．１６６０． 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｃｉａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１３ Ｏｃｔ；１７（１０） 牡荆素与牡荆素鼠李糖苷大鼠在体肠吸收对比研究 王亚男。，甄毅岚 ，李晓亮 ，邵旭 ，董六一 （１．安徽医科大学药理学教研室，抗炎免疫药理学教育部重点实验室，国家中医药管理局中药药理三级实验室； ２．合肥七星医药科技有限公司，安徽合肥２３００３２） 摘要：目的通过在体单向肠灌流实验比较牡荆素及牡荆素鼠李糖苷的肠吸收机制。方法运用大鼠在体单向肠灌流模型并 采用ＨＰＬＣ测定肠灌流液中牡荆素及牡荆素鼠李糖苷的含量，计算其有效渗透系数。结果牡荆素及牡荆素鼠李糖苷浓度为 ８Ｏ ｍｇ・Ｌ 时，同一时间点同一肠段牡荆素和牡荆素鼠李糖苷之间的有效渗透系数差异无显著性（Ｐ＞０．０５），同一时间点不同 肠段（十二指肠、空肠、回肠、结肠）牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；牡荆素及牡荆素鼠李 糖苷浓度为２０、４０、８０、１６０ ｍｇ・Ｌ 时，同一时间点同一浓度牡荆素和牡荆素鼠李糖苷之间的有效渗透系数差异无显著性（Ｐ＞ ０．０５），同一时间点不同浓度牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论牡荆素及牡荆素鼠 李糖苷在肠吸收方面两者不存在明显的差异，且在十二指肠、空肠、回肠和结肠段的吸收均较差，无特殊的吸收窗；不同浓度对 牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的吸收无明显的影响。 关键词：牡荆素；牡荆素鼠李糖苷；在体单向肠灌流模型；高效液相色谱法 Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｉｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎ ｏｆ ｒａｔ ＷＡＮＧ Ｙａ－ｎａｎ ．ＺＨＥＮ Ｙｉ－ｌａｎ ．ＬＩ Ｘｉａｏ－ｌｉａｎｇ ，ｅｔ ａｌ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰｈａ￣ｏｌｏｇｙ，Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏＡｍｉ４ｎｌｆａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍ￣ｏｌｏｇｙ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｆｏ Ｅｄｕｃａｆ ｎ：Ｋｅｙ ａＬｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＣｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｅｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｓｔａｔｅ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｆｏＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｅｎｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｅｎ； ２．Ｈｅｆｅｉ Ｏｉｘｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｃｉａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ；Ｈｅｆｅｉ ２３００３２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｒｎｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｉｎ ｓｉｔｕ ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ ｐｅｒｆｕ— ｓｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｒａｔ ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｕｓｅｄ．Ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｐｅｒｆｕｓａｔｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｉｖｅ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｃｏｅｆｆｉｃｉｎｅｔｓ（Ｐ Ⅱｗｅｒｅ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｓ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ ８０ ｍｇ・Ｌ～，ｔｈｅ Ｐｏｆｆｂｅｔｗｅｅｎ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ａｎｄ ｔｈｅ Ｐ。 ｉｎ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ ｂｕｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｉｎｔｅｓｔｎｅ（ｄｕｏｄｅｎｕｍ，ｉ￣ｕｎｕｍ， ｉｌｅｕ ａｎｄ ｃｏｌｏｎ）ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），Ａｓ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ２０，４０，８０，１６０ ｍｇ‘Ｌ～，ｔｈｅ Ｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ＇ｔｉｍｅ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ａｎｄ ｔｈｅ Ｐ ｉｎ ｖｉ— ｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ ｂｕｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｄｕｏｄｅｎｕｍ，ｊｅｊｕｎｕｍ，ｉｌｅｕ ａｎｄ ｃｏｌｏｎ）ｈａｄ ｎｏ ｓｉｎｇｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ （Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ｎｏ ｓｉｎｇｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ ｉｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅ ｉｓ ｎｏｔ ａ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉｌａ ｂａｓｏｒｐｔｉｏｎ ｚｏｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｆｏｒ ｖｉｔｅｘｉｎ ａｎｄ ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ，ａｎｄ ｂｏｔｈ ｏｆ ｔｈｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｂａｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｄｕｏｄｅｎｕｍ，ｊｅｊｕ－ ｎｕｍ，ｉｌｅｕ ａｎｄ ｃｏｌｏｎ ｗｅｒｅ ｐｏｏｒ．Ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｍ ｈａｓ ｎｏ ｏｂｖｉｏｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｆｏｒ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｖｉｔｅｘｉｎ；ｒｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ；ｉｎ ｓｉｔｕ ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ；ＨＰＬＣ 山楂叶总黄酮是从花期山楂的叶子中提取的黄酮类化合 司，纯度９９．７％）；牡荆素鼠李糖苷样品（合肥七星医药科技 物的总称，其对心血管疾病有明显的确切疗效” 。而牡荆素 有限公司，纯度：８５．１％）。