消瘤汤联合腹腔热灌注化疗干预结直肠癌术后免疫功能和VEGF蛋白表达的影响研究_曾家耀

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消瘤汤联合腹腔热灌注化疗干预结直肠癌术后免疫功能和VEGF蛋白表达的影响研究121

曾家耀，陈明科，江现强

(1.广西中医学院第一附属医院胃肠腺体外科，广西南宁530023;2.广西中医学院2009级研究生，广西南宁530023)摘要:目的:探讨消瘤汤联合腹腔热灌注化疗对术后结直癌患者免疫功能和血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白

表达的影响。方法:104例行手术治疗的进展期结直肠癌患者，按随机数字表分为治疗组和对照组，治疗组54例，采用腹腔热灌注化疗同时口服消瘤汤，对照组50例，单用腹腔热灌注化疗方案进行治疗，观察两组生存质量、免疫功能、化疗药物不良反应、血清血管内皮生长因子水平(VEGF)变化及VEGF蛋白表达情况。结果:治疗组生存质量的改善明显优于对照组(P＜0.05);治疗组中性粒细胞减少、腹泻程度、神经毒性等与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。治疗组治疗

++

前CD4/CD8为(1.32±0.28)%，治疗后提高至(1.58±0.27)%，差异有显著性(P＜0.05)。两组术前癌组织已浸透浆膜或术前已有局部淋巴结转移者1年及3年的生存率组间差异有显著意义(P＜0.05)。治疗前两组VEGF水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)，治疗后两组VEGF水平均下降(P＜0.05)，且治疗组下降更为显著(P＜0.05);治疗组治疗前后血清VEGF蛋白表达明显下降，两组比较差异差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:消瘤汤联合腹腔热灌注化疗对结直癌术后患者有一定的防治作用，能改善病人生存期质量，其作用机制之一可能是通过抑制血清中VEGF蛋白表达进

++

而抑制肿瘤血管生成、有效减轻化疗药物不良反应、提高CD4/CD8比值、增强巨噬细胞的吞噬功能而发挥作用。

关键词:腹腔热灌注化疗;消瘤汤;血管内皮生长因子;结直肠癌中图分类号:R735．37文献标识码:B文章编号:1000－1719(2011)04－0595－03

EffectsofXiaoliuDecoctionCombinedwithHyperthemicPeritonealPerfusionChemotherapyonImmuneFunctionandtheProteinExpressionofSerumVascularEndothelialGrowthFactorinColorectalCancerAfterSurgeryTreatedZENGJia-yao1，CHENMing-ke2，JIANGXian-qiang1

(1.DepartmentofGlandsGastrointestinalSurgery，TheFirstAffiliatedHospitaltoGuangxiTraditionalChineseMedicineUniversity，Nanning530023，Guangxi，China;2.2009PostgraduateoftheGuangxiTraditional

ChineseMedicineUniversity，Nanning530023，Guangxi，China)

Abstract:Objective:ToevaluatetheEffectsofxiaoliudecoctioncombinedwithhyperthemicperitonealperfusionchemothera-pyonimmunefunctionandtheproteinexpressionofserumvascularendothelialgrowthfactorinColorectalcanceraftersurgery大，中药处方中的蜈蚣两条、蛤蚧一个，等等。为了规范中医药的计量单位，应对中医药的长度、容积、重量、时间、温度等计量单位与计量方法进行规范。对以上计量单位的名称、内涵、换算关系等进行考证，以便制定准确的标准体系，方便中医药的科研与临床使用。4讨论中医药是我国少数拥有自主知识产权的领域之一，是我国医学科学的特色，我国在制定中医药标准上占据优势。建立中医药标准体系，可以提高中医药产品和服务的质量，增强中医药的国际竞争力。日本、韩国及欧美等国家纷纷开展了传统医药标准的研究制定，通过各种形式和途径争取国际标准制定的主导权。中医药标准化在激烈的国际竞争中面临着新的机遇和挑战。虽然中医药标准化工作已经取得了很多成绩，但总体而言，当前中医药标准体系尚处于初级阶段，其“标准”的形成过程缺乏整体规划和广泛的协商一致，修回日期:2010－09－18

