05白色念珠菌

白色念珠菌

1.简述

白色念珠菌（Candida albicans）又名白假丝酵母菌（Saccharomyces albicaus）属假丝酵母菌属（Saccharom yces）。白色念珠菌是条件致病菌，是医学全身性真菌感染病得重要组成之一，一旦感染，常可引起心内膜炎、肺炎、尿布疹、鹅口疮、阴道炎、脑膜炎及败血症等。

白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形，直径为3～6µm，革兰染色为阳性，但菌体着色不均匀，以出芽方式繁殖，在适宜的培养基上有芽生孢子及假菌丝生长，在假菌丝间其末端形成厚膜孢子。白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL，使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显白色。

白色念珠菌广泛分布于土壤、水和空气中，目前国内外的药品、视频标准已把白色念珠菌作为微生物检验中酵母菌的代表菌，因此有些药品依据给药途径和剂型将白色念珠菌作为控制菌是非常必要的

2.试验器材及条件

2.1设备及器皿

生化培养箱（23～28℃）、恒温培养箱（30～35℃）、水浴锅、显微镜、三角烧瓶、吸管、培养皿等。

2.2标准菌株

白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC(F)98001]

菌液制备 取新鲜白色念珠菌菌种接种至10ml沙氏葡萄糖液体培养基中，30～35℃培养24～48h，用0.9％无菌生理盐水稀释至含菌10～100cfu/ml。菌液可用沙氏葡萄糖琼脂培养基平板计数测定。

2.3培养基

沙氏葡萄糖液体培养基

沙氏葡萄糖琼脂培养基

念珠菌显色培养基（法国CHROMAGAR公司）

1％聚山梨酯80-玉米粉琼脂培养基

3.试验操作

取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2）直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉汤培养基中，培养24～48h。取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，经30～35℃，培养24～48h(必要时延长至72h)。

白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬货有褶皱。

若平板上无菌落生长或生长的菌落与上述菌落形态特征不符，判供试品未检出白色念珠菌。

若平板上生长的菌落与上述菌落形态特征相符或疑似，应挑选2～3个菌落分别接种至念珠菌显色培养基平板上，经30～35℃培养24～48h（必要时延长至72h）。若平板上无绿色或翠绿色的

菌落生长，判供试品未检出白色念珠菌。

4确认试验.

若平板上的菌落为绿色或翠绿色，挑取相符或疑似的菌落接种于1％聚山梨酯80-玉米琼脂培养基上，培养24～48h。取培养物进行染色，镜检及芽管试验。

芽管试验 挑取1％聚山梨酯80-玉米琼脂基上的培养物，接种于加有一滴血清的载玻片上，盖上盖玻片，置湿润的平皿内，置35～37℃培养1～3h，置显微镜下观察，可见到由孢子长出短小芽管。

若上述疑似菌为非革兰阳性菌，显微镜未见厚膜孢子、假菌丝、芽管，判供试品未检出白色念珠菌。