北方药学２０１４年第１１卷第２期 ５９ 白芍中芍药苷的提取工艺 李兰城（内蒙古医科大学呼和浩特０１００５９） 摘要：目的：以渗漉法研究白芍中芍药苷的提取工艺。方法：采用正交试验设计，以芍药苷为指标，用高效液相色谱法进行分析测 定，系统考察不同浓度溶剂、不同浸渍时间、不同渗漉体积对芍药苷提取率的影响。结果：由正交实验得出，浸渍２４小时用ｌ５倍 体积７０％的乙醇渗漉提取可以获得较高的芍药苷提取率。结论：浸渍时间和溶剂浓度对白芍中芍药苷的提取率有较大影 向，而 当渗漉体积增加到一定程度时对芍药苷的提取率影响变小。 关键词：白芍芍药苷ＨＰＬＣ法渗漉提取 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１ ６７２—８３５１（２０１ ４ Ｊ０２—００５９—０２ 白芍为毛莨科植物芍药Ｐａｅｏｎｉａ ｌａｃｔｉｌｆｏｒａ Ｐａｌ１．的干燥根ｌｌｌ。 ｒＡ ／：蕊 丽 ～ｒ 其主要成分芍药苷是蒎烷单萜苷类化合物，具有平肝止痛、养 血调经、敛阴止汗、抗菌和抗血小板凝集等功效Ｉ２］，用于治疗头 痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛、血虚萎黄、月经不调、自汗、盗 汗。现代药理实验表明，它具有双向的免疫调节作用，可使异 常的免疫功能恢复正常为深入研究其药用价值，提高其提取 Ｔ艺的科学性和合理性，有文献报道用不同浓度的乙醇、正丁 ０．０ ２５ ５．０ ７．５ １ａ０ １２．５ １５．０ １７．５ ｒｄｎ 醇和甲醇 对白芍药材中的芍药苷进行提取，也有文献报道 对照品色谱图 用超声提取法提取白芍药材中的芍药苷，还有文献报道用水 提取白芍药材中的芍药苷Ｉ９１。本实验经过对上述文献的认真研 究对比推敲，并结合Ｔ厂实际生产需要，采用渗漉法用不同浓 度的乙醇作溶剂，以白芍中芍药苷的含量为指标，采用正交试 验优选其最佳提取Ｔ艺，为生产提供科学依据。 仰Ｊ丽咄厩 １仪器与试药 浸渍装置（烧杯５００ｍ１）、渗漉提取装置（中药多功能渗漉 器、提取液收集器）、浓缩装置（中药浓缩机１７０Ｂ，湖北立能）； 日本岛津ＬＣ—ＩＯＡＴＶＰ高效液相色谱仪，ＳＰＤ一１０ＡＶＰ检测器， ＣＤＭ一１０ＡＶＰ色谱工作站。白芍药材（产地安徽，含量１．６％，符 ∞ ２５ ∞ ７５ １∞ １２５ １５０ １ ５ 合药典规定）；芍药苷对照品（批号１１０７３６—２００６３０，来自中国 供试品色谱图 药品生物制品检定所）；乙腈（色谱纯）；磷酸（０．１％）；无水乙醇 （分析纯）。 ２方法与结果 分别称取干燥白芍药材２００ｇ，在平行操作条件下，按下述 因素水平表和正交试验表进行浸渍、渗漉、浓缩并定容至 芍药苷转移率＝鬟糟车等舅暮暮｛ｌ ；｝暑著× ００％ ５００ｍｌ，备用。 ２．５方法：按照２项下的实验过程，以乙醇为溶剂，按ｋ（３４）正 ２．１正交试验：以影响白芍中芍药苷提取物收率的浸渍时间（因 交表进行渗漉提取，提取液适当浓缩，定容至５００ｍｌ量瓶中， 素Ａ）、溶剂浓度（因素Ｂ）、溶剂体积（因素Ｃ）为考察因素，以 摇匀，备用。芍药苷按“２．４”项下测定。实验数据见表２。 芍药苷的含量为指标，依次进行试验，因素水平见表１。 将正交试验结果（表２）进行方差分析，结果见表３。 表１因素水平表 丁是 ～● 表３方差分析结果表 ２．２色谱条件：色谱柱：ｋｒｏｍａｓｉｌ（２５０ｍｍｘ４．６ｒａｍ，５ｕ１）；流动相： 乙腈一磷酸（１４：８６）；检测波长：２３０ｎｍ；流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ；柱温： ２．