(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 107823520 A(43)申请公布日 2018.03.23
(21)申请号 201711092201.9(22)申请日 2017.11.08
(71)申请人 广州市络捷生物科技有限公司
地址 510670 广东省广州市高新技术产业
开发区揽月路80号广州创新基地B区第二层201-202单元(72)发明人 周锦珂 王丽华 黄裕 陈燕玲
张坚强 谢晓容 彭颖华 吴少莉 (74)专利代理机构 北京集佳知识产权代理有限
公司 11227
代理人 张春水 唐京桥(51)Int.Cl.
A61K 36/906(2006.01)A61P 17/14(2006.01)A61P 29/00(2006.01)
权利要求书2页 说明书17页 附图4页
A61P 17/04(2006.01)A61K 8/9794(2017.01)A61K 8/9789(2017.01)A61K 8/9761(2017.01)A61Q 7/00(2006.01)A23L 33/105(2016.01)B01D 11/02(2006.01)
CN 107823520 A(54)发明名称
一种防脱发中药组合物及其制备方法(57)摘要
本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种防脱发中药组合物及其制备方法。本发明提供了一种中药组合物，以重量份计，由以下组分制成：侧柏叶5～80份，何首乌1～80份，菟丝子0～70份，山柰1～70份，川芎1～60份，甘草0～60份，艾叶1～60份，苦参0～50份，女贞子1～50份，花椒1～50份，陈皮0～50份。实验证明，该中药组合物能够保护毛囊、有效促进真皮鞘细胞增殖、提高真皮鞘细胞的活性，具有促进毛发生长、消炎止痒的功效。本发明还提供了一种中药组合物的制备方法，该制备方法制备的中药组合物有效成分总黄酮含量高，能有效减少热敏感活性成分的分解变化，节能环保，并且最大限度的保留有效活性成分。
CN 107823520 A
权 利 要 求 书
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1.一种中药组合物，其特征在于，以重量份计，由以下组分制成：
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，以重量份计，由以下组分制成：
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，以重量份计，由以下组分制成：
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权 利 要 求 书
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4.一种中药组合物的制备方法，其特征在于，包括：a)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比(5～80)：(1～80)：(0～70)：(1～70)：(1～60)：(0～60)：(0～50)：(1～50)：(1～50)：(0～50)混合后粉碎，得到混合物；
b)将所述混合物在100℃或以下进行提取，得到中药组合物。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述提取为微射流提取。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述微射流提取的提取溶剂为水和/或低级醇；
所述提取溶剂与所述混合物的质量比为15～40：1；所述微射流提取的进料速度为10～30L/min；所述微射流提取的冷媒温度为0～100℃。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，将所述混合物在100℃或以下进行提取之后，得到中药组合物之前，还包括：
将所述混合物进行提取的提取液进行后处理。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述后处理具体为固液分离和浓缩；所述固液分离具体为采用离心进行固液分离。9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述微射流提取为采用微射流提取器进行提取；
所述微射流提取器包括：微射流提取单元；所述微射流提取单元包括：壳体、内齿环和微射流环；所述壳体为具有中空结构的圆柱体；
