不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量(参考下表)。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。
常用的培养器皿
培养器皿 96孔培养板 24孔培养板 12孔培养板 6孔培养板 4孔培养板 3.5cm培养皿 6cm培养皿 9cm培养皿 10cm培养皿 25cm塑料培养瓶 75cm塑料培养瓶 25cm玻璃培养瓶
可获细胞
底面积(cm)加培养液量 (mL)
量
2
0.32 2 4.5 9.6 28 8 21 49 55 25 75 19
0.1 1.0 2.0 2.5 5.0 3.0 5.0 10.0 10.0 5.0 15~30 4.0
105 5×105 106 2.5×106 7×106 2.0×106 5.2×106 12.2×106 13.7×106 5×106 2×107 3×106
100cm玻璃培养
瓶
250cm玻璃培养
瓶
2500cm旋转培养
瓶
37.5 10.0
6×106
78 15.0
2×107
700 100~250
2.5×108
注:各种单层生长的细胞在培养皿中长满的细胞数,主要取决于器皿底表面积和细胞体积的大小。上表以Hela细胞为例给出的可获细胞量仅作参考。
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