重庆医学２０１８年１月第４７卷第ｌ期 １ ７ 论著・基础研究ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－８３４８．２０１８．０１．００６ 死亡结构域相关蛋白对卵巢癌细胞周期及化疗影响的研究 伦巍巍，王俊耐 （郑州大学第三附属医院妇产科［摘要］ 目的４５００１５） 探索在卵巢癌细胞中下调死亡结构域相关蛋白（Ｄａｘｘ）后对其细胞周期及化疗耐药的影响。方法 转染卵 巢癌耐药细胞株Ｃ１３ｋ后分为阴性对照组（ＮＣ组）和下调Ｄａｘｘ组（ｓｉＤａｘｘ组）。设立多柔比星药物浓度梯度０、０．１５、０．３０、０．６０ ｆｍｏｌ／Ｌ，流式细胞仪检测上述两组细胞周期变化。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ从蛋白水平检测细胞周期及凋亡相关蛋白ｃｙｃｌｉｎＢ１、ｃｌｅａｖｅｄ—ｐａｒｐ 的表达变化。流式细胞仪检测上述两组细胞凋亡的变化。结果 在多柔比星０．３０ ｆｆｍｏｌ／Ｌ时，下调Ｄａｘｘ蛋白使细胞发生明显的 Ｇ２／Ｍ期阻滞，与ＮＣ组比较，ｓｉＤａｘｘ组Ｇ２／Ｍ期细胞百分比明显增高（Ｐ＜０．０５） 下调Ｄａｘｘ蛋白使细胞对多柔比星化疗耐药 结论Ｄａｘｘ对卵巢癌化疗的影响可能与Ｄａｘｘ对细胞周期的作用有关。 ［关键词］Ｆａｓ相关死亡结构域蛋白质；卵巢肿瘤；细胞周期；ｃｙｃｌｉｎＢ１ ［中图法分类号］ Ｒ７ｌ１．７５ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号］ ｌ６７卜８３４８（２０１８）０１ ｏｏｌ７一ｏ３ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｄａｘｘ ｏｎ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ＬＵＮ ＷＰｉｗｅｉ ＷＡＮＧ Ｊｕｎｎａｉ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏＪ’Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｏｂｓｔｅｒｉ￣’５，Ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ ＡＪｉｌｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｆＪ．，Ｚｈｅｎｇｚ／１ｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ，Ｈｅｎａｎ ４５００１ ５，Ｃｈｉｎａ） ￣Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｄａｘｘ ｏｎ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＳｉＲＮＡ ａｎｄ ＮＣ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ（ＮＣ）ＲＮＡ ｏｆ Ｄａｘｘ ｗｅｒｅ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ａｎｄ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ＮＣ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ Ｄａｘｘ（ｓｉＤａｘｘ）ｇｒｏｕｐ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｎｇ ｔｏ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ Ｃｌ ３ｋ．Ｔｈｅ ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｇｒａ— ｄｉｅｎｔ ｏｆ ０，０．１５，０．３０，０．６０￣ｍｏｌ／Ｉ ｗａｓ ｓｅｔ．Ｔｈｅ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｙｃｌｅ ｃｈａｎｇｅｓ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｙｃｌｉｎＢ１ ａｎｄ ｃｌｅａｖｅｄ— ｐａｒｐ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ０．