中国实验诊断学2010年8月第14卷第8期 1325一 敏感;金黄色葡萄球菌对青霉素耐药情况较严重,对万古霉 学检测结果分析[J].检验医学与l临床,2O09,6(17):1429. 素敏感性最高;链球菌属除对红霉素和四环素耐药较为严重 [2]陈红.468例阴道炎患者病原菌检测结果分析[J].中国妇幼保 外,对其他抗生素均相对敏感,可见不同种的细菌对不同抗 健,2006,21(2):183. 生素的敏感性不一。 [3]封纪珍,狄素兰,吕 萍.1 530例女性阴道炎异常分泌物的病原 综上所述,本研究从157例顽固性阴道炎患者检出 学检测[J].中国妇幼保健,2OO4,19(10):51. 12种182株细菌,药敏试验发现同种细菌其耐药的抗生素可 [4]韦秋华,曾萼.细菌性阴道病的诊断和治疗[J].中国妇幼保 不同,不同种细菌其敏感的抗生素亦有所差异,因此,对患者 健,2007,22(35):5071. [5]周惠琴,赵胜.细菌性阴道炎病原菌种类及其耐药性分析[J]. 进行细菌培养及根据药物敏感性试验给药,防止抗生素的滥 临床输血与检验,2002,4(4):38. 用。 [6]李加宁,谭斯艺.分泌物细菌培养及药敏试验在顽固性阴道炎诊 参考文献: 断中的作用[J].右江民族医学院学报,2005,1(6):848. [1]隋静,李云芳,陈维萍,等.2o84例阴道炎患者阴道分泌物病原 (收稿日期:2010—05一l1) 文章编号:1007—4287(2010)08—1325—02 循环酶法测定血清同型半胱氨酸方法学评价 罗 军 ,王贤俊 ,曹晓燕 (1.沈阳军区总医院检验科,辽宁沈阳110016;2.维日康生物研发中心,浙江温州325016) 同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)即2一氨酸一4巯基丁 (NccLS)评价方案进行5法评价实验。 酸l1 J,为一种含硫氨基酸,是营养必需氨基酸一甲硫氨酸 1.4.3统计学方法采用F检验统计分析两种方法的精密 (Met)代谢的中间产物。血浆中存在氧化型和还原型Hcy两 度、线性范围、准确度、方法比较及干扰因素。 种形式,氧化型Hcy即二硫同型半胱氨酸(亦称同型胱氨 2结果 酸)、同型半胱氨酸一半胱氨酸二硫化合物(占10%一20%) 2.1线性范围测定 取200 tanol/L的Hcy标准液,稀释成 和白蛋白一同型半胱氨酸二硫化合物(占>70%)l2J。氧化 1.0,2.0,4.0,16.0,32.0,64 ,128.0 mol/L不同浓度,用循环 型Hcy占绝对多数(99%),还原型即单体Hcy只占(1%)。 酶法平行5测定7份标本中的Hcy的浓度,取均值做为测定 Hcy血浆水平受性别、年龄、吸烟、血压、B族维生素缺乏、叶 值,结果显示,当Hcy浓度在2.0—64 tmaol/L时线性良好(r 酸、某些药物以及Hcy代谢调节酶基因多态性、内分泌激素 =0.998)。 如胰岛素和胰高血糖素、肾脏功能等诸多因素影响。 2.2批内精密度比较取五个不同值混合血清,用循环酶 1资料方法 法测定,每个样本测定20次,批内精密度分别为:2.34%, 1.1标本来源选择2008年7月至2009年8月来我院就诊 2.15%,1.98%,3.24%,2.67%,平均Cv%为2.48%(见表1)。 患者,清晨空腹静脉采血,离心分离,一20℃保存备用。 批间精密度:将上述5个标本分别分装成4o份,每天分别取 1.2仪器 日立7170型全自动生化分析仪,美国雅培公司 2份测两次(每次间隔时间在4h以上),每次做双份,共测20 IMX型全自动分析仪。 天,每次测定时做质控。批问精密度(Cv)分别为:2.69%, 1.3 试剂 标准品为美国雅培公司提供,Hcy浓度为 3.15%,2.89%,3.65%,3.46%,平均Cv%为3.17%(见表1)。 200tanol/L,临用前稀释成Hey=0 ̄mol/L,Hcy=2.5 tanol/L, Hey=5/anol/L.Hcy=10/anol/L Hcy=20/anol/L.Hcy=40 表1循环酶法测定血清同型半胱氨酸的精密度分析 pmol/L,Hcy=80 tanol/L等7个梯度浓度的标准液备用。质 控血清:低值质控血清,Hcy=10/zmol/L,中值质控,Hcy=30 tmaol/L,高值质控,Hcy=70 panol/L。 1.4试验方法 1.4.1测定方法(1)循环酶法。(2)荧光偏振免疫法(FPI. A)。根据各厂家试剂盒说明书要求编制各方法实验参数。 1.4.2操作方法将购自雅培公司的标准品稀释成。使用 两种不同方法的试剂盒,取同一组标准对全自动分析仪进行 定标,做实内质控在控后,按美国临床实验室标准化委员会 l326— Chin J Lab Diagn,Au st,2010,Vol 14,No.8 2.3回收试验取一份Hcy浓度为21.87,tmaol/L的血清标 酶偶联过氧化物酶的作用下,发生Trinder氏显色反应,样本 中Hcy浓度与色原变化成正比。 