(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 109001455 A(43)申请公布日 2018.12.14
(21)申请号 201810622529.5(22)申请日 2018.06.15
(71)申请人 天津一瑞生物科技股份有限公司
地址 300457 天津市滨海新区开发区第四
大街80号天大科技园C8第三层
申请人 天津喜诺生物医药有限公司
北京金山川科技发展有限公司 北海市兴龙生物制药有限公司(72)发明人 张文倩 许可 马炳印 何永胜
苑庆华 黄炎彬 王兴 李世林 曹佳利 崔跃 (74)专利代理机构 天津诺德知识产权代理事务
所(特殊普通合伙) 12213
代理人 栾志超
权利要求书1页 说明书12页
(51)Int.Cl.
G01N 33/569(2006.01)G01N 33/531(2006.01)
(54)发明名称
一种肺泡灌洗液样本处理液及处理检测方法
(57)摘要
本发明公开了一种肺泡灌洗液样本处理液及处理检测方法，由无机盐和表面活性剂组成，该处理液能降低肺泡灌洗液中其他物质对真菌(1-3)-β-D-葡聚糖检测干扰。本发明是对肺泡灌洗液样本进行处理，用于体外检测侵袭性肺部真菌感染患者肺泡灌洗液中的真菌(1-3)-β-D-葡聚糖含量，与传统血清检测的方法比较，其检测灵敏度更高，并能够保持较高的特异性和准确性。
CN 109001455 ACN 109001455 A
权 利 要 求 书
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1.一种肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：包括处理液A和处理液B，其中处理液A包括碱金属氢氧化物和表面活性剂，处理液B包括碱金属卤化物。
2.根据权利要求1所述的肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：所述碱金属氢氧化物为LiOH、NaOH、KOH中的一种。
3.根据权利要求1所述的肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：所述碱金属卤化物为KCl、MgCl2、CaCl2、SrCl2中的一种。
4.根据权利要求1所述的肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：所述表面活性剂为Triton系列或Tween系列中的一种，优选为Triton X-100或Tween 20。
5.根据权利要求1所述的肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：处理液A具体包括KCl 0.05-0.5M，Triton X-1000.01-1％或Tween 20 0.50-1.50％，处理液B具体包括KOH 0.05-0.5M。
6.根据权利要求5所述的肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：处理液A包括KCl 0.5M，Triton X-100 0.10％，处理液B包括KOH 0.25M。
7.一种使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，其特征在于：具体步骤如下：
步骤一：配置处理液A，包括KCl 0.05-0.5M，Triton X-100 0.01-1％，配置处理液B，为KOH 0.05-0.5M，处理液A与处理液B等体积混合即为样本处理液；
步骤二：向肺泡灌洗液样本中加入样本处理液，混匀后进行孵育；步骤三：向孵育后的混合液中加入用于检测(1-3)-β-D葡聚糖的反应主剂，震荡混匀后检测并计算(1-3)-β-D葡聚糖含量；
优选为样本处理液具体包括KCl 0.5M，KOH 0.25M，Triton X-100 0.10％。
8.根据权利要求7所述的使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，其特征在于：所述步骤二中肺泡灌洗液样本和样本处理液体积比为1:3-5，优选为1:4。
9.根据权利要求7或8所述的使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，其特征在于：所述步骤二中孵育温度为37℃，孵育时间为10-15min。
10.根据权利要求7所述的使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，其特征在于：所述步骤三中采用的反应主剂包括G因子，凝固酶源和凝固蛋白源，所述肺泡灌洗液与所述反应主剂体积比为1:15-25，优选为1:20。
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CN 109001455 A
说 明 书
一种肺泡灌洗液样本处理液及处理检测方法
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技术领域
[0001]本发明属于涉及真菌(1-3)-β-D-葡聚糖体外检测领域，尤其是涉及一种肺泡 灌
洗液样本处理液及处理检测方法。
背景技术
[0002]本发明用于辅助诊断临床上侵袭性深部真菌感染。随着皮质激素、免疫抑制 剂、各种广谱类抗生素的大量使用和器官移植等临床技术的不断开发，对于一些 免疫力低下的患者，侵袭性真菌感染的几率会普遍增高。(1-3)-β-D葡聚糖是医 学上大部分重要真菌(包括念珠菌和曲霉菌)的细胞壁组成成分，人体吞噬细胞 吞噬真菌后能持续释放该物质，使其在血液、肺泡灌洗液、脑脊液等人体液中的 浓度升高，因此(1-3)-β-D葡聚糖的检测为一个关键性的指标。目前，G试验检 测样本多为血清，而相较之下，侵袭性肺部真菌感染的患者，只有部分葡聚糖入 血，含量远低于肺泡灌洗液中的含量，所以对于侵袭性肺部真菌感染患者，检测 肺泡灌洗液，检出率更高。[0003]G试验碱处理法因其检测(1-3)-β-D葡聚糖灵敏度高、特异性高、检测时间 短而被