基金项目:广西科技厅自然基金项目(桂科自0728178);广西中医药管

理局中医药科技专项课题项目(GZKZ09－25)作者简介:曾家耀(1964－)，男，广西横县人，主任医师，硕士研究生导

师，学士，研究方向:胃肠、甲状腺、乳腺肿瘤基础外科。

协调性和可操作性不强。中医药标准化工作与中医药事业发展的需要存在一定差距。推进中医药标准化建设需要从系统角度出发，探索标准化与中医药两个不同领域之间的接口技术，将标准化的基本原理和通用方法与中医药的特色有机结合，进而制定出符合中医药自身规律的标准。从而通过学术传承与创新的结合，产、学、研并重，提高中医药的市场份额和促进相关产品的国际贸易。参考文献

［1］郭玉峰，刘保延，姚乃礼，等．基于SNOMEDCT核心构架研究的

J］．中国中医药信息杂志，中医临床术语集标准化特征要素初探［

2008，15(9):96－97．

［2］杨阳，J］．中国中李园白，崔蒙．建立中医临床术语集探索性研究［

2006，13(12):105．医药信息杂志，［3］秦玉龙．从信息学的角度论中医证候规范化研究［J］．天津中医

2003，20(6):35．药，［4］李福凤，王忆勤．在证候标准化研究中数理统计思想和方法的应

J］．辽宁中医杂志，2007，34(2):148－149．用概况［

［5］李晶，J］．中医药学刊，赵莉娟．证的规范化研究临证意义及思路［2003，21(6):938－939．［6］刘艳，程良斌．中医辨证与疗效评价体系客观标准化的思考［J］．

2006，37(5):15．江西中医药，

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辽宁中医杂志2011年第38卷第4期

treated．Methods:104caseswithsurgicaltreatmentofpatientswithadvancedcolorectalcancerwererandomlydividedintotwogroups:TreatmentGroupof54patientsusedtointraperitonealhyperthermicperfusionchemotherapy，oralXiaoliudecoction;thecontrolgroupof50patientsintraperitonealhyperthermicperfusionchemotherapyalonetreatmentprogram;ObservedtwogroupsofQualityofLifeandadversedrugreactionsandchangesinimmunefunctionandserumlevelsofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andVEGFproteinexpression．Results:Thetreatmentgroupaftertreatmenttoimprovethequalityoflifemuchbetterthanthecontrolgroup(P＜0.05);Treatmentgroup，neutropenia，diarrhea，thedegreeofneurologicaltoxicitycomparedwiththecon-aftertrolgrouptherewassignificantdifference(P＜0.05)．ThetreatmentgroupbeforetheCD4+/CD8+as(1.32±0.28)%，treatmentincreasedto(1.58±0.27)%，thedifferencewassignificant(P＜0.05)．Twogroupsofpatientshadpre－canceroustissuesaresaturatedwithserousorregionallymphnodemetastasisbeforesurgeryin2yearsand3yearsofmortalityandrecur-renceratesbetweengroupsdifferencesweresignificant(P＜0.05);VEGFlevelswerenosignificantdifferencebeforetreatment(P＞0.05)，TwogroupsofVEGFleveldeclinedaftertreatment，comparedwithbeforetreatmentwerestatisticallysignificantdifference(P＜0.05)，Andthetreatmentgroupfellmoresignificantly(P＜0.05);VEGFlevelswerenostatisticallysignificant