所述内齿环和所述微射流环径向贴附于所述壳体的内壁；所述内齿环无间隙地设置于所述微射流环的工作前端；所述微射流环将所述壳体隔成微射流提取腔室；所述微射流环开有微射流孔。
10.权利要求1至3任意一项所述中药组合物或权利要求4至9任意一项所述的制备方法制备的中药组合物在制备改善脱发产品中的应用。
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说 明 书
一种防脱发中药组合物及其制备方法
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技术领域
[0001]本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种防脱发中药组合物及其制备方法。背景技术
[0002]真皮鞘为包绕于毛囊外周的一层菲薄结缔组织，是维持和再生毛乳头的重要物质基础，也是毛囊再生的必要条件，在毛发生长中起着重要作用。近年来研究发现，毛囊真皮鞘细胞具有多向分化潜能等成体干细胞特性，可应用于创伤愈合领域。1966年到1967年，oliver等提出并证实了毛乳头是感应和维持毛发生长的必要条件，推测毛乳头或毛球切除后新生的毛乳头可能来源于邻近的真皮鞘细胞重建，当切除下1/3毛囊导致真皮鞘缺失时，毛乳头则无法再生，首次提出真皮鞘细胞可能具有维持和再生毛乳头的作用。在1992年，动物实验发现移植真皮鞘可使毛发生长恢复。[0003]目前，对真皮鞘细胞的研究集中在皮肤创伤愈合方向，只有少量应用于治疗脱发方面的报道，并且在治疗脱发方面主要是体外移植。株式会社资生堂申请号为201080069392.7的专利文献公开了含有CD36表达性结缔组织鞘细胞的用于再生毛囊的组合物，提供了含有表达CD36抗原的结缔组织鞘细胞以及任选地毛乳头细胞的组合物，通过该细胞组合物提供新的毛囊再生系统。在化疗脱发方向治疗方面，《茶多酚对化疗脱发的预防作用研究》(第二军医大学博士学位论文2008年4月)通过研究表明茶多酚在体外可通过对真皮乳头细胞的增殖、抗凋亡作用和提高真皮鞘细胞的细胞活力而促进人毛发的生长，从而降低化疗对脱发的影响。[0004]综上所述，目前在脱发治疗上，真皮鞘细胞的应用只局限于体外构建研究、体外移植和单个活性成分作用的基础研究，并未见有纯中药复方的产业化应用报道。中药复方具有多环节、多靶点、协同增效、毒副作用小等特点，在防脱治疗中具有西药不可比拟的优势。因此，开发一种能够全面、多效的在真皮鞘细胞方面具有防脱生发的中药组合物是非常有必要。
发明内容
[0005]有鉴于此，本发明提供了一种防脱发中药组合物，用于解决现有技术中没有中药组合物能够作用于真皮鞘细胞而治疗脱发的问题。[0006]本发明的具体技术方案如下：[0007]一种中药组合物，以重量份计，由以下组分制成：
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说 明 书
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[0008]
[0009]
优选的，以重量份计，由以下组分制成：
[0010]
[0011]
优选的，以重量份计，由以下组分制成：
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说 明 书
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[0012]
[0013]
本发明还提供了一种中药组合物的制备方法，包括：
[0014]a)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比(5～80)：(1～80)：(0～70)：(1～70)：(1～60)：(0～60)：(0～50)：(1～50)：(1～50)：(0～50)粉碎后混合，得到混合物；[0015]b)将所述混合物在100℃或以下进行提取，得到中药组合物。[0016]优选的，所述提取为微射流提取。[0017]优选的，所述微射流提取的提取溶剂为水和/或低级醇；[0018]所述提取溶剂与所述混合物的质量比为15～40：1；[0019]所述微射流提取的进料速度为10～30L/min；[0020]所述微射流提取的冷媒温度为0～100℃。[0021]优选的，将所述混合物在100℃或以下进行提取之后，得到中药组合物之前，还包括：
[0022]将所述混合物进行微射流提取的提取液进行后处理；[0023]优选的，所述后处理具体为固液分离和浓缩；[0024]所述固液分离具体为采用离心进行固液分离。[0025]优选的，所述微射流提取为采用微射流提取器进行提取；[0026]所述微射流提取器包括：微射流提取单元；[0027]所述微射流提取单元包括：壳体、内齿环和微射流环；[0028]所述壳体为具有中空结构的圆柱体；