６各因素对提取效果的影响 ３５℃；进样量：２０ ｌ。 ２．６．１浸渍时问对提取效果的影响：浸渍时间对提取效果有显著 ２．３溶液制备 的影响。浸渍时间不够，固液接触不充分，提取效果不好，浸渍 ２．３．１对照品溶液的制备：取在五氧化二磷减压干燥器中干燥 时间过长提取含量基本不变，所以确定浸渍时间为２４小时。 ３６小时的芍药苷对照品约１．６ｍｇ，精密称定，置２５ｍｌ量瓶中， ２．６．２乙醇浓度对提取效果的影响：当乙醇浓度偏低时，一些亲 用甲醇溶解稀释定容至刻度，摇匀，制成每ｌｍｌ含０．０６４ｍｇ的 水性的蛋白质、黏液质、果胶、淀粉和部分多糖及其他水溶性 溶液，即得对照品溶液。 杂质会溶于杂质中，给后续的操作带来困难。而乙醇浓度太 ２．３．２供试品溶液的制备：分别精密吸取定容后的白芍提取液 高，可使植物细胞蛋白质很快凝同，妨碍乙醇向植物细胞内部 ５ｍｌ置ｌＯＯｍｌ量瓶中，用稀乙醇定容至刻度，再精密吸取ｌｍｌ 渗透，从而影响浸出。所以确定乙醇浓度为７０％。 置ｌＯｍｌ量瓶中，同样用稀乙醇定容，摇匀，即得供试品溶液。 ２．６－３固液比对提取效果的影响：在提取实验中，一般随溶剂用 ２．４测定法：精密吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相 量的增加，提取效果会较好。但是，乙醇用量越大，回收乙醇所 色谱仪测定，即可。 需的时问越长，耗能越高，增加了提取成本。在实验和工业生 转移率：根据白芍药材中芍药苷含量和成品得率，计算样 产中，一般只要能达到一定的提取程度，就不必增加溶剂用 品芍药苷转移率，结果如下： 量。所以从提取效果、减小溶剂用量和降低浓缩负荷三方面综 北方药学２０１４年第１ｌ卷第２期 表２正交试验结果 ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ 因素 含量 试验号 Ａ ●●●均均均 转移率 药苷的较佳提取方案为：用１５倍量７０％乙醇作为提取溶剂， 浸渍２４小时后渗漉，收集提取液浓缩定容测定含量。白芍中 芍药苷的含量为１．３２％。 ４讨论 Ｂ Ｃ （％） 五ｌ 值值值 （％） ７２ ２ ， ２ ２ ３ ３ ３ ４８ 』ｌ 卫１ ２ ｌ ６ ０ ４ 《中国药典｝２０１０年版一部规定白芍含量的测定方法用 ＨＰＬＣ法，测定指标为芍药苷＿ｌｌ，并规定白芍干燥品含芍药苷不 得少于１．６％，在正交试验前已对试验药材进行过检测，符合药 典规定。 试验采取高效液相色谱法对提取液中芍药苷的含量进行 。２ ３。２ ３ ２ ３ ３ ３ ３ ｊ ∞ ３ ３ ３ ｌ ｌ ｌ ２ ３ ２ ３ ３ ２舶 测定，灵敏度高，操作简单。以正交试验为研究方法，确定了芍 药苷的最佳提取方案，为白芍中芍药苷的渗漉提取提供了科 学的依据。 参考文献 【１］国家药典委员会．中国药典ＩＳ］．２０１０年版，第一部，６８． ［２］袁昌齐．天然药物资源开发利用【Ｍ］．南京：江苏科学技术出版 社．２０００：１０３—１０４． ∞ 卫 ＂ Ｋｌ２ Ｋ丑 Ｋ弛 Ｒ ｌ２．１１ １３．６７ １２．１１ 昭 ｆ３］柳俊．近红外光谱分析技术在白芍中药配方颗粒制备过程中 的应用研究ＩＪ］．中国现代应用药学，２０１２，４（２１）：１７９—１８０． ［４］吴英华，任凤莲，肖劲，陈胜福．白芍中芍药苷的提取工艺研 究【ＪＪ．应用４Ｌ＿ｖ．－，２００７，３６（７）：６５１—６５２． ［５】刘芳，杨广德．