３Ｏ￣，ｍｏｌ／Ｌ ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ Ｄａｘｘ ｔｏ ｒｅｓｕｌｔ ｉｎ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ Ｇ２／Ｍ ａｒｒｅｓｔ（Ｐ＜０．０５）．Ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｄａｘｘ ｒｅｓｕｌｔｅｄ ｉｎ ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ Ｃ１３ｋ ｃｅｉｌｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｄａｘｘ ｏｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ｒｅ— ｌａｔｅｄ ｔｏ ｉｔｓ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｎ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ． ［－Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ Ｆａｓ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｄｅａｔｈ ｄｏｍａｉｎ ｐｒｏｔｅｉｎ；ｏｖａｒｉａｎ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ；ｃｙｃｌｉｎｅＢ１ 卵巢癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，化疗耐药 一接种于ｌ２孔板．接种第２天加化疗药多柔比星处理细胞。上 述两组细胞药物浓度梯度均为０、０．１５、０．３０、０．６０ ｆｆｍｏｌ／Ｉ 。 直是卵巢癌治疗中的一大难题［１］，研究其耐药机制是解决这 难题的关键。死亡结构域相关蛋白（ｄｅａｔｈ ｄｏｍａｉｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅ 一培养基均为１．５ ｍＩ 。药物作用２４ ｈ后，胰酶消化细胞，１ ２００ ｒ／ｒａｉｎ离心５ ｍｉｎ，细胞用磷酸缓冲盐溶液（ＰＢＳ）洗１遍，用 ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｄａｘｘ）于１９９７年在Ｃｅｌｌ杂志上首次以Ｆａｓ死亡相关蛋 白发表 ］，但其对细胞凋亡的影响一直备受争议 ］。有学者 提出Ｄａｘｘ参与Ｆａｓ凋亡通路的而发挥促细胞凋亡的作 用；而有大量研究证明，在人的正常细胞或者结肠癌细胞中， Ｄａｘｘ通过抑制凋亡基因的转录而最终发挥抗细胞凋亡的作 用 ］。已有研究表明Ｄａｘｘ基因在卵巢癌中普遍高表达＿６：。 本实验目的在于明确Ｄａｘｘ对卵巢癌化疗的影响，从而进一步 明确其耐药机制。 １材料与方法 ７Ｏ 冰乙醇固定细胞，于一２ｏ℃过夜。第２天从一２０℃取出 细胞，１ ２００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ，再用预冷的ＰＢＳ洗１遍，用１Ｏ 倍浓度的碘化丙啶（ＰＩ）及ｌｏｏ倍浓度的ＲＮＡ酶（ＲＮＡａｓｅ）各 ３００“Ｉ 避光染色细胞３０ ｍｉｎ，转流式管上机分析细胞周期变 化。 １．２．３流式仪对细胞凋亡的检测０、０．３０／ｌｍｏｌ／Ｉ 的多柔比 星处理上述两组细胞２４ ｈ后，胰酶消化两组细胞，８００ ｒ／ｍｉｎ 离心５ ｍｉｎ，ＰＢＳ轻柔漂洗１次，８００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ收集细 胞；向收集管中加入５００ Ｉ 结合缓冲液（Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒ），轻 １．１ 材料 化疗药多柔比星购自美国Ｓｉｇｍａ公司（货号 ＣＡＳ２５３１６－４０—９），实验所用卵巢癌细胞株Ｃ１３ｋ购自ＡＴＣＣ细 胞库。抗体ｃｙｃｌｉｎＢ１及抗体ｃｌｅａｖｅｄ—ｐａｒｐ够自武汉三鹰生物 技术有限公司（货号分别为５５００４一ｌ－ＡＰ、１３３７１—１ ＡＰ），抗体 Ｄａｘｘ及抗体ａｃｔｉｎ购自博士德生物工程有限公司（货号分别为 ＰＢ０５８０、ＢＭ０００５）。流式细胞仪购自美国Ｔｈｅｒｍｏ公司（型号 ＡＢＩ１７５００）。 