医院采用。之前医院多采用加热稀释法对样本进行前处理，但该法很难使 样本中(1-3)-β-D葡聚糖形态(单链形式、双股螺旋或三股螺旋形式)均一化， 从而影响(1-3)-β-D葡聚糖检测特异性，国外学者研究表明，(1-3)-β-D葡聚糖经 过热处理后可以转变为三股螺旋，而三股螺旋结构经碱处理可以水解为单链结构。 故本次发明使用G试验碱处理法进行实验研究。
[0004]肺泡灌洗液的成分包括细胞、肺表面活性物质(pulmonary surfactant，PS)、 炎症介质、生长因子、各种蛋质、酶类、脂类等。在肺泡灌洗液样本成分中存在 一定的干扰因子会严重影响(1-3)-β-D葡聚糖的测定结果，降低了测定的特异性 和准确性。所谓反应干
扰因子是指与所定的生化反应无关的反应因子(假阳性因 子)或者是在反应的任一阶段中对该反应具有干扰作用的因子(假阴性因子)。 反应样本即肺泡灌洗液中含有此类因子。如Xa因子显示与溶胞产物中的凝结酶 相类似的作用，因此成为假阳性因子。α1-抗胰蛋白酶对反应有很强的干扰作用， 因此成为假阴性因子。
[0005]碱金属氢氧化物的作用是使反应干扰因子变性。强碱使蛋白质的氢键发生断 裂，同时也会与游离的氨基等形成盐，变化过程中也有化学键的断裂和生成。变 性后的干扰因子仍以溶解的状态存在于溶液中。而稀释加热法仅通过简单的物理 变化，使得蛋白变性沉淀，变性后的蛋白沉淀有可能又会对反应带来浊度上的干 扰。KCl对葡聚糖向血液成分的吸附具有抑制作用。碱金属卤化物的添加，防止 葡聚糖被吸附到血液成分上，使得G因子级联反应顺利被葡聚糖激活，使得反 应体系稳定化，具有提高再现性的作用。但是单纯使用传统血清检测中使用的处 理液并不足以完全去除样本中的干扰因子，其检测结果准确度也有待提高，因此， 解决肺泡灌洗液检测中的干扰问题尤为重要，它避免了患者后期不必要的临床检 查和不合理的治疗。
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CN 109001455 A
说 明 书
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发明内容
[0006]为解决检测干扰问题，本发明提供了一种肺泡灌洗液样本处理液及处理检测 方法，利用G试验碱处理法，消除或降低肺泡样本中影响真菌(1-3)-β-D葡聚糖 检测的干扰因素，从而达到提高真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测灵敏度和特异性的目 的。[0007]本发明采用的技术方案是：一种肺泡灌洗液样本处理液，其特征在于：包括 处理液A和处理液B，其中处理液A包括碱金属氢氧化物和表面活性剂，处理 液B包括碱金属卤化物。
[0008]优选地，碱金属氢氧化物为氢LiOH、NaOH、KOH中的一种。[0009]优选地，碱金属卤化物为KCl、MgCl2、CaCl2、SrCl2中的一种。[0010]优选地，表面活性剂为Triton系列或Tween系列中的一种，优选为Triton X-100或Tween 20。
[0011]优选地，处理液A具体包括KCl 0.05-0.5M，Triton X-1000.01-1％或Tween 20 0.50-1.50％，处理液B具体包括KOH 0.05-0.5M。[0012]优选地，处理液A包括KCl 0.5M，Triton X-100 0.10％，处理液B包括KOH 0.25M。[0013]一种使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，具体步骤如下：[0014]步骤一：配置处理液A，包括KCl 0.05-0.5M，Triton X-100 0.01-1％，配置 处理液B，为KOH 0.05-0.5M，处理液A与处理液B等体积混合即为样本处理 液；[0015]步骤二：向肺泡灌洗液样本中加入样本处理液，混匀后进行孵育；[0016]步骤三：向孵育后的混合液中加入用于检测(1-3)-β-D葡聚糖的反应主剂， 震荡混匀后检测并计算(1-3)-β-D葡聚糖含量。
[0017]优选地，样本处理液具体包括KCl 0.5M，KOH 0.25M，Triton X-100 0.10％。[0018]优选地，步骤二中肺泡灌洗液样本和样本处理液体积比为1:3-5，优选为1:4。[0019]优选地，步骤二中孵育温度为37℃，孵育时间为10-15min。[0020]优选地，步骤三中采用的反应主剂包括G因子，凝固酶源和凝固蛋白源， 肺泡灌洗液与反应主剂体积比为1:15-25，优选为1:20。[0021]本发明具有的优点和积极效果是：[0022]1本方案用于检测肺泡清洗液，对于侵袭性肺部真菌感染患者，血清中的 (1-3)-β-D葡聚糖含量要远远低于肺泡灌洗液，检测肺泡灌洗液，其检出率更高， 能够更早判断侵袭性肺部真菌感染患者；
[0023]2肺泡灌洗液样本与血清样本比较，包含了更多的干扰因子，采用本方案涉 及的样本处理液，能够有效的去除这些干扰因子，使检测结果更为精确，提高了 测定的特异性和准确性；
[0024]3低浓度的表面活性剂，能帮助分解蛋白酶，降低肺泡灌洗液的干扰因子对 检测的影响，与碱金属氢氧化物和碱金属卤化物配合能够提高检测特异性；[0025]4本检测方案操作简单，检测速率高，能够快速获得检测结果。具体实施方式
[0026]下面对本发明的实施例做出说明。
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说 明 书
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本发明涉及一种肺泡灌洗液样本处理液，样本处理液至少包括以下组分：碱 金属
氢氧化物、碱金属卤化物和表面活性剂。碱金属氢氧化物有锂、钠、钾等碱 金属的氢氧化物，具体的说是氢氧化锂(LiOH)、氢氧化钠(NaOH)、氢氧化钾 (KOH)。处理液通常是使用一种或多种碱金属氢氧化物的水溶液，经过试验比 对，使用NaOH或KOH其检测效果和经济效益较高。碱金属卤化物有氯化钾、 氯化镁、氯化钙、氯化锶等，但由于镁、钙等离子极易与氢氧根结合产生沉淀， 所以优选氯化钾作为处理液。非离子表面活性剂选择Triton系列或Tween系列。