牡荆素鼠李糖苷对照品（中国药 （ｖｉｔｅｘｉｎ，ＶＴ）及牡荆素鼠李糖苷（ｈａｍｎｏｓｙｌｖｉｔｅｘｉｎ，ＲＨＶ）是从 品生物制品检定所）；酚红（天津市凯通化学试剂有限公司）； 山楂叶总黄酮中分离出的有效单体 。本课题组前期研究 酚红对照品（中国药品生物制品检定所）；ｐＨ７．４空白灌流液 发现牡荆素对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用和改善 （自配，组成如下：ＮａＣ１ ４８ ｍｍｏｌ・Ｌ一，ＫＣ１ ５．４ ｍｍｏｌ・Ｌ～， 心脏血流动力学，降低心肌耗氧量，增加心肌供血供氧等作 Ｎａ：ＨＰＯ４２．８ ｍｍｏｌ・Ｌ～，Ｎａｌｉ２ＰＯ４４ ｍｍｏｌ・Ｌ‘。，Ｄ＿葡萄糖１ ｇ 用［４－７］。已知牡荆素鼠李糖苷的肠吸收较差，而有关牡荆素及 ・Ｌ ）；空白肠灌流液（自制，取保持在３７￣Ｃ的ｐＨ７．４空白 牡荆素鼠李糖苷对比的肠吸收实验国内外尚未见报道。为 灌流液，进行大鼠在体灌流，灌流９０ ｒａｉｎ后，取出肠灌流液， 此，本实验采用大鼠在体单向肠灌流模型，研究牡荆素及牡荆 素鼠李糖苷在大鼠不同肠段、不同浓度的吸收情况，通过比较 即得空白肠灌流液）；四氢呋喃，甲醇，乙腈，均为色谱纯；其 两者的吸收差异，从而为牡荆素的剂型研究提供理论基础和 他试剂均为分析纯。 实验依据。 １．２仪器ＬＣ一１０ＡＤ高效液相色谱仪：ＳＰＤ—ＭＩＯＡ二极管阵 １实验材料 列检测器，ＳＩＬ－１０Ａ自动进样，ＬＣ ｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站；ＡＢ１３５－ １．１药品与试剂 牡荆素样品（合肥七星医药科技有限公 Ｓ电子天平（十万分之一）；ＡＤＶＥＮＴＵＲＥＲ（ＡＲ１１４０）电子天 司，纯度：９９．５％）；牡荆素对照品（合肥七星医药科技有限公 平（万分之一）；酸度计ＰＨＳ－３Ｃ（上海虹益仪器仪表有限公 司）；ＢＴＩＯＯＮ型蠕动泵（保定申辰泵业有限公司）；ＴＧＬ一１８５ 基金项目：安徽省２０１０年长三角科技联合攻关项目（Ｎｏ １０１４０７０２０２０） 台式高速冷冻离心机。 通信作者：董六一，男，博士，副教授，研究方向：心脑血管药理学，Ｅ— １．３动物Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ｓＤ）大鼠，ＳＰＦ级，雌雄兼用，体重 ｍａｉｌ：ｄｏｎｇｌｙ０６１＠１６３．ｃｏｒｎ 在２３０￣２５０ ｇ，安徽医科大学省级实验动物中心提供，生产许可 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１３ Ｏｃｔ；１７（１０） ・１６６１・ 证号：ＳＣＸＫ（皖）２０１１—００２。饲养室温度许可范围：（２２±３）℃， 牡荆素、牡荆素鼠李糖苷和酚红溶液，置３７￣Ｃ水浴中孵育，分 饲养室湿度许可范围：４ｏ％一７０％，照明周期：１２ ｈ Ｉ￣ｔ］／１２ ｈ暗。 ２实验方法 别于０、３、６、９、１２ ｈ考察样品溶液的稳定性。结果表明１２ ｈ 内牡荆素、牡荆素鼠李糖苷和酚红在空白肠灌流液中稳定，牡 ２．１灌流液中牡荆素及牡荆素鼠李糖苷含量测定方法的建立 ２．１．１牡荆素、牡荆素鼠李糖苷及酚红检测波长的确定采 荆素、牡荆素鼠李糖苷高、中、低浓度的ＲＳＤ分别为０．８６％， ０．９８％，０．４３％和１．０９％，０．５９％，１．０８％；酚红高、中、低浓度 的ＲＳＤ为０．７８％，０．５２％，０．５０％。 ２．２单向灌流实验 用ＳＰＤ－Ｍ１０Ａ二极管阵列检测器检测牡荆素、牡荆素鼠李糖 苷和酚红对照品溶液，得到三者依次在３３８．６７、３３９．８１和 ４２９．３６ ｎｍ波长处有最大吸收，由此确定牡荆素、牡荆素鼠李 糖苷和酚红的检测波长分别为３４０、３４０和４３０ ａｍ。 ２．１．２色谱条件色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ－Ｃ ８（４．６ ｍｍ×１５０ ｍｍ， ５ ｍ）硅胶键合相色谱柱，流动相为Ａ（四氢呋喃一甲醇一乙 腈一冰醋酸，１７：３：３：４）：Ｂ（水）＝２２：７８，牡荆素和牡荆素鼠 ２．２．１ 实验操作 驯 实验操作前先连接好灌流装置，将硅 胶管装入蠕动泵，用样品灌流液以０．２ ｍＬ・ｒａｉｎ 的流速饱 和管道，将管道冲洗至收集液浓度与样品溶液浓度相等，以消 除实验中管道对样品溶液吸附的影响 …。 取实验前禁食过夜（自由饮水）的ｓＤ大鼠，腹腔注射 １０％水合氯醛（０．３５ ｍＬ／ｌＯ０ ｇ）麻醉，固定，灯光照射使大鼠 李糖苷的检测波长均为３４０ ｎｍ，酚红的检测波长为４３０ ｎｍ， 柱温为２５℃，进样量为２０ Ｌ。 体温保持在３７￣Ｃ。