白芍中芍药苷的提取方法研究 中成药， ２００３，２５（１０）：７９２—７９５． １３ ０３ １３．８４ １．７３ １２＿２５ １４．０６ １．８１ １３．７６ １３．１Ｏ １．６５ 【６】李钐，王亚楠，刘小宇，等．白芍总苷提取和纯化工艺的研究 ｌＪ］．食品科学，２００７，２８（５）：１７３—１７６． 合考虑，确定固液比为１：１５。 ３结论 【７］高秀强，刘敏彦，宋剑，等．白芍中芍药总苷提取工艺研究【Ｊ］． 中国药业，２００８，１７（１５）：５５—５７． 【８】贲永光，李坤平，李康，孔繁晟．正交设计白芍总苷的超声提 以芍药苷含量（％）为考察指标，用渗漉法提取，以影响白 取工艺ｆＪ］．食品与生物技术学报，２００９，２８（４）：５０１—５０４． 芍中芍药苷提取物收率的浸渍时间（因素Ａ）、溶剂浓度（因素 『９］柳俊，张建军．Ｂｏｘ—Ｂｅｈｎｋｅｎ效应面法优化白芍配方颗粒提取 Ｂ）、溶剂体积（因素ｃ）为考察因素做正交实验，得出白芍中芍 工艺ｌＪ１．中国实验方剂学杂志，２０１１，５（１）：５０２—５０３． （上接１３６页） １８４８６例患者具备抗菌药物使用的指征。 头孢一、二代药物治疗即可达到效果，没有必要采用头孢三、 四代药物，以免增加患者的经济负担，使得患者无法承受而拒 绝治疗，增加了患者的痛苦。 ３．３联合用药顺序不合理：一些患者发生细菌感染时，一些医 护人员通常使用联合用药，但是用药的顺序不合理。头孢类药 物应用于细菌繁殖期可以有效杀死各类细菌，一些大环内酯 类药物则属于快速抑菌类药物，二者连用将无法有效发挥作 用，因此，细菌繁殖期应先使用抗菌药物进行治疗，待过３～４ 个半衰期后，可以使用元抑菌药。 ３．４用药剂量过度和集中：经过分析，我院还存在抗菌药物使 用剂量过度和集中的问题，尤其是Ｂ一内酰胺类＋酶抑制剂的 使用比例较２０１１和２０１２年有大幅增加，相关部门应及时采 取措施，加强宣传培训，严格限制头孢菌素类（尤其是三代头 孢）、Ｂ一内酰胺类＋酶抑制剂、硝基咪唑类和氨曲南等抗菌药物 ２．２抗菌药物的应用统计：在３６３７８张处方中，应用抗菌药物 的临床应用。 的处方为５２７５张，占比为１４．５％，符合卫生部规定（卫生部规 ３．５疗程使用过长：目前，抗菌药物临床应用过程中具有很 定普通门诊处方抗菌药物比例≤２０％；急诊处方≤３０％，我院 好的治疗效果，导致部分医护人员为患者使用抗菌药物时 该项指标已达到卫生部要求），抗菌药物平均应用金额为 疗程使用过长，导致患者发生细菌耐药性，给患者造成潜在 ８５．４３元，详细数据见表１。 的危害，因此，需要医院及相关部门及时采取措施，规范抗 ３讨论 菌药物使用剂量和时间，加强宣传培训，严格限制使用抗菌 ３．１给药频次不合理：医院使用抗菌药物治疗过程中，给药频 药物。 次不合理，比如在使用Ｂ一内酰胺类抗菌药物治疗过程中，由 参考文献 于该药物属于时间依赖型，其每一次给予很小的剂量，缩短给 『１１潘洁，彭晓燕，王远光，等．２００８年我院住院患者合理用药调 药间隔时间，但是，当患者血药浓度超过ＭＩＣ的４～５倍时，持 查分析ｌＪ］．中国药业，２０１０（６）． 续给药将会导致患者发生不良反应，因此，应该间隔３－４个半 【２］何爱娇，郑春茂．７４０份外科病历抗茵药物应用调查与分析 衰期后再次为患者给药。 ］．医学信息（中旬干０），２０１０（５）． ３２抗菌药物选择较贵，增加患者经济负担：一些患者属于轻 『３１彭翠英，何周康，尤灿．我院住院惠者抗菌药物 临床应用调查 微的外伤，因此在为患者治疗的过程中，可以使用价格低廉的 分析ｍ．儿科药学杂志，２０１０（１）． 表１抗菌药物使用金额分析
