ELISA法检测HBsAg室内质控方法讨论

摘要】目的 探讨ELISA法测定HBsAg的室内质控方法。方法：选择0.5IU/ml的HBsAg阳性质控品进行20次检测，先用即刻法和L-J质控图联合排除异常值后算出X、SD、CV，用该值绘制L-J质控图框架,再直接使用未经取舍的20次检测数据计算其X、SD、CV，绘制L-J质控框架，最后用同一批号的质控品测定值分别在上述两个不同质控框架中进行绘图验证.结论：先用即刻法和L-J质控图联合排除临界阳性质控品（0.5IU/ml）异常值后得出X、CV、SD，再用该组值绘制常规L-J质控图适合用于ELISA法检测HBsAg室内质控。 【关键词】 ELISA法；室内质控；异常值取舍

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）14-0103-02

ELISA法检测HBsAg的目的是正确判定HBsAg的阴性和阳性，因此进行

HBsAg室内质控的目标就有两点：1排除假阳性、假阴性2监测批间、批内变异。尽管关于ELISA检测HBsAg室内质控的文献很多，但都缺乏统一标准，尤其是用于作图的前20次数据是完全使用还是排除异常值后再使用未作介绍，为此我科室在参考相关文献后得出一种室内质控方法，现将相关方法讨论如下：

1.单独使用即刻法：即刻法虽为卫生部推荐，但仍存在“三态现象”、“迟后现象”、“可逆现象”[1]而且不能直观观察其连续性和上升下降的倾向， 因此单独使用即刻法进行ELISA检测HBsAg的室内质控不可取。

2.单独使用L-J质控图：单独使用L-J质控图可能导致假阳性、假阴性的出现且仍存在“可逆现象”，[2]因此单独使用改良L-J质控图达不到室内质控的最初目标。

3.即刻法与改良L-J质控法联合使用：优点（1）明确了即刻法中所谓“该值”应为所测数据中的极值并非当天测定值[1]。通过L-J质控图能得到直观的质控图，能显示其连续性趋势和上升下降的失控倾向。缺点：（1）若前三次数据CV过大则后面数据存在假在控现象，反之则可能出现假失控现象[2]。（2）由于直接使用前20次数据来计算X、CV、SD，存在前20次数据是否完全可靠的问题，若该组数据的CV偏大，就有假在控的可能。

材料与方法：1.试剂、仪器：万泰生物药业提供的ELISA法检测HBsAg试剂盒（批号：K20131211）、阳性质控品（万泰生物药业提供0.5IU/ml）选择0.5IU/ml质控品和阴性对照品完全能排除假阴性假阳性的发生[3]、洗板机：Rayto-3100、酶标仪：北京普朗 、WPS软件绘图。 2.方法

⑴ 0.5IU/ml阳性质控品随病人标本一同用万泰试剂进行检测，每天一次，共计20个阳性质控品的S/CO值，先完全使用未经处理的20次数据计算X、SD、CV并用该组值作为L-J质控图框架1，再将20次测定值经即刻法和改良L-J质控图联合分析排除异常值后计算X、CV、SD,用该组值作为L-J质控图框架2，最后

用同批号相同浓度的临界质控品测定值进行框架1和框架2的绘图，并进行比较。 ⑵质控规则：0.5IU/ml阳性质控品：3SD>S/CO>2SD为警告，S/CO>3SD为失控，S/CO<1.0为失控。阴性对照：S/CO﹤1为在控，S/CO≥1为失控。 结果：

图2（即刻法处理数据后作图）

图4（以处理后的前20次数据算出的X:2.8698、SD:0.619为框架作图）

结果分析： 1、图1和图2是以完全使用前20次数据和排除异常值后的数据分别作图其实质就是以不同X、SD进行作图。

2、图3中2月8日测定值0.837<1明显失控，但在该图中该点还处于-2SD至-3SD之间为警告，分析原因为异常值未舍去导致SD过大所致的。

3、图4中2月8日测定值0.837处于-3SD外为失控，2月2日4.211和2月12日1.525两点处于2SD-3SD之间为警告，符合质控规则。

图4的作用明显优于图3即前20次数据应用即刻法和L-J质控图法排除异常值后算出X、SD、CV进行绘图不能完全直接使用20次数据，否则可能出现假在控。

综上所述：0.5IU/mlHBsAg阳性质控品和阴性对照品完全能对HBsAg检测中的假阴性进行监控[3]，绘制常规L-J质控图前先用即刻法和L-J质控图联合排除异常值后算出的X、SD、CV作为框架再进行绘图，能及时发现失控和警告现象并能观察其连续性趋势和上升下降的失控倾向。 参考文献

1即刻法质控运用错误分析《检验医学与临床》2007年4月第4卷第4期250页-251页

2.即刻法用于酶联免疫吸附试验室内质控的探讨《海南医学》2009第20卷第4期11页-17页

3..ELISA法检测HBSAG室内质控方法及结果分析《实验与检验医学》2009第27卷第4期3页-356页