轻摇晃，使细胞悬浮；向每个收集管中加人５ Ｉ 的异硫氰酸荧 光素标记的膜联蛋白Ｖ（Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ—ＦＩＴｃ），轻轻混匀，然后再 加入５ Ｉ ＰＩ，摇晃，使其充分混匀；于室温下避光放置，使细胞 和上述试剂充分反应５～１５ ｍｉｎ；避光，置于４℃。于ｌ ｈ内进 行流式细胞仪检测。 １．２．４ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ Ｃ１３ｋ细胞接种于ｌ２孑Ｌ板，第２天用０． ３０ ｆｆｍｏｌ／Ｉ 药物梯度处理细胞４８ ｈ后 胰酶消化细胞，１ ５００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ，再用ＰＢＳ洗涤细胞１次。用ＲＩＰＡ裂解细胞 提取蛋白，３Ｏ ｇ上样量行十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺（ＳＤＳ— ＰＡＧＥ）电泳。牛奶封闭１ ｈ，封一抗ｃｙｃｌｉｎＢ１、ｃｌｅａｖｅｄ—ｐａｒｐ及 １．２方法 １．２．１ 分组 卵巢癌耐药细胞Ｃ１３ｋ转染后分为阴性对照组 （ＮＣ组）和下调Ｄａｘｘ组（ｓｉＤａｘｘ组）。 １．２．２流式仪对细胞周期的检测 Ｃｌ３ｋ细胞用胰酶消化后 作者简介：伦魏巍（１９８１一），主治医师，硕士，主要从事妊娠及其相关疾病和妇科肿瘤研究。 重庆医学２０１８年１月第４７卷第 期 比星化疗约 ，相比 ＮＬ、纰，ｓｉＩ）ａｘｘ 的Ｇｅ／Ｍ期细胞白 分比明显增 ． 丧１。 内参蚩ｒｊ（；ＡＰＩ）Ｈ．４口（、过夜；第２ ｌ夫埘抗兔及抗鼠■抗， ＴＢＳ Ｉ、洗涤２ ｈ后，曝’匕仪曝光。 １．３统汁 处理 采ｊ｝】ＳＰＳＳ１３．０软件进行数据分析，计越 资料以 ±５表示，比较采川方差分析及，检验，以Ｊ 、０．０５为 处理前 ＮＣ组 ｓｈＤａｘｘ组 处理后 ＮＣ组 ｓｈＤａｘｘ组 筹异仃统 ２ 结 ：意义 果 Ｄａｘｘ 的Ｄａｘｘ 达水平均 ２．１ 检洲ｓｉＲＮＡ的｝：扰效廊 向Ｌ、１ ３ｋ细胞ｌ｛＿ｌ转入ｓｉＲＮＡ 后，往未经化疗药处删ｆｕ经化疗药处 明恩降低， ｌ ２．２ 流 细胞仪检测 ｐ・ａｃｔｉｎ 细胞周期的，竖化 两组细胞的周期 图１ 未加及加后，ｓｉＲＮＡ的干扰效应 对比． 多 比星（）．３【］ｌｍｌｏｌ／Ｉ 时，筹异有统计学意义（Ｐ＜ｉ ０．０５），Ｎ【、 和ｓｉＤａｘｘ ，Ｅ不ＪＪＩ１约时．均阻滞于（ １ ；加多 表ｌ 不同浓度的多柔比星作用下ＮＣ组及ｓｉｌ）ａｘｘ组各细胞周期所占比例分析（ 士 ） ３讨 论 多化疗药发生耐药足…于肿瘤细ｌ胞Ｉ）ＮＡ受｛｛，ｉ后．通过 机制使 胞佶Ｊ！胡停滞．使受损的细Ｊ弛Ｉ）ＮＡ住停滞期｛ｔｌ￣－ｑ 仃效的损伤修 协作用。 譬 。．从『『【ｉ使螂细胞逃过化疗敛Ｉ）ＮＡ坝伤的杀 器 烘 Ｄ ｘ作 一种保守的多功能量 ．通过蛋白｝．ｊ赁ｒ１的相 的表达， ｊ ＪＪＪＩＩ瘤细胞捌 系密 １ｆ 作用或荷转求下游 。有研究发现［）ａＸＸ‘ｊ ｐ５３结合 迎过抑制ｐ５３ ｘ，ｌ Ｆ游 壤因的转求州 作用．使用ｆ９ｊ相关篮ｌ ｔ（曼¨｝】２１、ＣＤＫｓ等）表达 图２ 未加与加０．３０ ｔ￣，ｎｏｌ／ｌ 化疗药处理后两组的 细胞凋亡率比较 卜调．受损的Ｉ）ＡＮ不能修 ＩｆＩｆ使细胞发 ｌ 捌亡“ ：征人结肠 细胞、 ｔ犏细胞中，Ｉ）ａｘｘ越ｌ过转录州拄仃丝检测ｆ讧点的 ＆达，参与癌细胞捌 …： 卵巢癌叶１．过农达Ｉ）ａｘｘ能够促进 ２．３流 细胞仪榆测 细胞的删亡ｌ七较 不加约｝ｉ、ｆ两组捌 印巢癌的进腱。使癌细胞发 化疗埘药．这‘机制町能 １）ａｘｘ 转录涧控七ＩＪ火Ｊ州期蛋白表达．使细胞ＪＩｌｌ＝ｌ 滞、损伤的Ｉ）ＮＡ 。 僻以修复，从仃订使癌细胞逃过化疗的杀伤Ｊ 生而寸约有 率詹砰尢统汁学意义（，’一０．１ ２２）．多震比星（０．３ ｆ，ｍｏＩ／Ｉ ） 作用时ＮＣ 的捌 率Ｉ＿ｒ ｓｉＩ）ａｘｘ （Ｐ一０．０３１）。见【 ２。 ２．４ ｗ ｓｌｅｒｎ ｂｌｏｔ检洲ｃｙｃｌｉｎＢ１、ｃｌｅａｖｅｄ ｐａ ｒｐ的表达 小实验巾，征卵巢癌耐药细胞株【、１ ３ｋ ｌＩ１．利刷ｓｉＲＮＡ降低 １）ａｘｘ蛋［ｊ的 达后，能使Ｌ、１ ３ｋ细胞 、ｒ多莱比星发 化疗耐 约。进一步对这一现象的机制进行探｝寸．芭肯发小 ０．３０ Ⅲｎｏｌ／Ｉ 的多 比挈作竹Ｊ时，ｓｉｌ）ａｘｘ绀细胞一ｌ ｌＧ２／Ｍ期删控蛋 ｓｉＤａｘｘ 胞在化疗约多粜比 作ＨＪ 。