天津农学院
课 程 论 文
中文题目:生物检定法及其应用
英文题目: Biometric Method and Its Application
学生姓名 王 娟 娟
系 别 基础科学系 专业班级 2008 级 应用化学专业 3班 成绩评定
2011 年11月
摘 要
本文阐述了生物检定法的意义，通过效价检定，生物检定常用方法，和实验设计，来说明生物检定法。还通过举肝素的分析和检测的例子，对生物检定法进行了解读。本文围绕生物检定法的基本概念，应用范围，常用方法，试验设计,对生物检定法进行了一个详细的介绍，使人们能够系统的了解生物检定法，这些介绍从不同方面给使用者提供参考。
关键词：生物检定法；效价检定；试验设计；应用范围；常用方法
Abstract
This paper expounds the significance of biometric method，through verification titer, biometric method in common use, and experimental design, to illustrate biometric method. Through an analysis of the heparin and detection of example, biometric method of understanding to read. This paper focus on the basic concept of biometric method, The scope of application, the commonly used method, experimental design, biometric method for a detailed introduction, to enable people to understand biological verification method of the system, these introduced from the different aspect provide user reference.
Key words: Biometric method; Titer verification; Test design; Application scope;
Commonly used method
生物检定法及其应用
（天津农学院 王娟娟）
1 引言
生物检定属生物法分析，是利用药物对生物体(整体动物，离体组织，微生物等)的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。它以药物的药理作用为基础，统计学为工具，选定特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的计算，从而测得供试品中活性成分的效价。
生物检定包括整体和离体测定，前者直接反映药品对生物的综合作用，但需要动物、需用供试品多，耗时长、精密度和灵敏度较差。后者个体差异小，实验时间较短，精密度和灵敏度较高，能在一定程度上保留药理作用特性，尤其适用于微量激素的测定，缺点是不一定能反映供试品在整体的作用。
对一些理化方法不能测定含量或理化测定不能反映临床生物活性的药物，可用生物检定来控制药物质量。 2 效价检定
2.1 生物反应是生物检定的基础
被测物特有的生物学作用都可作为生物法分析的基础，例如生长素具有促进生长、蛋白质同化、脂肪动员作用，可致糖尿、血酮，影响盐类代谢，已据之设计出多种的生长素的生物学定量法。 2.2 剂量与反应关系
生物检定是利用药物不同剂量引起生物体反应程度的变化以进行药物效价测定的，要计算效价，首先要研究剂量与反应之间的关系。
在生物检定中，剂量与反应间一般都是曲线关系，可通过各种坐标转换的方法，是剂量与反应间呈直线关系，即数学表达式为简单的直线方程:y=a+bx，最便于处理和应用。生物反应基本上可分为以下两种类型，即质反应和量反应。
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2.3 对比检定
生物检定的目的是将供试品（T）和已知效价的标准品（S）进行效力对比，根据他们的反应程度，求供试品的效力相当于标准品效力的倍数，再从中计算出供试品的效价，因此它属于对比检定。
但是，标准品和供试品效价高低的对比，并不直接等于反应高低的对比，因为大多数药物的剂量和反应关系并不成正比例。故不能以反应增减值来代表药物效价或剂量的增减值，标准品与供试品效价的高低对比应该从产生的计量对比关系上去看。生物检定中，供试品（T）和标准品（S）各自的对数剂量和反应（或反映的函数）应呈直线关系，T和S的两条直线应相互平行（T和S的作用性质相同）。