VEGFlevelswerestatisticallysignificantdifferenceaftertreatment(P＞0.05)，Twodifferencebeforetreatment(P＞0.05)，

groupsofVEGFleveldeclinedaftertreatment，comparedwithbeforetreatmentwerestatisticallysignificantdifference(P＜0.05)．Conclusion:Xiaoliusoupcombinedwithhyperthemicperitonealperfusionchemotherapyonpatientswithadvancedcolorec-canimprovethequalityofpatientsur-talcancerpreventionandtreatmentofpostoperativerecurrencehavesomepreventiveeffect，vival，itsfunctionmechanismpossiblyisthroughsuppressestheVEGFofthebloodserumproteinexpressiontosuppressthetumorbloodvesselproduction，reducethetoxicityofchemotherapydrugs，increasedCD4+/CD8+ratio，enhancedmacrophagephagocy-tosistorealize．

Keywords:hyperthemicperitonealperfusionchemotherapy;xiaoliudecoction;VEGF;colorectalcancer腹腔内局部和区域复发以及肝转移是结直癌术后最主要的致死原因，但其复发及转移的机制尚未明了，而血管内皮生长因(vasvularendothelialgrowthfactor，VEGF)在结直肠癌术后复发作用机制的研究中的作VEGF是具有促进内皮细胞增殖和用日益得到重视，迁徙，增加血管通透性的细胞因子。本研究主要观察消瘤汤联合腹腔热灌注化疗对进展期结直肠癌术后患者免疫功能的影响及研究消瘤汤对VEGF蛋白表达的探索消瘤汤联合腹腔热灌注化疗防治结直肠癌影响，术后复发的作用机制。1资料与方法1.1一般资料本院自2004—2008年1月间住院的进展期Ⅱ期、Ⅲ期结直肠癌患者104例。按随机数字表分为治疗组和对照组，治疗组(消瘤汤联合腹腔内热灌注化疗)54例，其中男40例，女14例;年龄34～73岁，平均54岁;其中腺癌36例，未分化癌8例，鳞状细胞癌4例，其他6例;按TNM分期:Ⅱ期30例，Ⅲ期24例。对照组(单纯腹腔内热灌注化疗)50例，其中男38例，女12例;年龄28～73岁，平均51岁;其中腺癌38例，未分化癌4例，鳞状细胞癌4例，其他4例;按TNM分期:Ⅱ期28例，Ⅲ期22例。两组在性别、年龄、分期具有可比性(P＞0.05)。1.2治疗方法1.2.1术中腹腔热灌注术中根治或姑息性切除癌灶后，于盆腔和上腹壁各置一硅胶管，与热灌注化疗仪的导管系统相连接，缝合切口;由热灌注化疗仪以150mL/min的速度循环灌注化疗液;持续30min，腹腔内温度为(43.0±0.5)℃。1.2.2术后早期热灌注术后第1天开始行腹腔热灌注前用已消毒过的特制引流管清除装置清除灌注，引流管内的纤维组织、凝血块及坏死脱落组织。将体外循环管路装于灌注机由热灌注化疗仪以150mL/min的速度循环灌注化疗液;持续30min，腹腔内温度为(43.0±0.5)℃。每周1次，术后连用3周。1.2.3化疗液的配制5－氟尿嘧啶(5－Fu)1000mg，顺铂80mg加入1500mL生理盐水中完全溶解。1.2.4治疗组治疗组在上述基础上于术后患者排气排便后加口服中药消瘤汤煎剂，药用:党参15g，黄芪15g，薏苡仁20g，田七6g，扶芳藤12g，山慈菇15g，紫河车6g，半枝莲15g等，每日1剂，分3次服用，每2周1个疗程，共用4个疗程。1.3观察指标1.3.1生存质量评定根据Karnofsky评分法所列指标进行观察，治疗后较前评分增加≥10分为提高;治疗后较前评分减少≥10分为降低;评分变化在10以［1］