ｃｙｃｌｉ］ｌｆ；＇１表达水平降 低，细胞 滞于Ｇ２／Ｍ Ｊ９】．受损的细胞ＤＡＮ发生损伤修复．细 胞凋亡牢降低；ＮＣ组受坝伤的ＤＮＡ跳过Ｇ２／Ｍ期十：；＝测位点， 损伤没订得到修复，细胞测亡牢高，见 ３。 ＮＣ窒Ｒ ｓ；Ｏａｘｘ组 ＮＣ组 ｓ；Ｄａｘｘ组 ㈠ｃｙｃｌｉｎｅＢ１表达水平＿卜降．他Ｃ１３ｋ细胞 ＧＺ／Ｍ期发生Ｊ嗣期 滞，化疗药ｆ１ 下损伤的Ｉ）ＮＡ在这一Ｈ０‘期得到有效的损伤 修复，ＤＮＡ损ｆｊｊ标志性货 ｃｌｅａｖｅｄ—ｐａｒｐ丧达水平下降，从而 刈多柔比 ｎ勺 药性增加．ｍｆ这一现象 ｊ之ｌ１仃的研究 十Ｉ】反。 ｃｙｃｌｉｎｅＢ１ 本实验ｌＩ】．增Ｊ】口多柔比 的药物浓Ｊ 至０．６０ ｌｌｎｌｏｌ／／Ｉ 时， ｃｌｅａｖｅｄ・ｐａｒｐ ｓｉｌ）ａｘｘ组的Ｇ２ Ｍ期的嘲Ｉ滞作用消失，（ １ １绸细胞增加，细胞 圳期有继续进腱的趋翦。 ｐ－ａｃｔｉｎ Ｉ） ｘ作为一种多功能缢ｒ１参 转求及Ｆａｓ信｝；通路 促进细胞凋Ｉ、：，并作为细胞核蛋白参 ＿ｊｌ染色体的稳定作用 一 一 ＋ ＋ 。多柔比壁 本文验巾 卵巢 耐药细胞系（、１３ｋ细胞中Ｆ调 Ｉ） ｘ表达后．细胞对多采比 的耐药性增ＪＪｌｌ。寻找使Ｄａｘｘ表 达上调的方式，町能使耐约川胞株（：ｌ ３ｋ对多柔比 化疗增 敏．这为卵巢癌化疗耐药的机制研究及临床治疗提供了一个新 重庆医学２０１８年１月第４７卷第１期 的靶点。 参考文献 ＭＵＣ１３ ｉｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００９，６９（３）： ７６５—７７４． ［９］胡坤．死亡结构域相关蛋白的研究进展［Ｊ］．徐州医学院 学报，２０１５，３５（５）：３４３—３４６． ［１］李霞．ｍｉＲＮＡ在卵巢癌化疗耐药中的作用［Ｊ］．中国计划 生育学杂志，２０１３，２１（１２）：８４２－８４４，８４７． ［１０３ ＧＯＳＴＩＳＳＡ Ｍ Ｌ，ＭＯＲＥＬＬＩ Ｍ，ＭＡＮＴＯＶＡＮＩ Ｆ，ｅｔ ａ１． Ｔｈｅ Ｔｒａｎｓｃ ｒｉｐｔｉ０ｎａ１ Ｒｅｐｒｅｓｓｏｒ ｈＤａｘｘ Ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ ｐ５３一ｄｅ— ［２］吕磊，刘志强，李丽，等．卵巢癌耐药细胞株的比较蛋白质 组分析［Ｊ］．高等学校化学学报，２００６，２７（４）：６３５—６３７。 ［３］ＴＡＮＧ Ｊ，ＰＡＮＧ Ｑ Ｍ，ＹＡＮＧ Ｘ．Ｄａｘｘ ｉｓ ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｌｙ ｒｅｇ— ｕｌａｔｅｄ ｂｙ Ｍｄｍ２ ａｎｄ Ｈａｕｓｐ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２０１０，３９３（３）：５４２－５４５． ｐｅｎｄｅｎｔ ＡｐｏｐｔｏｓｉｓＦＪ］．ＪＢＣ，２００４，２７９（４６）：４８０１３—４８０２３． ［１１］ＧＩＯＶＩＮＡＺＺＩ Ｓ Ｌ，Ｍｏｒｏｚｏｖ Ｖ Ｍ，ＳＵＭＭＥＲＳ Ｍ Ｋ，ｅｔ ａ１．ＵＳＰ７ ａｎｄ Ｄａｘｘ ｒｅｇｕｌａｔｅ ｍｉｔｏｓｉｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｔａｘ— ａｎｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ａｕｒｏｒａ－Ａ ｋｉｎａｓｅ ［４］ＲＵＳＥＴＳＫＡＹＡ Ｎ Ｖ，ＬＵＫＹＡＮＯＶＡ Ｎ Ｙ，ＣＨＥＫＨＵＮ Ｖ Ｆ．ｃｈｅｋｈｕｎ．ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐｒｏｆｉｌｅ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｃｃｌｅ ｉｎ ｍｏｂ７ ａｎｄ ｍｃｂ ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ，２０１３，２０（５）：７２１－７３１． ［１２］ＰＡＮ Ｗ Ｗ，ＺＨＯＵ Ｊ Ｊ，ＬＩＵ Ｘ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｄｅａｔｈ ｄｏｍａｉｎ－ａｓ— ｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ＤＡＸＸ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐ— ７／ｄｏｘ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｏｓｅｄ ｔｏ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ａｎｄ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ［Ｊ］．