沿腹中线打开腹腔，开口约３ ｃｍ，小心分 离出待考察肠段，每段均取约１０ １３ｍ，将肠段两端插管，结扎 固定。该肠段首先用３７℃空白灌流液１０ ｍＬ冲洗，用空气将 ２．１．３方法专属性分别取空白肠灌流液、ＶＴ及ＲＨＶ对照 品溶液、ＶＴ及ＲＨＶ样品溶液在２．１．２色谱条件下测定。结 果两样品溶液主峰保留时间分别与其对照品溶液一致，即空 白肠灌流液的内源性成分对ＶＴ及ＲＨＶ的检测无干扰。 ２．１．４标准曲线的制备用ｐＨ７．４的空白灌流液稀释精密 称取的一定量的牡荆素、牡荆素鼠李糖苷和酚红对照品并定 空白灌流液排净，再取保持在３７￣Ｃ的供试药液，以１．０ ｍＬ・ ｍｉｎ 的流速快速灌流２ ｒａｉｎ，再以０．２ ｍＬ・ｍｉｎ 的流速灌 流３０ ｍｉｎ，此后每１０ ｒａｉｎ连续收集一次肠灌流液，直至９０ ｍｉｎ，收集结束后，将大鼠处死，剪下所灌流的肠段，测量其长 度（Ｌ）和半径（ｒ）。将收集的待测样品于一２０℃冷冻贮存，测 定时将样品融化，混匀，以１０ ０００ ｒ・ｒａｉｎ。。离心１０ ｒａｉｎ后进 样，测定样品中牡荆素及牡荆素鼠李糖苷的浓度。 ２．２．２牡荆素及牡荆素鼠李糖苷在不同肠段的吸收将浓 度均为８０ ｍｇ・Ｌ 的牡荆素及牡荆素鼠李糖苷供试药液分 别在十二指肠、空肠、回肠、结肠段按“２．２．１”项下方法进行 容，得到０．８ ｇ・Ｌ 的对照品储备液。再用空白肠灌流液稀 释一系列浓度的牡荆素（１８．１００、３６．２００、７２．４００、１０８．６００、 １４４．８００、１８１．０００ ｍｇ・Ｌ ）、牡荆素鼠李糖苷（２０．８２０、 ４１．６４０、８３．２８０、１２４．９２０、１６６．５６０、２０８．２００ ｍｇ・Ｌ ）和酚红 （５．１８３、１０．３６５、２０．７３０、３１．０９５、４１．４６０、５１．８２５ ｍｇ・Ｌ ）对 照品溶液。按“２．１．２”项方法操作，进样量２０ ，以对照品 溶液的浓度Ｃ为横坐标，测得的峰面积Ａ为纵坐标绘制标准 曲线，得牡荆素的标准曲线：Ａ＝４８６１２Ｃ＋１２４０．４（ｒ＝ ０．９９９５），牡荆素鼠李糖苷的标准曲线：Ａ＝３３０３３Ｃ一２１０４２（ｒ ＝０．９９９８），酚红的标准曲线：Ａ＝６６６６８Ｃ一７１２３．３（ｒ＝ 大鼠在体单向灌流试验，十二指肠段自幽门１ ｃｍ处开始，空 肠段离幽门１５ ｃｍ处开始，回肠段自盲肠上行２０ ｃｍ处开始， 结肠段为紧邻盲肠至直肠，每段均取约１０ ｃｍ进行两端插管 灌流，每组６只大鼠。 ０．９９９７）。牡荆素在浓度１８．１００—１８１．０００ ｍｇ・Ｌ 范围内线 性关系良好，牡荆素鼠李糖苷在浓度２０．８２０～２０８．２００ ｍｇ・ Ｌ 范围内线性关系良好，酚红在浓度５．１８３～５１．８２５ ｍｇ・ Ｌ 范围内线性关系良好。 ２．２．３牡荆素及牡荆素鼠李糖苷不同浓度下的吸收分别 选用浓度为２Ｏ、４Ｏ、８０、１６０ ｍｇ・Ｌ 的牡荆素和牡荆素鼠李糖 苷供试药液，按“２．２．１”项下方法进行空肠段单向灌流试验。 每组６只大鼠。 ２．３数据分析在体大鼠单向灌流试验中所测得的出口处 ２．１．５精密度实验分别取高、中、低三个浓度组的牡荆素、 牡荆素鼠李糖苷和酚红对照品溶液，进行日内、日间精密度测 定。于一１３内不同时间测定同一样品５次得日内精密度；连续 测定４天，计算得日间精密度。结果如下：牡荆素高、中、低３ 浓度的１３内、日间精密度ＲＳＤ分别为０．５５％，０．９２％，１．１３％ 和１．２５％，１．３８％，１．４５％；牡荆素鼠李糖苷高、中、低３浓度的 日内、日间精密度ＲＳＤ分别为０．９７％，０．３９％，０．３３％和 的供试液浓度用公式（１）校正，供试液的有效渗透系数用公 式（２）计算。 Ｃ。 。。 。 ｅｄ）＝Ｃ ‘ＰＲｉ ／ＰＲ。 （１） Ｐ ＝Ｑｉ Ｉｎ（Ｃｉ ／Ｃｏ．ｔ（ｏ一 ｄ））／２￣ｒｒＬ （２） 式中ｃ （。一 ）和ｃ 分别为出Ｉ＝Ｉ处经校正后的供试液浓度 和实际测得的供试液的浓度，ＰＲ ＰＲｍｎ分别为入口处和出口处 酚红的浓度， 为有效渗透系数，Ｑ 为灌流速度，Ｃ 为灌流液中 供试液的质量浓度，ｒ、Ｌ分别为灌流肠段的半径和长度。 计算所得数据采用ＳＰＳＳ１５．０软件进行统计分析，首先采 用单因素方差分析进行多组间定量资料的比较，然后采用 ＬＳＤ方法进行组间的两两比较，以Ｐ＜０．０５具有统计学意义。 ３结果 ０．９８％、０．８２％，０．８９％；酚红高、中、低３浓度的日内、日间精密 度ＲＳＤ分另０为：０．８１％，０．５３％，２．１１％和１．９３％，０．９１％， １．４６％，其结果表明该法准确可靠、精密度良好。 ２．１．６回收率试验分别配制高、中、低三个浓度组的牡荆 素、牡荆素鼠李糖苷、和酚红对照品溶液，在２．１．２色谱条件 下进行ＨＰＬＣ测定得回收率。牡荆素高、中、低３浓度的平均 回收率为：９９．