下者为稳定。1.3.2免疫功能的评定比较治疗前和2个疗程结束后两组患者NK细胞及T细胞亚群指标的变化。所有病例均空腹采集外周静脉血，应用流式细胞仪检测NK、T细胞亚群。1.3.3不良反应观察用药期间观察记录症状、体征。1.3.4血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的测定比较两组治疗前和治疗后组间及组内患者血清血管内皮生长因子(VEGF)指标的变化。所有病例均空腹采集外周静脉血，用ELISA方法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)的水平。1.3.5血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达检测比较两组治疗前和治疗后组间和组内患者血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况。所有病例均空腹采集外周静脉血，用westernblot法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况。1.4统计学处理珋±s表应用PEMS3.0统计软件。计量资料以x2

示，采用t检验，计数资料用χ检验，等级资料经秩和检验及Ridit分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1治疗前后生活质量的比较(KPS评分)结果示两组差异有显著性(P＜0.05)，见表1。辽宁中医杂志2011年第38卷第4期

表1

组别治疗组对照组义。

例数5450

治疗后卡氏评分比较

稳定1221

下降615

总有效率(%)48(88．89)35(70．00)

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P=0.691＞0.05)，义(t=0.398，治疗后两组VEGF蛋P=0.000＜白表达比较差异有统计学意义(t=6.337，0.05);治疗后两组VEGF水平均下降(治疗组t=200.423，P=0.000＜0.05;对照组t=228.417，P=0.000＜0.05)，见表6。表6

珋±s)消瘤汤对血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响(x组别治疗组对照组

例数5450

治疗前19．64±0．6919．59±0．58

治疗后0．49±0．130．63±0．09

升高

3614

u=3.873，P＜0.01，注:经两样本比较秩和检验，差异有统计学意

2.2两组治疗前、后细胞免疫状态比较++

治疗前两组CD4/CD8水平比较差异无统计学意+4

P=0.856＞0.05)，治疗后治疗组CD/义(t=0.182，CD8+水平上升(治疗组t=4.912，P=0.000＜0.05)，P=0.323＞0.05)，对照组下降(t=0.993，治疗后两组++

CD4/CD8水平比较差异有统计学意义(t=6.595，P=0.000＜0.05)，见表2。表2组别治疗组对照组

珋x±s)两组治疗前后CD4+/CD8+水平比较(%，

例数

5450

治疗前1．32±0．281．31±0．28

治疗后1．58±0．271．26±0．22

32.3不良反应观察不良反应按WHO标准分为0～Ⅳ度，Ⅲ～Ⅳ度为［2］

严重不良反应。临床观察到的不良反应多为Ⅰ～Ⅱ度，且停药后均能恢复。未见严重的心、肝、肾毒性。患者耐受性好，无因不良反应而退出治疗者。经Ridit分析，治疗组中性粒细胞减少、腹泻程度、神经毒性等与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，见表3。表3

