一种从新鲜真菌菌丝体中快速提取长片段DNA的方法[发明专利]

来源：意榕旅游网

专利内容由知识产权出版社提供

专利名称：一种从新鲜真菌菌丝体中快速提取长片段DNA的

方法

专利类型：发明专利

发明人：耿涛,王树昌,武华周,郭锡杰申请号：CN201810922357.3申请日：20180814公开号：CN1049749A公开日：20181207

摘要：本发明公开了一种从新鲜真菌菌丝体中快速提取长片段DNA的方法，包括菌体准备：取新鲜培养的真菌菌丝体，离心滤去水分后称取菌丝体，在液氮中迅速研磨成粉；细胞裂解：加入DNA提取缓冲液，加入60μL浓度为20mg/mL蛋白酶K，混匀后在65℃水浴30min；DNA提取：加入0.33mL浓度为KAc，冰浴20min，后酚:氯仿:异戊醇抽提，离心，取上清液加入无水乙醇沉淀，低温静置30min，离心收集沉淀；纯化处理：加入RNaseA，在37℃处理30min，后25:24:1的酚:氯仿:异戊醇和24:1的氯仿:异戊醇各抽提1次，低温离心5min；取上清液加入无水乙醇沉淀，挑取沉淀，漂洗，风干，溶于TE缓冲液中，保存备用。采用本方法提取的丝状真菌DNA量提高2倍，浓度达到277ng/μL，片段长≥20000bps，无降解，纯度高。

申请人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

地址：571101 海南省海口市龙华区城西学院路4号

国籍：CN

代理机构：北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人：赵蕊红

更多信息请下载全文后查看

因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容

查看全文