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温州地区阿尔茨海默病载脂蛋白E基因多态性研究

来源:意榕旅游网
・146・ 浙江临床医学2011年2月第13卷第2期 温州地区阿尔茨海默病 载脂蛋白E基因多态性研究 朱未名 胡海燕 虞海萍林长闯 【摘要】 目的探讨温州地区阿尔茨海默病(AD)与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性的关系。方法收集温州地区AD患 者51例,另取正常对照者54例,采用聚合酶链反应法(PCR)进行ApoE基因分型。结果对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论ApoEs4基因分布频率AD组与 ApoEs4是AD的风险基因,可以作为AD患者早期诊断和治疗的依据。 【关键词】 阿尔茨海默病APoE基因基因多态性 【Abstract】 Objective To explore the relationship between Alzheimer disease and polymorphisms of ApoE gene in Wenzhou area.Method 5 1 patients with Alzheimer disease(AD)and 54 nornla]controls in Wenzhou area were enrolled in this study.The ApoE gene polymorphism was analyzed with polymerase chain reaction(PCR).Results The patients with ApoEs4 had more psychological and behavioral disorders than normal controls(P<0.05).Conclusion ApoEs4 is a risk gene for Alzheimer disease, and the patients with ApoEe4 should serve as early diagnosis and treatment evidence of the AD. 【Key words】 Alzheimer disease ApoE gene Polymorphisms 阿尔茨海默病(alzheimer’S disease,AD)是老 年人常见病、多发病,主要症状是智力、记忆力、感 官定向能力、判断力、语言思维能力不可逆的进行 性退化,并常伴有性格改变。病理特征:神经元外 的B一淀粉样蛋白(p—amyloid protein,AB)聚集 形成老年斑(senil plaques,SP),神经元内tau蛋白 异常聚集形成神经纤维缠结(neurofibrillary tan— 区里对60岁以上老人进行筛查,筛选出AD患者 51例,同时选择本社区非AD老年人54例作对照。 AD组男20例,女31例,年龄60~90岁,平均 (71.34±7.34)岁;文化程度文盲l8例、小学13 例、初中14例、高中4例、大学2例;简易智力状态 检查(MMSE)评分(10.4±7.9)分,日常生活活动 能力量表(ADL)评分(61.3±17.2)分。对照组54 例,男21例,女33例,平均年龄(7O.68±8.65)岁; 文化程度文盲11例、小学15例、初中l8例、高中 6例、大学4例;MMSE评分(26.2±3.2)分,ADL 评分(27.3±6.9)分。两组对象性别、年龄、文化 程度等差异无统计学意义,且无任何血缘关系,居 住温州均1年以上。对所有对象抽静脉血检测 gles,NFTs),脑皮质、海马胆碱能神经元及其突触 大量丢失,累及皮层动脉和小动脉出现血管淀粉 样变性。从基因多态性角度来审视本病已成为重 要的研究思路。本研究旨在探讨温州地区AD患 者与APoE基因多态性之间的关系。 1对象和方法 1.1对象采用DSM—IV—RAD关于AD的诊 ApoE基因,AD患者由2名精神科医师进行诊断 评价,评定认知功能、情感行为障碍,资料存挡。 1.2 ApoE基因检测(1)DNA提取:抽取5ml全 断标准和NINCDS—ADRDA的可能AD标准 , MMSE评分为13~24分的轻、中度痴呆患者;年龄 ≥50岁的男性或绝经后的女性;Hachinski缺血指 血,EDTA抗凝,采用苯酚一氯仿法抽提基因组 DNA。(2)ApoE基因的PCR扩增:根据引物设计 基本原则与已知ApoE基因序列,采用上海生工生 数<4分;无重大躯体疾病;排除脑外伤、抑郁性障 碍、研究前1个月使用精神药物或血管活性药物 者。2009年2月至2009年12月,对温州市3个社 作者单位:325003温州鹿城精神病医院(朱未名长闯) 物技术公司合成的引物,P1 为 5’AcAGAATTCGCCCcGGccTGGTACAC3’,P2 为 5'TAAGCTrGGCACGGCTGTCCAAGGA3’。PCR反 虞海萍林 应体系:总体系30txl,基因组DNA 21xl,10×Buffer (含镁)3Ixl,4×dNTP2txl,上游及下游引物各1Ixl, 325003温州医学院第二临床学院中医教研室(胡海 燕) TaqDNA聚合酶0.2txl,无菌双蒸水21Ixl。PCR反 浙江临床医学2011年2月第13卷第2期 ・147・ 应条件:97℃预变性5min,然后按95℃变性1rain, 人群中占的比例最大,而ApoEe4被认为是AD的 67℃退火1min,72℃延伸2min,共30个循环,最后 进一步72 ̄C延伸7min,4 ̄C保存。所得产物用2% 琼脂糖凝胶电泳进行鉴定,紫外光下呈现265bp特 异PCR扩增片段。(3)ApoE基因型鉴定:在8 l PCR扩增产物中加入0.5 l限制性内切酶Hha I (宝生物公司),10×Buffer 1 l,无菌双蒸水0.5txl, 37℃保温6h。酶切产物加入8%聚丙烯酰胺凝胶 板样品槽中,8V/em电压下垂直电泳1.5h后,溴 危险因素,可以影响AD的发病时间,其危险效应 与年龄、性别相关 J。陈等等 对中国汉族人 群中160例散发性AD患者和195例正常老年人 ApoE基因多态性分布的差异进行了对照研究,结 果表明,ApoE 3种等位基因£2、£3、£4的频率在 AD组和对照组分别为0.056、0.713、0.231和 0.082、0.844、0.074,ApoE等位基因携带个体患 AD的危险为非携带个体的3.82倍。麦以成等 化乙锭染色,紫外光下观察,根据电泳带型确定 ApoE的基因型。 1.3统计学处理ApoE基因型和等位基因频率 以百分率(%)表示,组问比较用x 检验。 2 结果 2.1 两组ApoE基因频率分布比较 共检出 APoE基因型e2/2、e2/3、e3/3、e2/4、e3/4、e4/4, AD组与对照组APoE基因型频率分布比较e2/3、 e3/4、e4/4差异有统计学意义(P<0.05)。见 表1。 表1两组ApoE基因型频率分布比较[n(%)] e2/2 e2/3 e3/3 e2/4 e3/4 a4/4 AD组(n=51) 1(2 0)2(3 9) 32(62 7)2(3 9)10(19 6) 4(7 8) 翌 型 : !:1 2 :! .1 2 :l塑: :!! !: 2 1 :! 注:与对照组比较, P<0 05 2.2 两组等位基因频率分布比较 检出等位基 因s2、s3、e4,AD组与对照组等位基因分布频率比 较,£2、s4差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。 表2两组等位基因频率分布[n(%)] AD组(n=51) 3(5 9) 38(74 55) 10(19 6) 对照组(n=54) 7(13 0)43(79 6)4(7 4) 3 讨论 AD是老年人的常见病、多发病,随着世界人 口的老龄化,AD已成为继心脏病、肿瘤和中风之 后的第四位死亡原因。由于本病具有隐匿性,使 其早期诊断出现困难,而本病发展的不可逆性,又 使其早期的诊治对本病的预后具有重要影响 J。 从基因多态性角度来审视本病已成为重要的研究 思路,人们发现了越来越多的与AD相关的基因, 使其在预测和治疗AD方面起到积极的作用。 对AD发病,关注最多的是载脂蛋白E基因 (apolipoprotein E,ApoE),因其基因位点的多态 性,常见的等位基因为ApoEe2、e3、e4。ApoEe3在 对广东佛山地区88例晚发AD及97例正常老年 人ApoE基因多态性进行了比较研究,结果表明, £4基因频率AD患者为0.188,正常老年人为 0.082,并与晚发AD呈正相关。本研究结果也证 实s4基因在AD发病中起重要作用,在AD组与 正常对照组,共检出ApoE基因型e2/2、e2/3、e3/ 3、e2/4、e3/4、e4/4,AD组与对照组ApoE基因型 频率分布比较,e2/3、e3/4、e4/4差异均有统计学 意义(P<0.05);等位基因两组比较,£2、£4差异 有统计学意义(P<0.05)。 以上结果可能与ApoE基因对中枢神经系统 损伤及智力障碍有关。张许来等¨ 采用AD行为 病理评定量表(BEHAVE—AD)对48例AD患者 进行精神行为测评,并与58例正常老年人进行比 较,同时进行ApoE基因分型,以了解AD患者精神 行为障碍的临床特征以及与ApoE基因多态性的 相关性,结果显示AD患者在偏执、妄想、幻觉、行 为紊乱和攻击行为等方面与正常对照组差异有统 计学意义,而ApoE基因检查显示携带ApoEe4基 因的AD患者精神行为障碍更为明显(P<0.05或 P<0.01);同时对AD患者的执行功能障碍与 ApoE基因相关性进行了研究,结果显示AD患者 的记忆、执行功能、计算力较健康对照组有明显差 异,而携带s4基因型者认知功能损害更明显(P< 0.05或P<0.01)¨ 。任艳峰等¨ 对74例轻度 认知功能障碍者及134例认知功能正常老年人进 行ApoE基因多态性检测,结果表明,ApoEe4与 ApoEe2基因均与认知有关,其中ApoEe4基因是 轻度认知障碍的可疑危险因素,而ApoEe2可能是 降低轻度认知障碍危险性的因素。 参考文献 1 American Psychiatirc Association Diagnostic and statistical nmnual of mental Disorders.4th ed.(DSM IV).Wanshington DC:American ・148・ 浙江临床医学2011年2月第13卷第2期 Psychiatric Association,1994.143. Alzheimer’S disease:the NIMH genetics initiative.Neurology, 2洪震.我国近年阿尔茨海默病流行病学研究现状与展望.老年医 学与保健,2005,11(4):195~198. 1997,48(1):139~147. 8陈等,张俊武,张振馨,等.载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨海默 病.遗传学报,2003,30(12):1167~1170. 3屈秋民,乔晋,杨剑波,等.西安地区中老年人的痴呆患病率调 查.中华老年医学杂志,2001,20(4):283~286. 4 Manoz DG,Feklman H.Cause of A1zbeimer,S disease.CM A J, 9麦以成,罗有年,顾鸿,等.载脂蛋白E基因多态性与Alzheimer病 的关联研究.临床精神医学杂志,2007,17(6):365~366. 10张许来,张晓莉,陶领知,等.阿尔茨海默病精神行为障碍与载脂 蛋白E基因研究.临床精神医学杂志,2008,18(3):156~158. 2000,162(1):65~72. 