[0029]所述内齿环和所述微射流环径向贴附于所述壳体的内壁；[0030]所述内齿环无间隙地设置于所述微射流环的工作前端；[0031]所述微射流环将所述壳体隔成微射流提取腔室；[0032]所述微射流环开有微射流孔。
[0033]本发明还提供了上述技术方案所述中药组合物或上述技术方案所述的制备方法制备的中药组合物在制备改善脱发产品中的应用。
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说 明 书
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综上所述，本发明提供了一种中药组合物，以重量份计，由以下组分制成：侧柏叶5
～80份，何首乌1～80份，菟丝子0～70份，山柰1～70份，川芎1～60份，甘草0～60份，艾叶1～60份，苦参0～50份，女贞子1～50份，花椒1～50份，陈皮0～50份。实验证明，该中药组合物能够保护毛囊、有效促进真皮鞘细胞增殖、提高真皮鞘细胞的活性，具有促进毛发生长、消炎止痒的功效。本发明还提供了一种中药组合物的制备方法，该制备方法制备的中药组合物有效成分总黄酮含量高，能有效减少热敏感活性成分的分解变化，节能环保，并且最大限度的保留有效活性成分。本发明还提供了该中药组合物在制备改善脱发产品中的应用，有利于促进改善脱发产品的开发。
附图说明
[0035]为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0036]图1为本发明中的一种微射流提取器的结构示意图；[0037]图2为本发明中的一种微射流提取单元中的引导环、内齿环、内外齿环和微射流环的局部主视图；
[0038]图3为本发明中提供的一种微射流环的示意图；
[0039]图4为本发明中药组合物对真皮鞘细胞增殖的影响(Edu显色标记图)；[0040]图5为本发明中药组合物对真皮鞘细胞增殖的影响(DAPI细胞核定位图)；
[0041]图6为本发明中药组合物对真皮鞘细胞增殖的影响(Edu显色与DAPI细胞核共定位图)；
[0042]图7为本发明中药组合物作用不同时间对真皮鞘细胞活性的影响；[0043]图示说明，1.驱动单元；2.吊拉环状物；3.电源接口；4.联轴器；5.第二冷媒出口；6.进料口；7.一级微射流提取腔室；8.螺旋推进叶片；9.二级微射流提取腔室；10.第一冷媒出口；11.出料口；12.三级微射流提取腔室；13.转轴；14.清洗排污出口；15.支架；16.引导环；17.第一冷却环；18.壳体；19.第一冷媒进口；20.第二冷媒进口；21.第二冷却环；22.底座；23.减震片；711.内齿环；712.微射流孔；713.微射流环；714.内外齿环。具体实施方式
[0044]本发明提供了一种中药组合物，用于解决现有技术中没有中药组合物能够作用于真皮鞘细胞而治疗脱发的问题。
[0045]下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0046]本发明提供了一种中药组合物，以重量份计，由以下组分制成：
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[0047]
[0048]
优选为，以重量份计，由以下组分制成：
[0049]
[0050]
更优选为，以重量份计，由以下组分制成：
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[0051]
本发明还提供了一种中药组合物的制备方法，包括：
[0053]a)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比(5～80)：(1～80)：(0～70)：(1～70)：(1～60)：(0～60)：(0～50)：(1～50)：(1～50)：(0～50)粉碎后混合，得到混合物；[0054]b)将所述混合物在100℃或以下进行提取，得到中药组合物。[0055]本发明中，粉碎为干法粉碎，将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比(5～80)：(1～80)：(0～70)：(1～70)：(1～60)：(0～60)：(0～50)：(1～50)：(1～50)：(0～50)粉碎后混合之后，得到混合物之前，还包括：过10～100目筛网，更优选为过20～50目筛网。[0056]本发明中，提取为微射流提取。