２２％，１００．１６％和９９．７５％（ｎ＝５）；牡荆素鼠李 糖苷高、中、低３浓度的平均回收率为９９．４４％，９９．６８％和 ３．１牡荆素及牡荆素鼠李糖苷在不同肠段的吸收在同一 浓度不同肠段不同时间点测得的牡荆素（ＶＴ）及牡荆素鼠李 １００．０６％（ｎ＝５）；酚红高、中、低３浓度的平均回收率为： １００．３７％，１００．２２％和９９．７３％（ｎ＝５）。、 糖苷（ＲＨＶ）的有效渗透系数见表Ｉ。经单因素方差分析及 ＬＳＤ法的组间两两比较，可知同一时间点同一肠段牡荆素和 牡荆素鼠李糖苷之间的有效渗透系数差异无显著性（Ｐ＞ ２．１．７稳定性试验取用空白灌流液配制高、中、低浓度的 ・１６６２・ 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１３ Ｏｃｔ；１７（１Ｏ） ０．０５），同一时间点不同肠段（十二指肠、空肠、回肠、结肠）牡 荆素和牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均差异无显著性（Ｐ ＞０．０５），说明牡荆素及牡荆素鼠李糖苷两者在肠吸收方面不 存在明显的差异，且在十二指肠、空肠、回肠和结肠段的吸收 均较差，无特殊的吸收窗，因此，我们选择在空肠段灌流来研 究不同浓度条件下牡荆素及牡荆素鼠李糖苷的吸收情况。 表１不同肠段及不同时间点ＷＩ＂、ＲＩ－ＩＶ的有效渗透系数（ ±。， ：６） 注：与ＲＨＶ组比较，Ｐ＞Ｏ．０５。 ３．２牡荆素及牡荆素鼠李糖苷在不同浓度条件下的吸收 李糖苷的肠吸收不存在明显的差异及自身的浓度抑制作用。 ４讨论 在同一肠段不同浓度不同时间点测得的牡荆素（Ⅵ ）及牡荆素 鼠李糖苷（ＲＨＶ）的有效渗透系数见表２。经单因素方差分析 及ＬＳＤ法的组间两两比较，可知同一时间点同一浓度牡荆素 和牡荆素鼠李糖苷之间的有效渗透系数差异无显著性（Ｐ＞ ０．０５），同一时间点不同浓度牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的有效 渗透系数均差异无显著性（Ｐ＞０．０５），说明牡荆素和牡荆素鼠 大鼠在体肠灌流法具有使用简单、准确性较高、测得的指 标较接近体内的真实吸收情况等优点而被广泛采用 。在 运用此法研究药物的肠吸收机制时，小肠不仅对药物有吸收， 也吸收和分泌水分，使灌流液的体积发生变化，可通过酚红法 校正 ，且实验中采用了较低的灌流速度和较短的灌流时 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１３ Ｏｃｔ；１７（１０） ．１６６３． 干燥方式对大血藤提取物粉体学性质的影响 储晓琴 ，桂双英 ，梁媛 ２３００３１） （１．安徽中医药大学；２．现代中药安徽省重点实验室，安徽合肥摘要：目的考察不同干燥方式对大血藤提取物的粉体学性质的影响，并初步筛选适宜的粉体表面改性剂。方法考察了真空 喷雾干 干燥、喷雾干燥两种方法对大血藤提取物的粉体学性质的影响，并通过粉体表面改性技术，初步筛选了改性剂。结果燥法所制的大血藤浸膏粉粒径小而均匀，圆整性好，吸湿性及流动性略逊于真空干燥制品，大血藤浸膏粉经过微晶纤维素改性 后流动性、吸湿性及成形性得到明显改善。结论干燥方式的不同导致了干燥产物粉体学性质的差异，通过粉体表面改性技术 可以改善中药提取物的粉体学性质。 关键词：大血藤；粉体学；真空干燥；喷雾干燥；粉体表面改性技术 Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｒｙｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｎ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘａ ｃｕｎｅａｔａ ｅｘｔｒａｃｔ ＣＨｕ Ｘｉａｏ－ｑｉｎｌ１ ．ＧＵＩ Ｓｈｕａｎｇ．ｙｉｎｇ１． （１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ａｎｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｅｎ； ２．Ａｎｈｕｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏＭｏｄｅｒｎ Ｃｈｉｅｎｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｆｅｉ，Ａｎｈｕｉ ２３００３１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｒｙｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｎ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘａ ｃｕｎｅａｔａ ｅｘｔｒａｃｔ，ａｎｄ ｔｏ ｉｆｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｖａｃｕｕｍ ｄｒｙｉｎｇ ａｎｄ ｓｐｒａｙ ｄｒｙｉｎｇ ｏｎ Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘａ ｃｕｎｅａｔａ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｐｏｗｄｅｒ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｏｄｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｒｅ－ ｓｔｉｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｓｐｒａｙ ｄｒｙｉｎｇ ｗａｓ ｓｍａｌｌｅｒ，ｍｏｒｅ ｕｎｉｆｏｒｍ ａｎｄ ｓｈｏｗｅｄ ｇｏｏｄ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｓｐｈｅｒｉｃｉｔｙ，ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｌｏｗａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｉｔ ｗａｓ ｓｌｉｇｈｔｌｙ ｗｏｒｓｅ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｖａｃｕｕｍ ｄｒｙｉｎｇ．Ｔｈｅ ｆｌｏｗａｂｉｌｉｔｙ，ｍｏｉｓｔｕｒｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｍｐａｃｔ－ ｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘａ ｃｕｎｅａｔａ ｅｘｔｒａｃｔ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｂｙ ＭＣＣ ｗｅｒｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｄｒｙｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｈａｖｅ ｌｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄｒｙ ｐｒｏｄｕｃｔ．Ｔｈｅ ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｈｅｒｂａｌ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｂｙ ｐｏｗｄｅｒ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｏｄｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘａ ｃｕｎｅａｔａ；ｐｏｗｄｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ；ｖａｃｕｕｍ ｄｒｙｉｎｇ；ｓｐｒａｙ ｄｒｙｉｎｇ；ｐｏｗｄｅｒ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｏｄｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ 基金项目：安徽省科技攻关项目（Ｎｏ １２０１０４０２０８４）；安徽省高等学校省级自然科学研究项目（Ｎｏ ＫＪ２０１３Ｚ１８１） 通信作者：桂双英，女，博士，教授，研究方向：中药新制剂与新剂型，Ｅ・ｍａｉｌ：ｇｕｉｓ［ ｙＯ５２Ｏ＠１２６．ｔｏｍ 间，减小了灌流过程中对肠壁的损伤及避免了酚红被吸收，使 参考文献： 酚红可以很好的起到标示体积的作用。 ［１］ 于栋华，包顺茹，于纯淼，等．山楂叶总黄酮药理作用研究进展 若灌流装置中的硅胶管对药物有一定的吸附性，将导致 ［Ｊ］．辽宁中医药大学学报，２０１３，１５（３）：１７４—１７７． 实验结果的不准确。因此，在实验前预先将供试液通入硅胶 ［２］ 闫列娟，肖斌，肖 霄，等．