用于离子导入透皮给药的固体脂质纳米粒凝胶的研究刘卫，户美玲，朱姚亮，郑静南，陈华兵，徐辉碧，杨祥良，Ｉｃ（华中科技入学生命科学与技术学院药物研究所，武汉４３００７４）摘要：目前同际．卜已有将纳米载药系统（ＮＤＤＳ）与离了导入技术结合以增加药物经皮渗透的初步研究，但是，至今尚未系统开展相关基础和应用研究。本文总结了我们课题组近年来将固体脂质纳米粒（ＳＬＮ）凝胶与离子导入技术结合以增加药物经皮渗透的基础和应用研究工作。相关工作已获得幽家发明专利授权，并发表多篇研究论文。关键词：固体脂质纳米粒（ＳＬＮ）；离子导入；透皮给药；卡波姆凝胶：醋酸曲安奈德（ＴＡＡ）；ＣｄＳｅ／ＺｎＳ量子点荧光标记：激光共聚焦显微成像技术（ＣＬＳＭ）经皮给药系统（ＴＤＤＳ）以其独特的优势成为国内外药学领域研究的热点。但是，由于皮肤角质层的屏障作用，火多数药物经皮给药的渗透速率达不到治疗要求，因此寻找有效促进药物渗透皮肤的方法是当前经皮给药系统研究的重要课题。近年来的研究表明，离子导入经皮给药系统是促进药物经皮渗透的有效方法之一。但是，离子导入技术存在的适用药物范围有限（脂溶性、非极性的药物不适合）、药物透皮效率低、需要解决药物的稳定性和用药安全性等问题限制了其广泛应用。纳米载药系统（ＮＤＤＳ）可赋予药物靶向性、缓释性、控释性和智能性等特点，改善药物的溶解度、稳定性，提高药物的生物利用度，降低药物的毒副作用，丰富药物的剂型选择，提高给药的顺应性，已成为现代药物制剂技术研究的前沿和热点。在经皮给药领域，纳米脂质体、微乳、固体脂质纳米粒（ＳＬＮ）等纳米载药系统已经获得成功应用，用于经皮给药的纳米载药系统展示了良好的庇朋前景。１３前，已有纳米载药系统与离子导入技术结合以增加药物经皮渗透的初步研究，但是，至今尚未系统开展相关基础理论研究。用于离子导入经皮给药的纳米载药系统涉及剑一系列基础研究，如适合于离子导入经皮给药的纳米载药系统的制备及性能研究、各种因素（电学条件、纳米粒的化学及电学性能、皮肤生理等）对纳米载药系统离子导入的影响研究、离子导入电场条件下纳米载药系统的促渗机理研究、纳米载药系统在皮肤组织的分布、代谢研究以及纳米载药系统离子导入透皮的数学模型研究等。这些研究将为用于离子导入经皮给药的纳米载药系统的应用打下基础。在近年来开展的纳米载药系统经皮给药相关研究１作基础上，我们创新性地提出将ＳＬＮ纳米载体与离子导入技术结合，以具有良好生物相容性的固、液态脂质为基础材料，通过对纳米粒进行表面电荷修饰，制备适用于离子导入经皮给药的纳米载药系统。并应用生物相容性好、具有优异荧光示踪功能的核／壳结构量子点（ＱＤｓ）荧光探针技术，研究离子导入电场作用下纳米粒在皮肤组织中的迁移、分布以及药物释放行为，考察纳米粒粒径、ｚｅｔａ电位以及电学因素等对药物离子导入经皮渗透的影响。完成的主要工作如下：１．采用薄膜一超声分散法和高压乳匀法制备了载模型药物醋酸曲安奈德（ＴＡＡ）的固体脂质纳米粒（ＴＡＡ—ＳＬＮ），并对不同方法制备的ＴＡＡ－ＳＬＮ的粒径及其分布、表面电荷修饰、微观形貌、微观物相、稳定性以及药物释放性能进行了研究。２．选择已在药剂学上广泛应用的卡波姆２０２０、黄原胶、羟乙基纤维素（ＨＥＣ）、羟丙甲基纤维素（ＨＰＭＣ）和壳聚糖为凝胶基质制备ＳＬＮ凝胶。研究了ＴＡＡ—ＳＬＮ在不同凝胶基质中的分散性和稳定性、流变学性能、电导性能以及在脉冲直流电场下的药物释放行为。研究结果表明，ＴＡＡ－ＳＬＮ在卡波姆凝胶基质中分散性、稳定性良好，ＳＬＮ卡波姆凝胶具有适宜的触变性和剪切粘度，在电场作用下具有适宜的药物释放行为，ＳＬＮ凝胶微观结构在电场作用下稳定，适合于作为离子导入透皮给药的药物载体。３．采用我们自行研制的新型多参数脉冲方波直流离子导入仪（授权号：ＺＬ２００４２００７６５２１．７），研究了ＳＬＮ卡波姆凝胶中ＴＡＡ－ＳＬＮ的ｚｅｔａ电位、粒径等特性以及离子导入电场的电流密度、脉冲频率、脉冲占／空比等电学因素对ＴＡＡ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透的影响规律。４．制备了载ＣｄＳｅ／ＺｎＳ核壳型量子点的固体脂质纳米粒（ＱＤｓ－ＳＬＮ）。高分辨透射电子显微镜（ＨＲ－ＴＥＭ）表征结果提示量子点在ＱＤｓ－ＳＬＮ中仍以结晶态存在；荧光显微镜观察结果显示ＯＤｓ－ＳＬＮ在水溶液中无团聚行为，旱现良好的单分散性；荧光性能研究结果表明，ＱＤｓ－ＳＬＮ的荧光光谱仍然保持了ＣｄＳｅ／ＺｎＳ核壳型量了点对称分布的窄谱特征，具有荧光稳定性好、抗光漂白能力强等特性：大鼠在体荧光标记研究结果表明，ＱＤｓ－ＳＬＮ在大鼠体内具有良好的荧光稳定性和生物相容性。５。制备了不同粒径和ｚｅｔａ电位的ＱＤｓ－ＳＬＮ，采用激光共聚焦荧光显微成像技术（ＣＬＳＭ）和荧光定量方法研究了ＱＤｓ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透以及在皮肤中的分布行为，考察了粒径和ｚｅｔａ电位对ＱＤｓ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透的影响，并对ＱＤｓ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透机制进行了初步探讨。