本0.9 ml与另一份Hcy浓度为51.34/maol/L的血清标本0.1 rnl混合,混合后血清Hcy理论浓度为24.82tnnol/L,用循环酶 法测定混合后的血清,平行测定5次,测定结果平均值为 25.12 t.unol/L,回收率为101.2%。 2.4干扰试验 研究发现,循环酶法测定血清Hcy受定标曲线影响较 大,本试验为求工作曲线测定值稳定,采用了经过远点的5 点定标法,其线性与理论值相关性良好。因为本法采用了 Trinder氏反应,因此受胆红素及Vc等还原型物质影响,当加 入抗干扰物质后,在一定浓度范围内可避免胆红素及Vc竞 2.4.1加入不同浓度的NH4C1于血清标本中,当NH4C1浓 度低于40 ttmol/L时,对循环酶法测定Hcy结果无明显影响。 争性消耗反应产生的过氧化氢。 循环酶法是目前临床测定血清Hcy最新的一种化学方 2.4.2加入不同浓度的胆红素于血清标本中,当胆红素浓 度低于340 panol/L时,对测定结果无明显干扰。 法,与以前免疫,电泳,色谱等方法相比,更具有操作简单,可 2.4.3加入不同浓度的血红蛋白于血清标本中,对测定结 自动化,且临床检查功能指标更好等优点,随着对同型半胱 果无明显干扰。 氨酸的临床研究的深入,其定量测定意义越来越受到重视, 2.4.4加人不同浓度的抗坏血酸与血清标本中,当抗坏血 因此本试验的检测方法及试剂具有很高的推广及应用价值。 酸浓度低于300 panol/L时,对测定结果无明显干扰。 参考文献: 2.5循环酶法与荧光偏振免疫法对比试验 选择200份非 [1]陆元善.同型半胱氨酸代谢和I 床应用[J].上海医学检验杂志, 溶血标本,分别用循环酶法(Y)与FPIA法(x)测定,显示有良 2001,16(4):196. 好的相关性(Y=0.979 8 +0.484 4,r=0.999 5,P<0.05) [2]梁国威,赵媛,单华,等.脑血管病患者总同型半胱氨酸水平 3讨论 与血肌酐相关性及肾脏代偿调节的性别差异分析[J].中华检验 循环酶法测定血清同型半胱氨酸的反应原理l3-4J:在 医学杂志,2006,29(3):208. TCEP的作用下,氧化型Hcy转化为游离型的Hcy,游离型的 [3]Roberts RF,Roberts WL.Pefformance charactefistics of a re6ombinant en— z3nnatic cycling assay for quantiifcation of total homocys ̄ine in Sel'lll ̄or Hcy与共价底物s一腺苷甲硫氨酸SAM催化反应形成甲硫氨 plasma[J].Clin Chim Acta,2004,344:95. 酸与S一腺苷同型半胱氨酸SAH。SAH被SAH水解酶水解 [4]高静,董振,南,田亚平等.循环酶法测定血清同型半胱氨酸的 成腺苷和Hcy,形成的Hcy可以加入循环反应,从而放大检测 临床研究[J]中华检验医学杂志,2006,29(3):199. 信号,腺苷立即水解成次黄嘌呤和氨,次黄嘌呤在嘌呤氧化 (收稿日期:2009—12—27) 文章编号:llX)7—4287(2010)08—1326—02 扁桃体霍奇金淋巴瘤1例报告并文献复习 夏阳 ,许传杰,姚敏,高洪文 (吉林大学第二医院病理科,吉林长春130041) 霍奇金淋巴瘤(HL)几乎均发生于淋巴结,尤其多见于颈 痛,咽粘膜无充血,咽后壁无淋巴滤泡增生。初步诊断:扁桃 部淋巴结…1。原发于扁桃体的HL较为罕见,易误诊。2008 体肥大。于局麻下行双侧扁桃体剥离术。术中见双侧扁桃 年我科诊断扁桃体淋巴细胞丰富型经典型霍奇金淋巴瘤1 体大II度,双上极近中线,表面凹凸不平,质较脆。沿被膜分 例(LRCHL),现报告如下。 离暴露扁桃体、切断并取出。 1病例摘要 2病理学检查 患者女性,55岁。1月前无明显诱因出现咽部异物感, 大体表现:扁桃体两个,体积分别为3.0×2.5×2.0 crn3 有吞咽困难及咽部疼痛,在当地行全身抗感染治疗20天,无 及3.0×2.0×2.0 cm3,灰红色,质地中等,切面灰红色,未见 好转。为彻底诊治到我院就诊,门诊以“扁桃体肥大”收入 明 肿物。显微镜下表现:扁桃体正常组织结构破坏,在富 院。病程中无发热,无耳部放射痛,无听力下降及耳闷。既 于正常小淋巴细胞的背景中可见散在有较多的大肿瘤细胞, 往17年前因脾功能亢进行脾脏摘除术。3年前因子宫肌瘤 肿瘤细胞核大,核膜厚轮廓清晰,有强嗜酸性核仁,周围环绕 行子宫切除术。查体示:双侧扁桃体大II度,上极近中线,慢 有透明晕,可见有双核及多核瘤巨细胞,胞浆轻度嗜酸性至 性充血,表面呈颗粒状凹凸不平,表面清洁,无污秽苔,无触 嗜双色性。可见少数嗜中性粒细胞,无嗜酸性粒细胞及纤维 化。免疫组织化学染色示:大肿瘤细胞CD30呈强阳性(图 *通讯作者 1);PAX一5呈弱阳性(图2);CD20呈强弱不等阳性及阴性;