不良反应

0

Ⅰ

821089

两组患者不良反应情况比较治疗组Ⅱ21274

Ⅲ10001

Ⅳ00000

02625262028

Ⅰ1314141712对照组Ⅱ877107

Ⅲ34233

Ⅳ00100

白细胞减少43血小板减少51

腹泻恶心呕吐神经毒性

423940

P＜0.05。注:两组患者不良反应比较，经Ridit分析，

2.4随访结果对术前癌组织已浸透浆膜或已有局部转移者术后1年、3年各进行1次随访，见表4。表4

3年生存率比较两组术前癌组织已浸透浆膜或已有转移者1年、

例数1816

1年生存例数

155

生存率(%)83．3331．25

例数113

3年生存

生存率(%)61．1118．75

组别治疗组对照组

3年生存率比较，P＜注:经四格表确切概率法检验，两组患者1年、

0.05。

讨论VEGF为目前发现的最强的内皮细胞有丝分裂［3］

原，是刺激肿瘤血管发生、血管重塑、血管芽生的关［4］

键调节因子，亦是日前了解最为深入的血管生成家族。许多体液因子及肿瘤基因都是通过调节VEGF而［5］

促进或抑制肿瘤血管生成。范秋虹等报道VEGF的表达水平是影响结直肠癌患者预后的重要因素，肿瘤血管形成促进了肿瘤的侵袭和转移，这为结直肠癌抗血管形成的靶向治疗提供了分子生物学依据。中医认为，结直肠癌的发生多由气血亏损，脾胃虚损，复因情志失调，饮食失节，痰气瘀毒搏结，而形成肿瘤。结直肠癌术前患者正气已亏或正气虽未亏但邪气偏盛;术后虽驱除病邪，但亦损正气(气血)，而邪气未尽。若此时不注重补气血、扶正驱邪，则邪气会乘虚而入导致结直肠癌术后复发。加上手术的创伤，因此结直肠癌的患者术后一般抵抗力都极差，出现精神不振，纳差，气短乏力，消瘦等气血亏虚之象，故扶正固本，祛瘀散结是中医治疗肿瘤的常用法则。消瘤汤以党参、黄芪、紫河车为君药，以益气血，鼓扶正驱邪的作用，以半枝莲、山慈菇、扶芳藤、舞正气，田七为臣药，活血化瘀、解毒散结，驱除余邪，佐以薏苡仁健脾利湿，全方攻补兼施，气血并重，共奏扶正驱邪之功效。诸药合用共奏扶正驱邪之功。热化疗可以使间隙减小，血管壁肿瘤血管内皮细胞间紧密连接增多，变厚;甚至可以导致新生血管只有完整的基膜而缺乏内皮细胞，通过抑制肿瘤细胞合成与分泌VEGF，从而减少VEGF对血管内皮细胞刺激所引起的血管过度增生。笔者通过初步研究认为消瘤汤联合腹腔热灌注化能改善病疗对结直肠癌术后患者有一定的防治作用，人生存期质量，其作用机制之一可能是通过抑制血清中VEGF蛋白表达进而抑制肿瘤血管生成、有效减轻+

化疗药物不良反应、改善NK细胞的活性及提高CD4/CD8+比值、增强巨噬细胞的吞噬功能而发挥作用，至于消瘤汤联合腹腔热灌注化疗抑制VEGF的蛋白表达的具体作用机制、通过什么信号转导通路，以及它作用的靶细胞都需要我们今后做进一步的探讨。2.5两组血管内皮生长因子(VEGF)的测定治疗前两组VEGF水平比较差异无统计学意义(t=0.268，P=0.789＞0.05)，治疗后两组VEGF水平P=0.000＜0.05;对照组t均下降(治疗组t=16.314，=8.005，P=0.000＜0.05)，且治疗组下降更为显著(t=25.766，P=0.000＜0.05)，见表5。表5组别

珋x±s)两组血管内皮生长因子(VEGF)的比较(pg/mL，

治疗前治疗后差值

99．86±10．5657．15±5．28

例数治疗前治疗后

治疗组54193．68±41．1193．84±18．23对照组50195．82±40．23138．67±30．50

参考文献［1］倪秉强，罗展雄，张志红，等．参芪扶正注射液联合腹腔热灌注化

J］．中国医刊，2008，43(1):50－52．疗治疗晚期腹腔肿瘤［［2］孙燕，石远凯．临床肿瘤内科手册［M］．北京:人民卫生出版社，

2007:142－155．［3］FerraN．Vascularendothelialgrowthfactorasatargetforantrcancer

therapy［J］．Oncologist，2004，1:2．［4］JainRK．Molecularregulationofvesselmaturation［J］．NatMed，2003，9(6):685．［5］范秋虹，徐永兴，冯一中．结直肠癌中血管内皮生长因子的表达及

J］．江苏医药，2008，34(1):18－20．肿瘤血管形成的临床意义［

2.6两组血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的测定治疗前两组VEGF蛋白表达比较差异无统计学意