结果表明，ＳＬＮ与离子导入作用产生了协同作用，有效促进了药物的经皮渗透。粒径和ｚｅｔａ电位对ＯＤｓ—ＳＬＮ离子导入经皮渗透产生显著影响：随粒径的增人，ＱＤｓ－ＳＬＮ在不同皮肤组织的滞留量显著减小；正电性的ＱＤｓ－ＳＬＮ在真皮组织的滞留量明显高于负电性的ＱＤｓ－ＳＬＮ，且ｚｅｔａ电位越高，其在真皮组织的滞留量越大。对ＱＤｓ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透机制的初步研究结果表明，ＱＤｓ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透通过表皮和皮肤附属器（毛囊、汗腺、皮脂腺等）两种途径。粒径对ＱＤｓ－ＳＬＮ离子导入经皮渗透途径产生显著影响：小粒径的ＱＤｓ－ＳＬＮ不仅以皮肤附属器作为其经皮渗透的路径，也可以通过角蛋白簇问的“沟壑”透过角质层；较大粒径的ＱＤｓ－ＳＬＮ则主要以皮肤附属器作为其经皮渗透的路径。ＱＤｓ－ＳＬＮ可以作为新型的荧光探针用于纳米载药系统经皮渗透研究。上述研究对于发展用于离子导入经皮给药的纳米载药系统，拓展离子导入经皮给药的药物应用范同，使纳米载药系统和离子导入经皮给药在疾病治疗中得到更为广泛的应用，有重要的理论和实践意义。相关工作已发表论文及获授权专利：［１］ＷｅｉＬｉｕ，ＸｉａｎｇｌｉａｎｇＹａｎｇ，ｅｔａ１．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃａｒｂｏｐｏｌｇｅｌｏｆｓｏｌｉｄｌｉｐｉｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｆｏｒｔｈｅｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｔｉｃｄｅｌｉｖｅｒｙ—Ｐｈａｒｍａｃ—ｅｕｔｉｃｓ，２００８（ｏｎｌｉｎｅ）．ｏｆｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅａｃｅｔｏｎｉｄｅａｃｅｔａｔｅ，！ｎ主皇！旦垒主ｉＱ垒垒！Ｉ】Ｑ坠！卫垒！Ｑ！［２］ＷｅｉＬｉｕ，ＸｉａｎｇｌｉａｎｇＹａｎｇ。ｅｔａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｎａｎｏｃｏｍｐｏｓｉｔｅｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ＣｄＳｅ／ＺｎＳｃｏｒｅ—ｓｈｅｌｌｑｕａｎｔｕｍｄｏｔｓｌｏａｄｅｄｓｏｌｉｄｌｉｐｉｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，ＩＱ堕！坠垦！Ｑ￡垦ｉＱ翼金鱼ｉ曼垒！丛垒主曼！ｉ垦！Ｂ曼墨曼垒！曼ｈ；￡垒！主△，２００７，８４Ａ（４）：１０１８—１０２５．［３］朱姚亮，刘卫，杨祥良等．醋酸曲安奈德纳米结构脂质载体的制备及其透皮吸收研究．生国药型太堂堂拯，２００７，３８（１）：３０—３４．［４］ＷｅｉＬｉｕ，ＸｉａｎｇｌｉａｎｇＹａｎｇ，ｅｔａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｄｒｕｇｏｆｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ—ａｃｅｔｏｎｉｄｅ—ａｃｅｔａｔｅｌｏａｄｅｄｓｏｌｉｄ１ｉｐｉｄｄｅｌｉｖｅｒｙｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｃａｒｂｏｍｅｒｇｅｌ．．ＩＱ坠￡旦垒ｌＱ至￡ｈｉ卫金墨金￡ｈ垦！堕曼曼坠主ｉ璺垒！墨璺ｉ皇ｎ垒曼，２００５，１４（１）：１８－２４．［５］ＷｅｉＬｉｕ，ＸｉａｎｇｌｉａｎｇＹａｎｇ，ｅｔａ１．Ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄｌｉｐｉｄｃａｒｒｉｅｒｓａｓｖｅｈｉｃｌｅｓｆｏｒｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｔｉｃｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ．—Ｐ—ｒｏｃｅｅｄ—ｉ—ｎｇｓｏｆｔｈｅ．２００５，３３１．［６］刘卫，杨祥良等．醋酸曲安奈德固脂纳米粒载药量及包封率的反相液相色谱法测定．分析测试学报，２００５，２４（２）：３５—３８．［７］获授权国家发明专利：杨祥良，刘卫，等．固体脂质纳米粒在制备离子导入透皮给药药物中的应用（ＺＬ２００３１０１１１４４６．３）．［８］获授权国家实用新型专利：刘卫，杨祥良等．多参数离子导入仪（ＺＬ２００４２００７６５２１．７）．本研究工作得到２００６年湖北省杰出人才基金和湖北省重大科技攻关项目（２００４ＡＡ３０ＩＢ０２，２００６ＡＡ３０４Ａ０７）的支持。