[0057]微射流提取的提取溶剂为水和/或低级醇，微射流提取的提取溶剂更优选为水，降低成本、提高效率，同时降低中药组合物的致敏几率，提高中药组合物的活性成分含量；[0058]提取溶剂与所述混合物的质量比为15～40：1，提取溶剂与混合物的质量比更优选为20～30：1；
[0059]微射流提取的进料速度为10～30L/min；[0060]微射流提取的冷媒温度为0～100℃，微射流提取的冷媒温度更优选为0～30℃。[0061]本发明中，将混合物在100℃或以下进行提取之后，得到中药组合物之前，还包括：[0062]将混合物进行提取的提取液进行后处理；[0063]后处理具体为固液分离和浓缩；
[0064]固液分离具体为采用离心进行固液分离。[0065]本发明中，固液分离的离心速度为2000～10000rpm，固液分离的离心速度更优选为4000～8000rpm；浓缩具体为反渗透浓缩至中药组合物含药材20％～30％。将混合物进行微射流提取之前还包括：将混合物与提取溶剂在20～30℃下搅拌0.5～1h。[0066]本发明中，微射流提取为采用微射流提取器进行提取；混合物与提取溶剂通过管道导入微射流提取器。
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请参阅图1至图3，图1为本发明中的一种微射流提取器的结构示意图；图2为本发
明中的一种微射流提取单元中的引导环、内齿环、内外齿环和微射流环的局部主视图；图3为本发明中提供的一种微射流环的示意图。[0068]微射流提取器包括：微射流提取单元；[0069]微射流提取单元包括：壳体18、内齿环711和微射流环713；[0070]壳体18为具有中空结构的圆柱体；
[0071]内齿环711和微射流环713径向贴附于壳体18的内壁；[0072]内齿环711无间隙地设置于微射流环713的工作前端；[0073]微射流环713将壳体18隔成微射流提取腔室；[0074]微射流环713开有微射流孔712。[0075]本发明中，微射流提取单元还包括：内外齿环714、引导环16、螺旋推进叶片8、转轴13、密封环和第一冷却环17；
[0076]内外齿环714设置于内齿环711内并与内齿环711同轴，内外齿环714固定于微射流环713的工作前端；[0077]引导环16径向贴附于壳体18的内壁并无间隙地位于内齿环711的工作前端；[0078]引导环16的内径由引导环16的第一端到引导环16的第二端逐渐减小；[0079]引导环16的第二端与内齿环711相接；[0080]螺旋推进叶片8和转轴13设置于壳体18内，螺旋推进叶片8固定于转轴13的外壁；[0081]转轴13位于微射流环713的中空部并通过密封环与微射流环713连接；[0082]引导环16设置于螺旋推进叶片8的推进方向端；[0083]第一冷却环17套于壳体18的外壁。[0084]需要说明的是，内齿环711为可拆卸式径向贴附于壳体18的内壁，内外齿环714为可拆卸式固定于微射流环713的工作前端。[0085]引导环16能够将螺旋推送叶片8传递的中药物料进行引流、避免死角；内齿环711、内外齿环714和微射流环713对中药物料也具有引流作用；第一冷却环17设置于壳体18的外壁并包括第一冷媒进口19和第一冷媒出口10，用于控制微射流提取过程中中药物料的温度。
[0086]本发明中，微射流提取器还包括：传动单元和驱动单元1；[0087]传动单元包括联轴器4和第二冷却环21；[0088]联轴器4的第一端与转轴13连接。[0089]第二冷却环21套于联轴器4的外壁；
[0090]第二冷却环21上设置第二冷媒进口20和第二冷媒出口5，用于引入冷媒给转轴13降温；
[0091]驱动单元1的输出轴与联轴器4的第二端连接。[0092]本发明中，微射流孔712的直径为0.1～1.0cm；[0093]微射流孔712的孔壁设有不规则突起；[0094]内齿环711的内齿为不规则齿；
[0095]内外齿环714的内齿和外齿为不规则齿。
[0096]微射流孔712的0.1～1.0cm直径适合于粉碎成最粗粉及以下粒径的中药材的提取
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加工，微射流孔712孔壁的不规则突起，对中药物、料有絮流、切割等作用。[0097]微射流提取腔室的数量为两个或两个以上。[0098]本发明中，壳体18具体为抗压金属材料制成的中空筒状容器，壳体18在特纳卡进行提取后的流通方向端设置有清洗排污出口14。[0099]中药组合物制备时，在驱动单元1的带动下，通过螺旋推进叶片8，使混合物物料形成了巨大的离心力，混合物物料瞬间通过狭小的微射流孔712，进行了二次加速，形成高频的微射流，混合物物料在纯物理状态下经高速射流撞击、挤压，强烈涡流混合和强力振动扩散的作用，导致混合物物料组织细胞破碎，从而实现低温、快速、全成分提取，保持了中药组合物的色、香、味，且效率极高。