山楂叶的药用保健作用与加工利 用［Ｊ］．安徽农业科学，２０１２，４０（７）：４０５３—４０５４，４０５７． 管一定时间，通过比较收集液浓度与供试液浓度大小，判断硅 ［３］王领弟，李艳荣，潘海峰，等．山楂叶的研究近况［Ｊ］．承德医学 胶管被饱和的程度，当二者浓度相等时，则说明硅胶管已被饱 院学报，２０１１，２８（３）：３１３—３１５． ［４］ 董六一，邵旭，江勤，等．牡荆素对大鼠实验性心肌缺血损 和，可以开始进行肠灌流实验。实验中的空白灌流液应为澄 伤的保护作用及其机制［Ｊ］．中草药，２０１１，４２（７）：１３７８—１３８３． 清溶液，且在实验操作过程中应尽量避免对肠系膜的牵拉，减 ［５］ 董六一，范一菲，邵旭，等．牡荆素对大鼠心肌缺血再灌注损 伤诱导细胞凋亡的影响［Ｊ］．中成药，２０１１，３３（６）：１０４１—１０４４： 小刺激，灌流开始前用保持在３７￣Ｃ的生理盐水冲洗肠段，灌 ［６］Ｄ ｕｎｇ ＬＹ，Ｃｈｅｎ ＺＷ，Ｇｕｏ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｖｉｔｅｘｉｎ ｐｒｅｃｏｎｄｉ－ 流过程中用浸有生理盐水的纱布覆盖肠段以避免肠坏死。 ｔｉｏｎｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｎｅｏｎａｔａｌ ｒａｔ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ｗｉｔｈ ａｎｏｘｉａ ａｎｄ ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ，２００８，３６（２）：３８５—３９７． 在体单向灌流实验的结果表明：牡荆素和牡荆素鼠李糖苷 ［７］Ｄａｎｇ ＬＹ，Ｆａｎ ＹＦ，Ｓｈａｏ Ｘ，ｅｔ ａ１．Ｖｉｔｅｘｉｎ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｍｙｏｃａｒｄｉｌａ 浓度在加一１６０ ｍｇ・Ｌ 药物吸收不存在自身浓度抑制作用， ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ－ｐｅｒｆｕｓｅｄ ｒａｔ ｈｅａｒｔｓ ｂｙ ａｔ— 即不存在饱和性，在肠黏膜的转运是被动扩散过程，无特殊的 ｔｅｎｕａｔｉｎｇ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ Ｔｏｘｉ－ ｃｏｌ，２０１１，４９（１２）：３２１１—３２１６． 吸收窗。已有文献报道可将化合物的吸收性能分为三类 ， ［８］Ｚｈｏｕ Ｗ，Ｄｉ ＬＱ，Ｗａｎｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｒｓｙｔｈｏｓｉｄｅ Ａ 当化合物在大鼠的平均有效渗透系数Ｐ 小于０．０３×１０ ａｍ ｉｎ ｉｎ ｓｉｔａ ｓｉｎｇｌｅ—ｐａｓｓ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｃａｃｏ一２ ｃｅｌｌ ｍｏｄｅｌｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｉｎ，２０１２，３３（８）：１０６９—１０７９． ・ｓ 和大于０．２×１０～ａｍ・ｓ 时，可以预测化合物在人体内 ［９］崔升淼，赵春顺．３一正丁基苯酞大鼠在体肠吸收动力学［Ｊ］．中 分别为吸收差和吸收完全，介于两者之间吸收较差。本实验研 国实验方剂学杂志，２０１３，１９（９）：１６９—１７２． 究结果表明，牡荆素和牡荆素鼠李糖苷同一浓度在不同肠段和 ［１Ｏ］曹颖，李永吉，吕邵娃，等．丁香苦苷大鼠在体肠吸收动力学 研究［Ｊ］．中国中药杂志，２０１２；３７（１Ｏ）：１４８７—１４９０． 不同浓度在空肠肠段的平均有效有效渗透系数Ｐ 小于０．０３× ［１１］张燕娜，王淼，刘梅．在体肠灌流模型在中药研究中的应用 １０～ａｍ・ｓ 或介于０．０３×１０一ｃｍ・ｓ 与０．２×１０～ｃｍ・ｓ ［Ｊ］．现代中药研究与实践，２０１２，２６（５）：７６＂７９． ［１２］贾元威，谢海棠，沈杰，等．大鼠在体肠灌流模型对豆腐果苷在体 之间，提示牡荆素和牡荆素鼠李糖苷在肠道的吸收为差和较 吸收的初步研究［Ｊ］．安徽医药，２０１１，１５（１１）：１３４１—１３４３． 差，因此，该品种在临床剂型上可考虑制成注射剂。 ［１３］张晓雷，周明眉，贾伟，等．在体肠灌流模型及其在中药研究 中的应用［Ｊ］．上海中医药大学学报，２０１０，２４（３）：８７—９２． （收稿日期：２０１３—０５—０７，修回日期：２０１３—０６—０４）