Ｅｘｐ Ｏｎｃｏｌ，２００９，３１（３）：１４０—１４３． ｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏ Ｃｈｅｍ，２０１３，２８８ （１９）：１３６２０－１３６３０． ［５］ＣＯＲＰＥＴ Ａ，ＯＬＢＲＩＣＨ Ｔ，ＧＷＥＲＤＥＲ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｄｙｎａｍ— ｉｃｓ ｏｆ ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｎｅｓ— ｃｅｎｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｖｅａｌｓ ａ ＤＡＸＸ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｏ ＰＭＬ— ＮＢｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｏｒ ｐｅｒｉｃｅｎｔｒｏｍｅｒｉｃ ｈｅｔｅｒｏｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｏｒ— ［１３］ＹＡＮＧ Ｘ，ＫＨ０ＳＲＡＶＩ ＦＡＲ Ｒ，ＣＨＡＮＧ Ｈ Ｙ，ｅｔ ａ１． Ｄａｘｘ，ａ ｎｏｖｅｌ Ｆａｓ ｂｉｎｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｈａｔ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＪＮＫ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，１９９８，８９（７）：１０６７—１０７６． ［１４］ＡＬＩ Ａ Ｙ，ＡＢＥＤＩＮＩ Ｍ Ｒ，ＴＳＡＮＧ Ｂ Ｋ．Ｔｈｅ ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ＰＰＭＩＤ ｃｏｎｆｅｒｓ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｏｖａｒｉ— ａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｔｔｅｎｕａｔｉｎｇ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｋｉｎａｓｅ １ ａｎｄ ｇａｎｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ，２０１４，１３（２）：２４９—２６７． ［６］ ＷＡＮ Ｙ Ｐ，ｗＵ Ｙ Ｍ，ＺＨＵ Ｃ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａ１ ｒｅ— ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈＤａｘｘ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｂｙ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ １２ ＥＩＢ ５５ｋＤａ ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｗｉｔｈ ｈＤａｘｘ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ Ｊ， ２００４，１１７（５）：７５３—７５７． ｐ５３ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２０１２，３１（１７）：２１７５—２１８６． ｒ１５］ＭＡＲＩＮ０ＮＩ Ｉ，ＫＵＲＲＥＲ Ａ Ｓ，ＶＡＳＳＥＬＬＡ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｌｏｓｓ ０ｆ ＤＡＸＸ ａｎｄ ＡＴＲＸ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｉｎ— ［７］ＬＩ Ｑ，ＺＨＡＯ Ｌ Ｙ，ＺＨＥＮＧ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐ５３ ｂｙ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １２ Ｅ１ ５５Ｋ ｄｅｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｓ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｇｅｎｏｔｏｘｉｃ ａｇｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｊ Ｖｉｒｏｌ， ２Ｏ１１，８５（１６）：７９７６－７９８８． ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ０ｇｙ，２０１４，１４６ （２）：４５３． ［８］ｃＨＡＵＨＡＮ Ｓ Ｃ，ＶＡＮＮＡＴＴＡ Ｋ，ＥＢＥＬＩＮＧ Ｍ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｍｕｃｉｎ （收稿日期：２０１７－０６－２８修回日期：２０１７－０９－０６） （上接第１６页） ｅｔ ａ１．Ｄ／ｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａ１ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ＩＮｓｅａｓｅ Ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ｉｎ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃ— ｅｐｉｍｅｒａｓｅ ｉｎ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ Ｍｅｔａｂ，２００６，８９（１）：６４—７３． ［８］ＭＡＮＳＯＵＲ Ｍ，ＳＣＨＷＡＲＴＺ Ｄ，ＪＵＤＤ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｉａｚｏ— ｌｉｄｉｎｅｄｉｏｎｅｓ／ＰＰＡＲ７ ａｇｏｎｉｓｔｓ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｉｎ— ｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｓ ａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｐｒｏｓ— ｅｒ［Ｊ］．Ｊ Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ，２０１５，１４（７）：２７６９—２７８３． ［２］ＯＨ Ｊ Ｊ，ＰＡＲＫ Ｓ，ＬＥＥ Ｓ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｌｌｅｌｉｃ ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｔｏ ｐｒｅｄｉｃｔ ａｄｖａｎｃｅｄ－ｓｔａｇｅ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ａｆｔｅｒ ｒａｄｉｃａｌ ｐｒｏｓｔａｔｅｃｔｏｍｙ ｕｓｉｎｇ ａｎ ｅｘｏｍｅ ＳＮＰ ｃｈｉｐ ｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｏｎｃｏｌ，２０１１，３８（２）：５３７—５４６． ［９］ＣＵＲＲＩＥ Ｅ，ＳＣＨＵＬＺＥ Ａ，ＺＥＣＨＮＥＲ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂ，２０ １ ３，１ ８ （２）：１５３—１６１． ＦＪ］．Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ，２０１５，１４１（８）：１４９３—１５０１． ｒ３］ＭＥＲＴＥＮＳ Ｋ，ＳＬＡＥＴＳ Ｄ，ＬＡⅣ田ＥＲＴ Ｂ，ｅｔ ａ１．ＰＥＴ ｗｉｔｈ Ｆ－ｌａｂｅｌｌｅｄ ｃｈｏｌｉｎｅ－ｂａｓｅｄ ｔｒａｃｅｒｓ ｆｏｒ ｔｕｒｎｏｕｔ ｉｍａｇｉｇ：ａ ｒｅ— ｎｒ１Ｏ］ＦＵＲＵＳＡＷＡ Ｙ，ＯＢＡＴＡ Ｙ，ＦＵＫＵＤＡ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｍ— ｍｅｎｓａｌ ｍｉｃｒｏｂｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｂｕｔｙｒａｔｅ ｉｎｄｕｃｅｓ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ— ｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇｉｎｇ，２０１０， ３７（１１）：２１８８－２１９３． ｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｏｎｉｃ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ［刀．Ｎａｔｕｒｅ，２０１３，５０４ （７４８０）：４４６—４５０． ［４］ＫＩＴＡＪＩＭＡ Ｋ，ＭＵＲＰＨＹ Ｒ Ｃ，ＮＡＴＨＡＮ Ｍ Ａ，ｅｔ ａ１． Ｕｐｄａｔｅ ｏｎ ｐｏｓｉｔｒｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ ｆｏｒ ｉｍａｇｉｎｇ ｏｆ ［１１］党永红，蔡炯，李欣，等．”Ｆ－ＦＰＡ在荷乳腺癌小鼠模型中 的显像性能和体内分布［Ｊ］．中国医学科学院学报，２０１５， ３７（３）：３２０－３２４． ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｕｒｏｌ，２０１４，２１（１）：１２—２３． ［５］ＰＯＮＤＥ Ｄ Ｅ，ＤＥＮｃＥ ｃ ｓ，ＯＹＡＭＡ Ｎ，ｅｔ ａ１．”Ｆ－ｆｌｕｏｒｏ— ａｃｅｔａｔｅ：ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｃｅｔａｔｅ ａｎａｌｏｇ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｉｍａ— ｇｉｎｇ一－ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ 。Ｆ－ｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ ｖｅｒｓｕｓ“Ｃ－ａｃ— ［１２］党永红，蔡炯，李欣，等．Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠２一 Ｆ＿氟丙酸ｍｉ— ｃｒｏＰＥＴ显像［Ｊ］．中华核医学与分子影像学杂志，２０１６， ３６（２）：Ｉ８０－１８３． ｅｔａｔｅ［Ｊ］．Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ，２００７，４８（３）：４２０—４２８． ［６］ ＰＩＬＬＡＲＳＥＴＴＹ Ｎ，ＰＵＮＺＡＬＡＮ Ｂ，ＬＡＲＳ０Ｎ Ｓ Ｍ．２一 。 Ｆ－Ｆｌｕｏｒｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ａ ＰＥＴ ｉｍａｇｉｎｇ ａｇｅｎｔ ｆｏｒ ｐｒｏｓ— ［１３］ＳＣＨＮＡＤＩＮＧ Ｉ Ｄ，ＢＥＥＲ Ｔ Ｍ．Ｏｐｔｉｍａｌ ｔｉｍｉｎｇ ｏｆ ｃｈｅｍｏ— ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｕｒｏｌ Ｏｎｃｏｌ，２００９，２７（１）：９７—１ＯＯ． ｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ，２００９，５０（１０）：１７０９—１７１４． ［７］ＣＨＡＮＤＬＥＲ Ｒ Ｊ，ＡＳｗＡＮＩ Ｖ，ＴｓＡＩ Ｍ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｐｉｏ— ｎｙ－ＣｏＡ ａｎｄ ａｄｅｎｏｓｙｌｃｏｂａｌａｍｉｎ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｉｎ ｃａｅｎｏｒｈａｂ— ｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ａ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍｅｔｈｙｌｍａｌｏｎｙｌ—ＣｏＡ （收稿日期：２０１７—０７—０４修回日期：２０１７—０９—１０）