[0100]本发明中，微射流提取腔室的数量为三个，包括一级微射流提取腔室7、二级微射流提取腔室9和三级微射流提取腔室12。[0101]进一步的，还包括：减震片23；[0102]驱动单元1设置于减震片23上，减震片23用于减少驱动单元1的震动和噪音。[0103]本发明中，还包括：支架15和底座22，壳体18通过支架15安装于底座22上，驱动单元1垫有减震片23后设置于底座22上。[0104]本发明中，驱动单元1包括旋转电机，在旋转电机上设置有吊拉环状物2以便于安装，并在旋转电机上设置有电源接口3。[0105]本发明中，壳体18上设置有进料口6和出料口11，用于微射流提取器中特纳卡物料的进出。
[0106]需要说明的是，本发明中药组合物也可通过醇水煎煮进行提取制备得到。[0107]本发明还提供了中药组合物在制备改善脱发产品中的应用，中药组合物在改善脱发产品中的添加量为0.1％～100％，中药组合物在改善脱发产品中的添加量更优选为1％～50％。添加了中药组合物的改善脱发产品的剂型为液体、乳液、膏霜类、粉类、块状、喷雾、凝胶类或酊剂，改善脱发产品为日化品或保健品。
[0108]本发明提供的一种添加了中药组合物的香波，以重量百分比计，由以下组分制成：
[0109]
[0110]
本发明提供的一种添加了中药组合物的护发膜，以重量百分比计，由以下组分制
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成：
[0111]
[0112]
[0113]
本发明提供的一种添加了中药组合物的护发素，以重量百分比计，由以下组分制
成：
[0114]
本发明中药组合物在传统中医理论的基础上，结合现代药理，通过侧柏叶、艾叶、
山柰、川芎、花椒、苦参、女贞子、甘草、菟丝子、何首乌和陈皮特定的配方组合，发挥药效，具有消炎止痒的效果，提高真皮鞘细胞生长能力和促进毛囊的毛发生长，从而达到固发止脱的效果。实验证明，与现有单味中药和防脱西药相比，本发明具有从根本性解决脱发问题，各味药材起协同增效作用，无毒副作用、无刺激、安全性高。[0116]本发明提供了一种中药组合物，以重量份计，由以下组分制成：侧柏叶5～80份，何首乌1～80份，菟丝子0～70份，山柰1～70份，川芎1～60份，甘草0～60份，艾叶1～60份，苦
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[0115]
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参0～50份，女贞子1～50份，花椒1～50份，陈皮0～50份。实验证明，该中药组合物能够保护毛囊、有效促进真皮鞘细胞增殖、提高真皮鞘细胞的活性，具有促进毛发生长、消炎止痒的功效。该中药组合物根据传统中医理论基础，进行君臣佐使配伍，配以特定的含量比例组合成具有有效促进真皮鞘细胞增殖，从而可以达到固发止脱和具有消炎止痒效果的中药组合物。本发明还提供了一种促进真皮鞘细胞增殖的中药组合物的制备方法，该制备方法选用低温提取，制备的中药组合物有效成分总黄酮含量高，能有效减少热敏感活性成分的分解变化，节能环保，并且最大限度的保留有效活性成分。本发明还提供了该中药组合物在制备改善脱发产品中的应用，改善脱发产品为日化品或保健品。本发明中药组合物涉及的药材都在已使用原料名单中，符合化妆品安全技术规范，而且该中药组合物是液体体系，可以快捷方便添加在化妆品中，有利于促进真皮鞘细胞增殖的日化品和/或保健品的开发。[0117]实施例1
[0118]本实施例提供了一种中药组合物，其制备方法如下：[0119](1)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比20：7：5：10：10：2：20：4：6：3：3共20kg混合均匀后粉碎，过40目筛网，得到混合物。[0120](2)在混合物中加入500kg的纯化水，25℃下搅拌0.5h，然后通过管道导入微射流提取器，进行微射流提取，得到提取液。其中，微射流提取的冷媒温度为10℃，微射流提取的进料速度为25L/min。[0121](3)将提取液通过离心机离心进行固液分离，离心速度为8000rpm，收集分离液，并将分离液采用孔径为500nm陶瓷膜除杂过滤，收集滤液，进行浓缩，浓缩至相对密度为1.20，即得中药组合物。[0122]实施例2
