・２３７８・ 广东医学２０１０年９月第３１卷第１８期 Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｓｅｐ．２０１０。Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．１８ １４（５）：ｌ１９８—１２０３． ｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｄｉａｇｎ，２０００， ５（４）：３４１—３４８． ［１９］缪小平，杨椠，谭文，等．亚甲基四氢叶酸还原酶基因单核苷 酸多态性与大肠癌风险的关系［Ｊ］，中华预防医学杂志， ２００５，３９（６）：４０９—４１１． ［１５］ＢＯＣＣＩＡ Ｓ，ＨＵＮＧ Ｒ，ＲＩＣＣＩＡＲＤＩ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｔａ—ａｎｄ ｐｏｏｌｅｄ ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ Ｃ６７７Ｔ ａｎｄ Ａ１２９８Ｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｒｉｓｋ：ａ ｈｕｇｅ—ＧＳＥＣ ［２０］ＫＩＭ Ｄ Ｈ，ＡＨＮ Ｙ ０，ＬＥＥ Ｂ Ｈ，ｅｔ １．ａ ｒｅｄｕｅｔａｓｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ａｌｃｏｈｏｌ ｉｎｔａｋｅ，ａｎｄ ｒｉｓｋｓ ｏｆ ｃｏｌｏｎ ａｎｄ ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ，２００８，１６７（５）：５０５—５１６． ｎ６］ＺＩＮＴＺＡＲＡＳ Ｅ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒｓ ｉｎ Ｋｏｒｅａ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ，２００４，２１６（２）：１９９— ２０５． （ＭＴＨＦＲ）ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｗｉｔｈ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｇａｓｔｉｒｃ ｃａｎｃｅｒ：ａ ｍｅｔａ—ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ，２００６，５１（７）：６１８ —［２１］ＳＨＥＮ Ｈ，ＳＰＩＴＺ Ｍ Ｒ，ＷＡＮＧ Ｌ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ—ｔｅｔｒａｈｙｄｍｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ａｎｄ ｒｉｓｋ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ：ａ ６２４． ［１７ Ｊ司佩任，房殿春，张浩，等．胃癌亚甲基四氢叶酸还原酶基因 多态及其与微卫星不稳的关系［Ｊ］．中华流行病学杂志， ２０ｏ５，２６（１Ｏ）：７９４—７９９． ｅａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｐｒｅｙ， ２００１，１０（４）：３９７—４０１． ［２２］ＭＡＯ Ｒ，ＦＡＮ Ｙ，ＪＩＮ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃ． ［１８］ＬＥ ＭＡＲＣＨＡＮＤ Ｌ，ＷＩＬＫＥＮＳ Ｌ Ｒ，ＫＯＬＯＮＥＬ Ｌ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｃｏｆｏｒｅｃｔｌ ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅ ａｍｕｈｉｅｔｈ— ｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ａｎｄ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ：ａ ｍｅｔａ—ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ，２００８，５３（４）：３４０—３４８． ｎｉｃ ｃｏｈｏｒｔ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｐｒｅｙ，２００５， （收稿日期：２０１０—０４—１５编辑：蔡欣） 不同基因型的幽门螺杆菌耐药性分析 黄衍强 ，欧平 ，黄赞松弘，周喜汉 ，岑朝。，俞文强 右江民族医学院医学微生物学和免疫学教研室（广西百色５３３０００）； 贺州学院（广西贺州５４２８００）； 右江民族 医学院附属医院（广西百色５３３０００） ， 【摘要】 目的 了解ＣａｇＡ 及ＶａｃＡ 的幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）对克拉霉素的耐药情况，探索基 因分型与耐药性的关系。方法采集确诊为Ｈｐ感染患者的胃窦部黏膜样本进行Ｈｐ分离培养和鉴定，经鉴定后 ３７４ 选择３７４株Ｈｐ菌株，ＰＣＲ扩增ｃａ异Ａ 及ＶａｃＡ 基因；同时采用Ｅ—ｔｅｓｔ测定其对克拉霉素的敏感性。结果株Ｈｐ菌株中ＣａｇＡ 的有８７株，ＶａｃＡ 的有１１９株，ＣａｇＡ ／ＶａｃＡ 的有１５５株，ＣａｇＡ一／ＶａｃＡ一的有１３株，对克拉 霉素的耐药的有８２株，耐药率是２１．９３％，其中ＣａｇＡ 、ＶａｃＡ 、ＣａｇＡ ／ＶａｃＡ 、ＣａｇＡ一／ＶａｃＡ一的有分别有１６、２７、 ３６、３株。结论Ｈｐ对克拉霉素均有一定耐药性，ＣａｇＡ 及ＶａｃＡ 基因分型与耐药性无关。 【关键词】 幽门螺杆菌；基因型；耐药性 目前，幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）对抗生 素的耐药性是影响幽门螺杆菌感染根治效果的主要原 培养基、螺杆菌添加剂（广州迪景微生物科技有限公 司）；酪蛋白绵羊血（本实验室自制）；１％盐酸二甲基 因，尤其对甲硝唑、克拉霉素和阿莫西林的耐药率逐年 增加。因此Ｈｐ耐药菌株的研究己引起人们普遍关 注 。为了解Ｈｐ对克拉霉素等抗生素的耐药情况， 对苯二胺溶液、１％仅一萘酚一乙醇溶液、３％过氧化氢 溶液；幽门螺杆菌快速尿素酶试纸（杭州天和微生物 指导临床用药，克服耐药菌株的产生，提高根治率，本 研究于２００６－－２００８年在右江民族医学院附属医院选 试剂有限公司）；克拉霉素Ｅ—ｔｅｓｔ纸条（购自瑞典ＡＢ Ｂｉｏｄｉｓｋ公司）；微需氧袋（含５％氧的小型厌氧产气 袋、厌氧塑料袋、厌氧塑料袋封口夹、厌氧指示剂，广州 迪景微生物科技有限公司）；Ｈｐ Ｊ９９、ＡＴＣＣＡ３５０４标准 菌株（中国幽门螺杆菌保藏中心赠送）。 １．２ 方法 择就诊的胃溃疡及胃炎患者，从其胃黏膜中分离培养 Ｈｐ，并进行了耐药性观察分析。现报告如下。 １资料与方法 １．１ 一般资料 （１）菌株来源：选择２００６年１月至 １．２．１ Ｈｐ培养把采集的胃窦部黏膜先利用Ｈｐ快 ２００８年１２月在右江民族医学院附属医院就诊并经病 速尿素酶实验进行筛选，阳性者则收集保存于脑心浸 液培养基中，把培养基置保温瓶中冷冻送回实验室。 理诊断为胃溃疡、胃炎患者共４８２例，利用胃镜活检钳 采集患者胃窦部黏膜，进行Ｈｐ培养，菌株经尿素酶实 验、过氧化氢酶实验和Ｈｐ快速诊断实验进行鉴定。 （２）培养基与试剂：哥伦比亚血琼脂培养基、脑心浸液 在无菌工作台上把采集的胃黏膜和脑心浸液倒置在配 制好的哥伦比亚血琼脂培养基中，使用手术剪刀快速 把黏膜组织剪碎，然后使用Ｌ棒在哥伦比亚血琼脂培 养基表面把黏膜碎粒涂布均匀，迅速放入厌氧塑料袋， 剪开小型厌氧产气袋，放人厌氧指示剂，最后使用厌氧 塑料袋封口夹封闭厌氧塑料袋，放置３５℃培养７ ｄ 。 广西自然科学基金（编号：桂科自０４９９００２） △通信作者。Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｚａｎｓｏｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｅｏｍ