毛细管气相色谱法测定烟草中有机氯农药残留

第２１卷第１期　２０Ｏ７年３月　干旱环境监测　Ａｒｋｔ蜀硼　掰ｒ醐吐　Ｍｏｎ，￣Ｖｏ／．２１　Ｎｏ．１　　Ｍａｒ．．２００『７　毛细管气相色谱法测定烟草中有机氯农药残留　贺宾，施红林，金永灿，崔柱文，杨光宇　（云南烟草科学研究院，云南昆明６５０１０６）　摘要：研究了烟草中六六六及滴滴涕异构体含量的气相色谱分析方法。样品以石油醚＋丙酮在索氏提取器中提　取，提取液以浓硫酸净化。采用ＤＢ一５弹性石英毛细管柱分离样品，ＧＣ—ＥＥＤ检测农药六六六、滴滴涕的残留量。方　法的线性范围为２，２７ｘ　１０一一７，６６×１０　ｇ；最小检测量为１．３×１０～一３．０×１０～腭，加标乎均回收率为９５．３９６．　１０３．３％，ＲＳＤ为２．８％一４．５％。　关键词：毛细管气相色谱法；烟草；有机氯农药；残留量　中圈分类号：Ｘ８３０．２　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００７—１５０４Ｉ２００ｒ７）０１—００Ｏ５—０３　Ｍ－＇ｎ￣ｍｉｍ　ｅｆ０ｒ窘舳俄址　ＰｅｓｔｉｃｉｄｅｓＲｅｓｋｈｌｅｓ量ＩＩＴｏｂａｃｃｏｂｙｏ　ｍａｒｙＧａｓａｍｍ　ｌ，蟹即　ＨＥ　Ｂｉｎ，Ｓ｝ＩＩ王王０｜ｌｇ—ｔｉｎ，ＪＩＮ　Ｙｏｎｇ一咖，ＣＵＩ　Ｚｈｕ—ｗ＇ｅｌｌ，ＹＡＮＧ　Ｃｕ踟’ｇ—ｙｕ（￣ｂａｃｃｏ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｌ（１】ｌ锄ｉｎｇＹａｍｍｎ６５０１０６，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓ嘲ｏｒｙ　０ｆ　Ｃｈ臼　，Ｙｕｎｎａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　０ｆＴｏ－　：Ｔｈｅ　ｃａｐｉⅡａｒｙＣＡ：ｍｅｔｈｏｄｗａｓｉｎｔｏｒｄｕｃｅｄｆｏｒｄｅｔｅＩｍｉｌ￣ｏｎ　０ｆ饵　瑚ｃ　Ｉ　ｐｅ　｜ｄｄｅ商山髓ｉｎｔｏｂａｃｃｏ．Ｔｈｅ便驴ＩＨ：ｂｌｏ．　ｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍ　ｔ０ｂ睡－Ｄｃ０ｗｉｔｈｍｉｘｅｄ　ｓｏｌｖｅｎｔ（ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ＋ａｃ咖　），ｃｌｅａｎｅｄ　ｕｐ　ｂｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄｓ　ｌ－　ｆｉｎｅ　ｐｔ：ｓｌｉｃ№ｉｅ　ｔｉｃ　ａｃｉｄ，ｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙ　ｃａｐｉｌｌ置ｌＩｙ　ｃｏｌｕｍｎＤＢ一５（３０ｍ×０．２５衄×０．２５￣ｍ）ｍｔｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＥＣＤ．Ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｃｏｎｄｉｔｉ￣ｅｗ盥ｅ　ａｓｆｏｌ－　ｌｏｗ：Ｃ，ａｒｎｅ￣＂ｇａｓ　（９９．９９９％，０．００１　５　Ｕｎ￣ｎ）；Ｓｐｌｉｔ　ｒａｉｔｏ．２．３：１，ｉｎｊｅｃｔｏｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　２２０℃，ｄｅｔｅｃｔｏｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　３３０℃，ｃｏｌ－　咖ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｐｍｇｒｅｍ－１００℃（　０．５　），ｒａｔｅ　０ｆ　１５℃ｒａｉｎ　ｔｏ　２４０￣Ｃ（ｈｏｌｄ　７　）．１ｋ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｘｉｅｓ　ｗ班ｅ　ｗｉｔｈｉｎ　９５．３％一１∞．３％ａｎｄＲＳＤ　２．８％一４．５％．　Ｋｅｙ’－０　ｌｓ：ｃａｐｉｌｌａｒ）ｒ　ｇａｓ　ｄ珊岫曲０ｇ呐；ｔｏ］３ａｃ￣；ｏｒ￣ｎｅｃｈｌｏｒｌｎｅ　ｐｅ￣ｉｃｉｄｅ；ｒｅｓｉｄｕｅ　以六六六（ＢＨｃ）和滴滴涕（ＤＤＴ）为代表的　有机氯农药使用历史长、范围广、用量大，虽已禁　用多年，但由于半衰期长、化学性质稳定、不易降　草中六六六（ＢＨｃ）和滴滴涕（ＤＤＴ）的残留量进　行了分析，取得了满意结果。　１实验部分　解和代谢，所以长期积存于植物和土壤中。至今　农产品及土壤中检出率仍相当高［１　】。目前有　１．１主要仪器及试剂　机氯农残的测定方法主要有比色法、电化学法和　色谱法等，其中气相色谱法是最主要的方法¨Ｊ　；　而气相色谱法测定农残时，有机溶剂萃取，固相　萃取，固相微萃取等是常用的样品前处理技　术【５　】，为了低成本准确测定烟草中有机氯农药　残留，我们研究了以有机溶剂提取样品，提取液　以浓硫酸净化，采用毛细管气相色谱外标法对烟　收稿日期：∞０６—０８—２３；修回日期：２Ｏ０６—１０—１１　Ｉ－ＩＰ　６８９０气相色谱仪（美国安捷伦仪器有限　公司）。电子捕获（ＥＣＤ）检测器（美国安捷伦仪　器有限公司）。索氏提取器。旋转薄膜蒸发器　（瑞士Ｂｕｅｈｉ公司）。ＤＢ一５（３ｏ　ｒｒｌ×０．２５　ｎⅡｎ×　０．２５　ｇｍ）弹性石英毛细管柱（Ｊ＆Ｗ　Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ）。　ＳＫ５２００Ｈ超声波仪、离心机（北京医学仪器厂）。　ａ—ＢＨＣ、Ｂ—ＢＨＣ、　一ＢＨＣ、７一ＢＨＣ、ＰＰ’一　基金项目：云南省自然科学基金资助项目（２００５ｍｏ２）　作者简介：贺宾（１９６８一），男，云南昆明人，工程师，大学，主要从事烟草化学研究工作。　维普资讯 http://www.cqvip.com

・６・　干旱环境监测　第２１卷　ＤＤＥ、ＰＰ’一ＤＤＤ、叩’一ＤＤＴ、ＰＰ’一ＤＤＴ　８种农药　混合标准溶液储备液（全国标准样品委员会北京　应天意标准品有限公司），浓度均为０．１０　ｇ，Ｌ，纯　度均为９９％。丙酮（ＡＲ）、石油醚（ＡＲ，３０—６０　２结果与讨论　２．１样品前处理方法　植物样品中农药残留样品提取一般采用超　声波提取和索氏提取法。其中超声波提取法通　常采用二氯甲烷／Ｎ酮作为提取剂，效率较高，但　二氯甲烷成本高、毒性大、污染环境。本研究以　成本低、污染小的石油醚／丙酮作为提取剂，采用　索氏提取法提取样品。有机氯农药的净化一般　℃）、无水硫酸钠（ＡＲ，６５０℃灼烧４　ｈ，冷却后干　燥器中密闭保存）；浓硫酸（ＡＲ）；农药标准品用　石油醚稀释成所需浓度的标准储备液，室温密闭　保存。　１．２样品前处理　准确称取烟草样品１０　ｇ（预先过４０目筛），　用索氏提取器（６ｏ　ｍｌ石油醚＋２０　Ｉｌｌｌ丙酮）提取　８—１０　ｈ。转入１００　ｍｌ具塞锥形瓶中，加７　ｇ无水　采用磺化法、固相萃取（ＳＰＥ）和固相微萃取法　（ＳＰＭＥ），其中ＳＰＭＥ成本最高，ＳＰＥ居中，磺化法　最便宜。文献报道的索氏提取法，其样品磺化采　用分液漏斗，硫酸用量很大（１００—２００　Ｉｌｌ１），本研　究将提取液浓缩后，加入浓硫酸超声振荡净化。　硫酸钠干燥１　ｈ，移入旋转薄膜蒸发仪（４２—４５　℃水浴）之梨形瓶中浓缩至近干，再用５—８　Ｉｌｌｌ　石油醚替换并浓缩至近干，重复２　３次，使有机　从样品测试结果可以看出，本方法净化效果良　好，浓硫酸用量仅几毫升，大幅度降低了测试成　本，减小了环境污染。　相中的丙酮完全除去。转入１０　Ｉｌｌｌ离心试管中，　用石油醚定容至适当体积。加１　ｍｌ浓硫酸，超　声振荡３０　ｓ，使浓硫酸与石油醚混合，离心１０　２．２标准曲线、线性范围与最小检测量　ｍｉｌｌ（３　０００　ｒ／ｒａｉｎ），重复操作２次，使其充分净　化，备用。　１００　ｍｇ／Ｌ的农药标准混合储备液（含ａ—　ＢＨＣ、Ｂ—ＢＨＣ、６一ＢＨＣ、　一ＢＨＣ、ＰＰ’一ＤＤＥ、ＰＰ’　一１．３色谱条件　色谱柱：ＤＢ一５（３０　ｍ×０．２５　ｉｎｔｏ×０．２５　）　弹性石英毛细管柱；载气：（高纯Ｎ２）０．００１　５　ＤＤＤ、ｏｐ’一ＤＤＴ、ＰＰ’一ＤＤＴ　８种农药），使用时　用石油醚逐级稀释配制成混合标准工作液，浓度　分另０为：５．０×１０一‘，１．０×１０一’，５．０×１０一　，１．０×　１０～，５．０×１０～，１．０×１０～ｍｇ／Ｌ，各浓度工作液　取１．０　进样分析，以ｄ—ＢＨＣ、Ｂ—ＢＨＣ、６一　ＢＨＣ、　一ＢＨＣ、ＰＰ’一ＤＤＥ、ＰＰ’一ＤＤＤ、叩’一ＤＤＴ、　Ｌ／ａｒｉｎ（恒流方式）；尾吹：（高纯Ｎ２）０．０２　Ｌ／ａｒｉｎ；进　样口温度：２２０℃；检测器温度：３３０℃；进样分流　比：２．３：１；进样量：１　；柱升温程序：初始温度　１００℃，保持０．５　ｒａｉｎ，以１５℃／ｒａｉｎ升至２００℃　后，保持１．０　ｒａｉｎ，４℃／ｒａｉｎ升至２４０　ｏＣ，保持７　ｍｉｎ（共约２５　ｍｉｎ）汐　标法定量。　ＰＰ’一ＤＤＴ的浓度对对照品峰面积做线性回归分　析，得标准曲线、线性范围及最小检测量，见表　１。有机氯农药标准品色谱图见图１。　表ｌ标准曲线、线性范围及最小检测■　注：Ｃ为标准品浓度；Ａ为峰面积。　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　贺宾等毛细管气相色谱法测定烟草中有机氯农药残留　裹２回收率和精密度　・一，－　２００　》　ｌ６０　日　、　幽　ｌ２０　脚　８０　４０　ｌ０　ｌ５　２０　２５　保留时间／ｒａｉｎ　图ｌ有机氯农药标准品色谱图　ｌ　ａ—ＢＨＣ；２口一ＢＨＣ；３　８一ＢＨＣ；４．ｙ—ＢＨＣ；５　ｌａｐ’一ＤＤＥ；６ｌａｐ’　一ＤＤＤ；７叩’一ＤＤＴ；８　ｌａｐ’一ＤＤＴ　２．３方法加标回收翠和精密度　准确称取同一烟草样品６份，分别加入一定　２．４样品的测定　量标准品溶液，３个添加水平，每个添加水平２　份，按“１．２样品前处理，，的方法处理，并按选定　的色谱条件进行测定，计算平均回收率及相对标　准偏差。结果见表２。　准确称取３种不同的烟草样品，按“１．２样　品前处理”方法处理，然后按选定的色谱条件进　行测定，以外标法定量，烟草样品农药残留量测　定结果见表３。　裹３　３种烟草样品中农药残留■的测定结果　Ｉｌｇ，ｇ　［４］王津军，文国松，丁金玲，等．烟草农药残留研究进展及降　参考文献：　［１］李晓秀，陆安祥，王纪华，等．北京地区基本农田土壤环境　质量分析与评价［Ｊ］．农业工程学报，２ＯＯ６，２２（２）：６０—６３．　［２］魏云洁，孔祥义，王英平．桔梗中有机氯农残现状及其在植　株中的分布［Ｊ］．特产研究，１９９９，１４（３）：３９—４１．　低烟叶农药残留的探讨［Ｊ］．云南农业大学学报，２００６，２１（３）：　３２９—３３２．　［５］徐晓琴，胡广林，王小如．气相色谱法在中草药及其制剂　中痕量有机氯类农药残留分析上的应用进展［Ｊ］．分析测试学　报。２ＯＯ４，２３（４）：１１２—１１７．　［３］李云飞，彭云霞，张承聪．气相色谱～质谱联用仪测定果蔬　中ｌ２种农药残留量［Ｊ］．云南大学学报（自然科学版），２ＯＯ４，２６　（Ｂｏ７）：１７６—１８０．　［６］康长安，何娟．农药残留样品前处理技术研究进展［Ｊ］．世　界农业，２００６，（１０）：４７—４９．