[0123]本实施例提供了一种中药组合物，其制备方法如下：[0124](1)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比25：2：5：10：5：5：10：10：10：10：8共20kg混合均匀后粉碎，过40目筛网，得到混合物。[0125](2)在混合物中加入600kg的50％乙醇水溶液，25℃下搅拌0.5h，然后通过管道导入微射流提取器，进行微射流提取，得到提取液。其中，微射流提取的冷媒温度为20℃，微射流提取的进料速度为15L/min。[0126](3)将提取液通过离心机离心进行固液分离，离心速度为8000rpm，收集分离液，并将分离液采用孔径为500nm陶瓷膜除杂过滤，收集滤液，进行浓缩，浓缩至相对密度为1.10，即得中药组合物。[0127]实施例3
[0128]本实施例提供了一种中药组合物，其制备方法如下：[0129](1)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比5：10：10：5：10：5：5：20：8：20：2共10kg混合均匀后粉碎，过40目筛网，得到混合物。[0130](2)在混合物中加入200kg的纯化水，80℃下搅拌0.5h后冷却至25℃，然后通过管道导入微射流提取器，进行微射流提取，得到提取液。其中，微射流提取的冷媒温度为15℃，微射流提取的进料速度为30L/min。[0131](3)将提取液通过离心机离心进行固液分离，离心速度为12000rpm，收集分离液，
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并将分离液采用孔径为500nm陶瓷膜除杂过滤，收集滤液，进行浓缩，浓缩至相对密度为1.10，即得中药组合物。[0132]实施例4
[0133]本实施例提供了一种中药组合物，其制备方法如下：[0134](1)将侧柏叶、何首乌、菟丝子、山柰、川芎、甘草、艾叶、苦参、女贞子、花椒和陈皮以重量比5：10：10：5：10：5：5：20：8：20：2共10kg混合均匀后粉碎，过40目筛网，得到混合物。[0135](2)在混合物中加入300kg的纯化水，80℃下搅拌1h后冷却至25℃浸泡6h，得到提取液。[0136](3)将提取液通过离心机离心进行固液分离，离心速度为8000rpm，收集分离液，并将分离液采用孔径为500nm陶瓷膜除杂过滤，收集滤液，进行浓缩，浓缩至相对密度为1.10，即得中药组合物。
[0137]实施例5总黄酮含量检测[0138](1)芦丁标准曲线的制备：精密称取芦丁对照品10mg，加无水甲醇适量溶解定容至50mL，即得0.2mg/mL芦丁标准对照品溶液；精密吸取对照品溶液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL，分别置于25mL容量瓶中，各加水至6.0mL，摇匀；然后加5％亚硝酸钠1mL，摇匀，放置6min；再加10％硝酸铝1mL，摇匀，放置6min；加1％氢氧化钠10mL，加水定容至刻度，摇匀，放置15min。用分光光度计，于510nm波长处测定吸光值。以芦丁浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线回归方程。[0139](2)样品的测定：将样品稀释至适宜浓度，精密吸取样品适量(V1)，置于25mL(V2)容量瓶中，按步骤(1)“芦丁标准曲线的制备”项下自“加水至6mL”起，依法测定样品的吸光值，再由标准曲线回归方程计算总黄酮含量。[0140](3)计算方法：样品中总黄酮含量以芦丁计，按以下公式进行计算：
[0141]
式中，X为样品中总黄酮含量，单位为mg/mL；C为从标曲上查得样品测定液中总黄酮的浓度，单位为mg/mL；V1为样品取样体积，单位为mL；V2为样品定容体积，单位为mL。[0143]其中，侧柏叶、艾叶、山柰、川芎、花椒、苦参、女贞子、甘草、菟丝子、何首乌和陈皮的提取方法如实施例1所述，并使各待测样品的药材含量与实施例1中药组合物的药材含量一致。[0144]总黄酮含量检测结果如表1所示，实施例1至实施例4中药组合物总黄酮含量比中药组合物中各药材的黄酮含量高，表明本发明中药组合物通过特定的组合可以有效提高总黄酮含量。实施例1至实施例3中药组合物总黄酮含量比实施例4中药组合物总黄酮含量高，表明本发明中药组合物通过本发明制备方法可以有效提高中药组合物的总黄酮含量。[0145]表1各样品的总黄酮含量
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CN 107823520 A[0146]
说 明 书
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实施例6
[0149]本实施例测试了中药组合物对小鼠触须毛囊体外培养毛囊生长速度的影响。[0150]实验动物为20只近交系5C7BL/6J小鼠，出生4～6周，10只雄鼠，10只雌鼠。剪去小鼠双侧胡须，用体积浓度为75％的乙醇消毒小鼠上唇部3遍，在无菌条件下剪取小鼠的双侧胡须垫，置于毛囊培养基中，选取完整无损伤的生长早期的毛囊，再用培养基反复冲洗3遍，每遍冲洗均需更换一次器械。将毛囊置于96孔板中，每孔仅放1个毛囊，每孔含毛囊培养基0.2mL。然后将毛囊放置在37℃，5％二氧化碳的孵育箱内培养。[0151]实验组分为空白对照组和药物组，空白对照组为不添加实施例1中药组合物的毛囊培养基，药物组为在毛囊培养基中添加了不同浓度的实施例1中药组合物，共分为8组，药物组中实施例1中药组合物的浓度分别为0.5％、2.0％、5.0％、7.0％、10.0％、15.0％和20.0％。每个实验组的毛囊数为16个。培养前和培养后每隔24h，在倒置显微镜下，通过目镜的测微器检测毛囊顶端到毛干末端的长度，总观察时长为3d。
[0152]毛囊生长的净长度为测的毛囊长度减去前次测得的长度，毛囊生长速度为净长度与时间的比。实验结果如表2所示，添加实施例1中药组合物可以显著提高毛囊的生长活力，而且随着实施例1中药组合物浓度的增加，小鼠触须毛囊的生长速度提高。
[0148]
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CN 107823520 A[0153][0154]
说 明 书
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表2中药组合物对小鼠触须毛囊体外培养毛囊生长速度的影响
实施例7
[0156]本实施例测定了中药组合物对体外培养真皮鞘细胞生长的影响。[0157](1)随机取成年Wistar大鼠，雄性，体重198g。处死后用75％乙醇擦拭消毒双侧颊部，无菌操作剪取触须垫全层皮肤，在体视显微镜下，将内部完整的毛囊上皮真皮结构取出，留取中上段真皮鞘。将获取的真皮鞘置于含10％胎牛血清的DMEM培养基中培养。[0158](2)取1×104个的第3～4代细胞接种于96孔板中，每孔200μL细胞悬液，在培养箱中孵育24h，待细胞贴壁后，加入用生理盐水稀释了的不同浓度的实施例3中药组合物(浓度分别为0.0％、1.0％、5.0％、10.0％、20.0％)，每个浓度接种3个平行孔，孵育24h。[0159](3)检测：每孔加入MTT(5mg/mL)20μL，继续培养4h，弃培养液后每孔加入二甲基亚砜20μL，终止反应，震荡10min，用酶标仪在570nm波长处进行光密度值的检测，记录光密度值D，计算促进率：促进率％＝(实验组D值-对照组D值)/对照组D值x100％。[0160]促进率的结果如表3所示，浓度为5.0％的实施例3中药组合物能够促进真皮鞘细胞增殖，促进率为9.24％，并且实施例3中药组合物对真皮鞘细胞生长的促进呈浓度依赖关系，随着实施例3中药组合物浓度的增加，对真皮鞘细胞生长的促进越大。[0161]此外，获得的真皮鞘细胞经EDU法加5％实施例2中药组合物经孵育、显色后拍照进行显微观察对比，实验结果见图4至图6，图4为实施例2中药组合物对真皮鞘细胞增殖的影响(Edu显色标记图)；图5为实施例2中药组合物对真皮鞘细胞增殖的影响(DAPI细胞核定位图)；图6为实施例2中药组合物对真皮鞘细胞增殖的影响(Edu显色与DAPI细胞核共定位图)；结果表明添加5％实施例2中药组合物对真皮鞘细胞具有明显的增殖效果。[0162]表3中药组合物对体外培养真皮鞘细胞生长的影响
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CN 107823520 A[0163]
说 明 书
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实施例8
[0165]本实施例测定了中药组合物不同时间对真皮鞘细胞增殖的影响。根据实施例7的方法步骤(1)操作后，步骤(2)中取1×104个的第3～4代细胞接种于96孔板中，每孔200μL细胞悬液，在培养箱中孵育24h后，加入0％、10％实施例1中药组合物、10％实施例2中药组合物、10％实施例3中药组合物、10％实施例4中药组合物，各浓度设立个15个平行孔，每3个孔为1个检测组。分别在孵育4h、8h、12h、24h、48h后，检测一组。检测方法同实施例7的步骤(3)。图7为本发明中药组合物作用不同时间对真皮鞘细胞活性的影响，结果表明，本发明中药组合物对真皮鞘细胞增殖促进作用的最佳时间为24h，在前期真皮鞘细胞增殖促进作用效果会有波动，并且本发明中药组合物(实施例1-3)的增殖效果明显高于常规方法高温提取的中药组合物(实施例4)。[0166]实施例9