5 Corder EH,Saunders AM,Strittmatter WJ,et a1.Gene dose of apo- lipoprotein E type 4 allele and the risk of Alzheimer’S disease in late 11张许来,张晓莉,陶领知,等.阿尔茨海默病的执行功能障碍与 APOE基因相关性研究.中国老年学杂志,2007,27(10):1897 —onsetfamilies[see commentsj.Science,1993,261:921~923. 6 Kamboh MI.Apolipoprotein E polymorphism and susceptibility to 1899. Alzheimer’S.disease.Humbiol,1995,67(2):195~215. 7 Blacker D,Haines儿,Rodes L,et a1.ApoE一4 and age at onset of 12任艳峰,曲成毅,苗茂华.轻度认知障碍与APOE基因多态性关 系.中国公共卫生,2007,23(7):862~863. 200例甲状腺癌回顾性临床分析 马 立 汪大田 宋玉庆 【摘要】 目的通过对经手术治疗的200例甲状腺癌患者资料分析,探讨本地区甲状腺癌发病特点及其预后相关因素。 方法对1998年1月至2009年l2月本院手术治疗的200例甲状腺癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果本地区甲 状腺癌发病率逐年增加,男女之比约1:4,男性甲状腺癌高发年龄为60~69岁,女性甲状腺癌高发年龄为5O一59岁;甲状腺 癌病理类型依次为乳头状癌、滤泡癌、未分化癌和髓样癌,乳头状癌所占比例显著高于其它病理类型,且各种病理类型男女 比例不同。术后主要并发症为声音嘶哑、低钙抽搐和手足麻木。1、3年生存率分别为99.8%和96.7%。患者术后生存率和 病理组织类型相关,预后从好到坏依次为乳头状癌、滤泡癌、髓样癌和未分化癌。结论 甲状腺癌发病率呈逐年上升趋势; 乳头状癌所占比例显著高于其它病理类型甲状腺癌;手术治疗是甲状腺癌最有效治疗方式;术后生存率和病理类型相关。 【关键词】 甲状腺癌手术治疗并发症预后 【Abstract】 Objective To study the morbidity,surgical therapy,complications and prognosis related factors of thyroid carcinoma.Methods Clinical data of 200 cases of thyroid carcinoma received surgical therapy from Jan 1998 to Dec 2009 was systematically and retrospectively analyzed.Results The ratio of incidence rate of man and woman was 1:4,which increased with years.The most frequent incidence ages of man and woman were 60~69 and 50~59 respectively.The most ̄equent pathologic types were papillary,follicular,anaplastic and medullar carcinoma;the papillary carcinoma was signiicantlfy more ̄equent than other pathologic types and they differed between man and woman.The postoperative complications were hoarseness,hypocalcemic convulsion and dead limb.1一year and 3一year survival rate were 98.8%and 94.7%respectively.Postoperative survival rate correlated with pathologic types(P<0.05);the prognosis from well to bad was papillary,follicular,medullar and anaplastic carcinoma.Conclusion The incidence of thyroid carcinoma increases with years and papillary carcinoma is signiicantlfy more frequent than other pathologic types.Surgical therapy is the most effective curative therapy for thyroid carcinoma.Postoperative survival rate correlates with pathologic types. I Key words】Thvroid carcinoma Clinical allalysis Surviva1 analysis 甲状腺癌是常见的内分泌恶性肿瘤,也是头 颈部常见的恶性肿瘤,占头颈部恶性肿瘤的 5.11% ,占全身恶性肿瘤的0.22%~1.0%E2 3, 作者单位:246001安徽省安庆市立医院肿瘤外科 近年来发病率呈逐年增加趋势 。尽管大多数 甲状腺癌预后较好,5年生存率达75%,但影响患 者术后生存率的因素较多,目前国内外在甲状腺 癌外科治疗方案选择和预后因素方面存在较大分 歧 。作者对本院1998年1月至2009年12月手 

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