[0028]本发明的处理液可以分为两种溶液保存，在使用时再将这些溶液混合在一起。 假如把碱金属氧化物与碱金属氢氧化物或非离子型表面活性剂混合在一起而长 期保存，就会产生沉淀等不合适情况，因此需将他们分开的保存，直到即将进行 前处理时再加以混合。所以肺泡灌洗液样本处理液分为处理液A包括碱金属卤 化物和非离子表面活性剂，处理液B包括碱金属氢氧化物。
[0029]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括处理液A和处理液B，其中处理液A包 括KCl和表面活性剂，其中处理液包括KCl 0.05-0.5M，表面活性剂0.01-1％； 处理液B为KOH溶液，具体为KOH 0.05-0.5M。表面活性剂可采用Triton X-100 或Tween20。[0030]经过大量对比试验发现，处理液A为KCl 0.5M，Triton X-100 0.10％，处理 液B为KOH 0.25M时，其处理效果最佳。
[0031]一种使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，具体步骤如下：[0032]步骤一：配置处理液A，包括KCl 0.05-0.5M，Triton X-100/Tween20 0.01-1％， 配置处理液B，为KOH 0.05-0.5M，处理液A与处理液B等体积混合即为样本 处理液；[0033]步骤二：向肺泡灌洗液样本中加入样本处理液，添加体积比为1:3-5，混匀 后在37℃孵育10-15min；[0034]步骤三：向孵育后的混合液中加入用于检测(1-3)-β-D葡聚糖的反应主剂， 肺泡灌洗液与反应主剂体积比为1:15-25，震荡混匀后检测并计算(1-3)-β-D葡聚 糖含量。[0035]当肺泡灌洗液样本和样本处理液体积比为1:4，肺泡灌洗液样本与反应主剂 体积比为1:20时，其试验效率较高。[0036]其中，反应主剂的制备步骤如下[0037]1分离提取东方鲎血细胞裂解物，无菌操作，取约20g血细胞，按照1-5比 例加入血细胞裂解液，并用高速均浆机进行200000rpm/min，5-10分钟破损细胞， 将破损后的组织细胞液放入-30℃冰箱内快速冷冻保存10小时，之后将冷冻细胞 液取出，在室温下缓慢溶解，待全部溶解后，再用高速组织均浆机进行 200000rpm/min，5-10分钟破损细胞，然后将破损后的组织细胞液再次放入-30℃ 冰箱内快速冷冻保存10小时，重复上次过程2遍即可。[0038]2将上述血细胞裂解液取出后进行3000rpm/min，5-8分钟离心，取上清液， 按照1：2比例加入氯仿，剧烈震荡10分钟，然后转移至无热原离心沉淀管中 在4℃下进行10000rpm/min，5-10分钟分离，仔细取出上清液备用。[0039]3取提取、分离好的东方鲎血细胞的上清液，加到含有1.0M氯化镁0.5M氯 化钙溶液中，分装至西林瓶或安瓿瓶中进行冷冻干燥即为反应主剂。[0040]本方案采用的反应主剂也可直接采用市售(1-3)-β-D葡聚糖血清检测试剂盒 中
的反应主剂，例如采用天津喜诺生物医药有限公司的真菌(1-3)-β-D葡聚糖检 测试剂盒
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说 明 书
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(显色法)中的反应主剂。
[0041]步骤三中混匀后的检测液可通过微生物快速动态检测系统(MB-80A， MB-80M，MB-80S，MB-80X)、真菌/细菌动态检测仪(MB-80A，MB-80X， MB-80M)、或全自动真菌/细菌动态检测仪(IGL-800)进行检测，以下实施例通 过检测数据与检测物培养结果的比对验证检测方案的特异性和准确性。[0042]针对处理液B，KOH做样本处理液可选浓度范围为0.05-0.5M，为了进一步 确定KOH最适浓度，以处理液只包含KOH，向肺泡样本中添加100pg/mL真菌 标准品，检测不同浓度KOH，对样本添加标品测试回收率的影响，检测结果如 表1所示。[0043]表1
[0044]
由试验结果可看出，只用无菌水处理样本，检测不出葡聚糖含量，随着KOH 浓度增
加，回收率逐渐增加，KOH浓度在0.05-0.40M时，回收率在50％-150％ 以内，表明检测结果有意义。结合样本培养结果，KOH浓度在0.15-0.50M时检 测结果为阴性，故KOH浓度在0.15-0.40M时，用于处理肺泡灌洗液样本更合适。 表1数据表明，处理液只有KOH时，回收率并不高，说明仍存在一定干扰，处 理液中加碱金属卤化物及非离子表面活性剂会提高回收率降低干扰。在以后的检 测中固定KOH的浓度，选择一个中间浓度0.25M，对其他成分效果进行分析。
[0046]实施例1
[0047]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.12M、Triton X-100 0.01％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0048]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法，具体步骤如下：[0049]步骤一：分别配置处理液A和配置处理液B，处理液A与处理液B等体积 混合即为样本处理液；
[0050]步骤二：向10μL肺泡灌洗液样本中加入样本处理液40μL，混匀后在37℃ 孵育10min；
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[0045]
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说 明 书
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步骤三：向孵育后的混合液中加入200μL反应主剂，震荡混匀后检测并计 算(1-3)-β-D葡聚糖含量。
[0052]实施例2
[0053]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.12M、Triton X-100 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0054]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0055]实施例3
[0056]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.12M、Triton X-100 0.50％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0057]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0058]实施例4
[0059]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.12M、Triton X-100 1.00％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0060]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0061]实施例5
[0062]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.06M、Triton X-100 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0063]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0064]实施例6
[0065]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.12M、Triton X-100 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0066]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0067]实施例7
[0068]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、Triton X-100 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0069]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0070]实施例8
[0071]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、Triton X-100 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0072]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0073]实施例9
[0074]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M)，处 理液B(KOH 0.25M)。
[0075]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0076]实施例10
[0077]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(Triton X-100 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0078]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0079]实施例11
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说 明 书
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一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、Triton X-100 0.05％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0081]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。
[0082]实施例12Tween20作为表面活性剂作为处理液对肺泡灌洗液进行检测[0083]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、 Tween20 0.10％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0084]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0085]实施例13
[0086]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、 Tween20 0.50％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0087]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0088]实施例14
[0089]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、 Tween20 1.00％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0090]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0091]实施例15
[0092]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、 Tween20 1.50％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0093]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0094]实施例16
[0095]一种肺泡灌洗液样本处理液，包括如下的原料：处理液A(KCl 0.50M、 Tween20 2.00％)，处理液B(KOH 0.25M)。
[0096]使用样本处理液预处理肺泡灌洗液检测真菌的方法如实施例1。[0097]其中比对实施例1-4，结果如表2所示。[0098]表2
[0099]
实施例1-4中，处理液B成分不变，处理液A中KCl浓度不变，其中Triton X-100浓度
逐渐升高，Triton X-100在0.1％-1.0％变化过程中，样本检测浓度是先 降低后升高，可明显看出实施例2中Triton X-100浓度在0.1％时，检测结果与培 养结果最接近，其清除肺泡灌洗液中干扰因子的力度最大，效果最好。[0101]比对实施例5-7，结果如表3所示。[0102]表3
[0100]
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[0103]
[0104]
实施例5-7中，处理液B成分不变，处理液A中Triton X-100浓度不变， KCl浓度逐
渐升高，能够看出实施例7中处理液配方检测几个样本结果与培养结 果相符，其清除肺泡灌洗液中干扰因子的力度最大，效果最好，所以处理液A 中KCl浓度选择为0.50M时，检测灵敏度最佳。
[0105]比对实施例8-10，结果如表4所示。[0106]表4
[0107]
实施例8-10中，处理液B成分不变，处理液A中分别设定为包含Triton X-100 和
KCl，只有KCl，只有Triton X-100，比对其检测准确度，根据试验结果能够 给看出实施例8中KCl与Triton X-100同时存在于处理液A中检测时，检测结 果与培养结果更为符合，并且仅包括KCl或Triton X-100的处理液A的检测结 果，其误差率更高，由此证明，针对肺泡灌洗液作为检测样本，KCl与Triton X-100 缺一不可。仅加入KCl的溶液为低分子分散系统，主要分散相为分子、离子， 但对于肺泡灌洗液中的其他大分子物质，起不到分散作用；表面活性剂溶于水能 够显著降低水的表面能，低浓度时也能显著降低表面张力，能够解决样本中大分 子物质团聚的问题，并且通过大量试验验证发现，非离子表面活性剂的加入，形 成空间位阻，使得空间体系稳定，减少了团聚的发生，良好的空间壁垒使得葡聚 糖分子不易于其他大分子杂质发生聚沉等现象，因此只有二者的协同作用才能保 证检测结果具有较高准确率。
[0109]比对实施例8和实施例11，结果如表5所示。[0110]表5
[0108]
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[0111]
实施例8与实施例11分别使用了0.10％的Triton X-100和0.05％的Triton X-100，通过该试验结果比对，实施例8明显准确率更高，实施例11中出现一些 假阳性结果，实
施例8处理液A成分为0.5M的KCl、0.05％的Triton X-100时， 本配方处理液降低了干扰，测试结果与培养结果更为匹配。
[0113]比对实施例8与实施例12-16，结果如表6所示。[0114]表6
[0112]
[0115]
上表数据表明，Tween20浓度在0.50-1.50％时，检测结果与实例8(对照) 相符，且
与培养结果匹配，说明Tween20作为处理液成分之一能够有效的去除 肺泡灌洗液中干扰因子，提高肺泡灌洗液检测结果的灵敏度和特异性。[0117]实施例17灵敏度和特异性检测[0118]选择实施例8中处理液配方，以培养结果为对照测试使用处理液处理后采用 喜诺G试验试剂盒检测的灵敏度和特异性(选择100个有培养信息的BALF样 本进行测试)，[0119]喜诺G试验试剂盒检测结果判断：
[0120]
[0116]
阴性 灰区 阳性
[0121][0122]
≤60pg/mL
60-100pg/mL ≥100pg/mL
灵敏度和特异性计算方法如表7：表7
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[0123]
[0124][0125][0126][0127]
灵敏度：(A+C)/(A+C+E)*100％特异性：(D+F)/(B+D+F)*100％试验结果如表8。表8
[0128]
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[0129]
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[0130]
[0131][0132]
结果分析如表9表9
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CN 109001455 A
说 明 书
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由数据可看出，实施例8中处理液成分测试肺泡样本结果与培养结果匹配度 高，
使用喜诺G试验试剂盒测得的数据的灵敏度和特异性均高达到90.0％和 92.5％，明显提高了试剂盒对肺泡灌洗液样本的检测准确率。[0135]实施例18通过真菌(1-3)-β-D葡聚糖标准品回收率验证处理后检测准确率
[0136]选择实施例8中处理液配方，测试真菌(1-3)-β-D葡聚糖标准品添加到肺泡 灌洗液样本中的回收率，判断检测意义：[0137]回收率计算方法：
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表10
如表10所示，实验测定了5个样本的回收率，结果均在50％-150％之间， 说明这种
处理液处理肺泡灌洗液得到的检测结果干扰小，数据可信。[0142]以上对本发明的几个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳 实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均 等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
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