在生物检定中，S和T的等反应剂量大多不是通过实验直接得到的，而是根据药物作用的特性，反应指标的性质，剂量与反应的关系以及生物差异的规律等，运用生物统计的原理设计各种类型的检定方法，从检定结果的资料中计算出来的。对比检定除了测定供试品效价PT外（PT一般以U/mg、U/mL或mg/mL等表示）,还需要对实验结果进行误差估计。生物检定常用可信限（FL）来表示实验误差。一般以概率水平P=0.95时，实验结果的可信限低限anti lg（M—t.SM）、高限anti lg(M+t.SM)的范围来表示。 3 生物检定的常用方法
包括质反应的直接测定法、量反应的平行线测定法和质反应的平行线测定法。 3.1 质反应的直接测定法
直接测定法就是在较短的时间内能够准确地测得各个动物对S和T的最小效量的方法。某些发挥作用较快的药物，将药液由静脉缓慢注入动物体内，或者定时注入一较小的剂量，反应指标（如死亡，心跳停止、痉挛、血液或血浆的凝结等）明确可靠，能清楚地分辨并记录达到该特定反应指标的最小效量（MED）由于动物的个体差异，最小有效量参差不齐，但有一定规律性，直接测定最小有效量的方法虽然比较简单，但受药物性质及给药方法的限制，用在生物检定的例子不多，如洋地黄效价测定的鸽法。
直接测定法的优点是可使用较少量的动物，直接测得T和S的等反应剂量。本法常用的实验设计有两种类型：随机设计和配对交叉设计。
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3.2 量反应平行线测定法
药物对生物体所引起的反应随着药物剂量的增加产生的量变可以测量者，称量反应，如血压、血糖的变化值。
量反应平行线测定法，要求在一定剂量范围内，S和T的对数剂量x和反应或反应的特定函数Y呈直线关系，当S和T的活性组分基本相同时，两直线平行。3.2.1实验设计类型 （1）随机设计
剂量组内不加因级限制，有关因子的各级随即分配到各剂量组。如绒促性素的生物检定。 （2）随即区组设计
各剂量组再分成区组，在剂量组内（区组间）安排碟间、窝间等。如抗生素杯碟法效价测定。除了从总变异中分离剂间变易外，还可以分离区组间变异，减少了实验误差。 3.2.2 效价及误差计算 处理步骤如下：
（1） 将反应值或规定的函数（y）按剂量分组列成方阵表 （2） 特异反应剔除和缺项补足 （3） 方差分析与可靠性测验 （4） 进行效价及可信限计算 4 肝素举例
肝素系由健康牛、猪、羊等食用动物的肝、肺、肠粘膜中提取的有延长凝血时间作用的粘多糖类物质 ，为白色或淡黄色无晶形粉末，有吸湿性，在水中易溶。本品相对分子质量及抗凝血效价随动物种属和脏器来源不同而有差异，相对分子质量为6000—20000，由肝肺提出的肝素，每mg不得低于110U，由肠粘膜提出的肝素，每mg不得低于140U。本品在中性及微碱性中较稳定。
肝素的生物检定法是根据对数剂量与血凝时间的对数呈线性关系而设计的，常用的有兔全血法硫酸钠兔全血法，此外还有使用牛、羊血法等测定肝素效价的方法。
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5 应用范围
(1)在医学范畴中，测量未确认其化学性质的物质 (2)研究不同中介物的功能
(3)判定新药的毒性、副作用及剂量
(4)利用生物去测定某物质的浓度（这种方法已被分析化学的方法所取代） (5)估算特定地区或来源的污染物的性质及浓度，例如废水及都市垃圾 6 展望
生物测定今后的方向是：发展更敏感的短期实验方法和能测定综合因素的方法，并选择适当的方法组成系列检测系统；研究其他生物试验得到的数据如何推演到人；研究外界物质进入机体后如何代谢，进入细胞后起什么作用，如何影响遗传物质，化学结构与毒性有什么关系；探索“三致”的机理等，以为人类战胜癌症、遗传性疾病和衰老提供科学依据。 7 结论
生物检定属生物法分析，是利用药物对生物体(整体动物，离体组织，微生物等)的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。它以药物的药理作用为基础，统计学为工具，选定特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的计算，从而测得供试品中活性成分的效价。进而证明生物检定法的发展前景还是比较好的。
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【参 考 文 献】
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