[0167]本实施例测试中药组合物对角叉菜胶引起小鼠足跖肿胀的影响。随机选取50只小鼠，随机分为对照组、1％实施例1中药组合物组(含浓度1％实施例1中药组合物的凝胶)、5％实施例1中药组合物组(含浓度5％实施例1中药组合物的凝胶)、10％实施例1中药组合物组(含浓度10％实施例1中药组合物的凝胶)、碘酒组共5组，每组10只小鼠。分别将药物均匀涂擦于左右后足跖，对照组涂擦等量生理盐水，每天涂2次，连续3天。末次涂药1h后，在右后足跖膜下注入1％角叉菜胶0.03mL致炎。3h后在踝关节上0.05mm处剪下双足，分别称重，以致炎足减去非致炎足，其差值为肿胀度，并求肿胀抑制率(％)，肿胀度抑制率％＝(对照组肿胀度—给药组肿胀度)/对照组肿胀度×100％。实验结果如表4所示，实施例1中药组合物能够抑制小鼠足跖肿胀，表明实施例1中药组合物具有消炎作用。[0168]表4中药组合物对角叉菜胶引起小鼠足跖肿胀的影响
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CN 107823520 A[0169]
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实施例10
[0171]本实施例测试了本发明中药组合物对右旋糖酐-40诱发小鼠皮肤瘙痒的影响。将雌雄各半的50只小鼠随机分为对照组、1％实施例1中药组合物组(含浓度1％实施例1中药组合物的凝胶)、5％实施例1中药组合物组(含浓度5％实施例1中药组合物的凝胶)、10％实施例1中药组合物组(含浓度10％实施例1中药组合物的凝胶)、复方地塞米松软膏组共5组，每组10只。
[0172]实验2d前用脱毛剂硫化钡将小鼠背部脱毛，脱毛面积约为9cm2，然后分别将药物均匀涂擦于脱毛区，对照组涂擦等量生理盐水，每天涂2次，连续3天。末次涂药30min后，脱毛处注射0.03％右旋糖酐-40(1.25mg/mL)。[0173]以小鼠前爪搔抓头部、后爪搔抓躯干、啃咬全身各部位作为瘙痒特征，观察记录首次搔抓的时间(潜伏时间)及20min内瘙痒次数。实验结果如表5所示，实施例1中药组合物具有止痒作用，止痒效果与复方地塞米松软膏相当。
[0174]表5中药组合物对右旋糖酐-40诱发小鼠皮肤瘙痒的影响
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实施例11
本实施例提供了一种含中药组合物的香波，以重量百分比计，由以下组分制成：
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[0178]
本实施例提供的含中药组合物的香波的制备方法如下：
[0180]将羟乙基纤维素和瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵加入水中搅拌至溶解；加入正癸基葡萄糖苷、二辛基醚(及)月桂醇和椰油酰胺单乙醇胺，混合均匀，加热至70℃，搅拌至全部溶解后冷却至45℃，加入防腐剂和实施例2中药组合物，搅拌均匀，冷却至35℃，柠檬酸调节pH值至5.0～6.5，搅拌均匀即得。[0181]实施例12
[0182]本实施例提供了一种含中药组合物的护发膜，以重量百分比计，由以下组分制成：
[0179]
[0183]
[0184]
本实施例提供的含中药组合物的护发膜的制备方法如下：[0185]将水加热到60℃左右，加入海藻糖和羟乙基纤维素搅拌至全部溶解；将二十二烷基三甲基氯化铵和十六/十八醇加热到65℃左右使其全部溶解；将水相快速加入油相并搅拌、增稠；水浴恒温使膏体温度保持在60℃左右10～20min使膏体均一、细腻后开始降温。待
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膏体降温到50℃左右时加入聚二甲基环硅氧烷、环甲基和二甲基硅油混合物和苯基三甲基硅氧烷继续搅拌；降温到45℃时加入香精、防腐剂、甘油、中药组合物和水解角蛋白组分，搅拌均匀即得。[0186]实施例13
[0187]本实施例提供了一种含中药组合物的护发素，以重量百分比计，由以下组分制成：
[0188]
本实施例提供的含中药组合物的护发素的制备方法如下：[0190]将辛酸/癸酸甘油三酯、十六/十八醇、甘油硬脂酸酯、硬脂基三甲基氯化铵和荷荷巴油混合后加热至80℃，高速搅拌下将水和甘油中保持温度78℃，继续混合搅拌；冷却至50℃时加入氢氧化钠；冷却至45℃时加入实施例3中药组合物、防腐剂和香精搅拌均匀即得。[0191]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
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