据证实“ＮＢ”为真正微生物 体，对这种超微结构的命名，“ＣＮＰ”似乎更为合适。 不管ＣＮＰ是否为真正的微生物体，ＣＮＰ与人类疾病 的相关性已被揭示，因此我们更应关注ＣＮＰ的致病 机制，以及如何预防和治疗ＣＮＰ所致的疾病。 参考文献 １２．Ｓｏｍｍｅｒ ＡＰ．Ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ ｐｒｏｔｅｉｓ ａｎｄ ｍＶ—Ｐａｒｔｎ ＩＩ．Ｊ ｅｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ，２００５．４：１０２２～１０２４ １３．Ｃｉｓａｒ ＪＯ，Ｘｕ ＤＱ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ａｎ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｉｏｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ Ｎａｄ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵｓＡ，２００ｏ，９７：１１５１１～１１５１５ １．Ｋａｊａｎｄｅｒ ＥＯ，Ｃｉｆｔｑｉｏｇｌｕ Ｎ．Ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ：ａｎ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｉｎｔｒａ－ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｌｃｉｉｆｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｏｎｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｐｒｏｅ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９９８，９５：８２７４ ～１４．Ｍｏｒｇａｎ ＭＢ．Ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ａｎｄ ｃａｌｃｉｎｏｓｉｓ ｃｕｆｆｓ．Ｊ Ｃｕｔａｎ Ｐａｔｈｏｌ，２００２，２９：１７３～ｌ７５ １５．Ｄｒａｎｅｏｕｒｔ Ｍ，Ｊａｃｏｍｏ Ｖ，Ｉ．￣ｐｉｄｉ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ａｔｔｅｍｐｔｄ ｉｅｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ ｆｒｏｍ ｕｐｐｅｒ ｕｒｉｎａｒｙ ｔｒａｃｔ ８２７９ ２．Ｃｉｆｔｃｉｏｇｌｕ Ｎ，Ｍｉｌｌｅｒ－Ｈｊｅｌｌｅ ＭＡ，ｎｊｅｌｅ ＪＴ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａ ｂｙ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｄｒｕｇｓ ａｓ ｍｅｓｕＹａｅｄ ｙ ｂａ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｍｉｅｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２Ｏ０２， ４６：２０７７—２０８６ ３．Ｋｈｕｌｌａｒ Ｍ，Ｓｈａｒｍａ ＳＫ，Ｓｉｎｇｈ ＳＫ，ｅｔ ａ１．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｒｅｎａｌ ｓｔｏｎｅｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌ，２０ｏ３，４ｌ：３６８—３７２ １６．Ｋａｊａｎｄｅｒ ＥＯ． Ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ－・ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ ｃｌａｃｉｆｙｉｇ ｎｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．Ｌｅｔｔ Ａｐｐｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２ＯＯ６，４２：５４９～５５２ １７．ＰｉｅｒＣ，Ｄｒｅｉｅｒ Ｊ，Ｋｌｐｅｅｓｉｅｋ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｎａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｔｏ ｐｒｏｍｏｔｅ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ａｏｒｔｉｃ ｖａｌｖｅ ｓｔｅｎｏｓｉｓ？Ｊ Ｈｅａｒｔ Ｖａｌｖｅ Ｄｉｓ，２ＯＯ６， １５：４９９～５０１ ｓｔｏｎｅｓ ｏｆ ａ ｎｏｒｔｈ Ｉｎｄｉａｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｕｒｏｌ Ｒｅｓ，２００４，３２：１９０～ １９５ １８．Ｒａｏｕｌｔ Ｄ，Ｄｒａｎｅｏｕｒｔ Ｍ，Ａｚｚａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｎａｎｏｂａｅｔｅｒｉａ ａｌｅ ｍｉｎｅｒａｌｏ ｆｅｔｕｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ，２００８，４：ｅ４１ ４．Ｃｉｆｔｇｉｏｇｌｕ Ｎ，Ｈａｄｄａｄ ＲＳ，Ｇｏｌｄｅｎ ＤＣ，ｅｔ ａ１．Ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｃａｋｌｓｅ （收稿日期：２００８－０４－０２）
